HPV DNA负荷量、辅助性T细胞17、FoxP3+调节性T细胞及炎症因子与高危型HPV感染的相关性分析

目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)DNA、辅助性T细胞17(Th17)、叉头状转录因子3阳性(FoxP3^(+))调节性T细胞(Treg)及宫颈灌洗液中炎症因子与高危型HPV感染的相关性,为高危型HPV感染防治提供新思路。方法将2020年9月至2021年2月该院收治的高危型HPV感染患者100例纳入研究作为研究组,然后将其中50例高危型HPV16/18阳性患者作为HPV16/18组,50例其他12种高危型阳性病例作为其他亚型组。另外,选取同期体检的健康女性作为对照组(n=50)。比较研究组和对照组HPV DNA负荷量、Th17、FoxP3^(+)Treg及宫颈灌洗液中炎症因子[白细胞介素(IL)-10、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-17A]水平,比较HPV16/18组和其他亚型组各项指标水平,比较不同宫颈病变患者各项指标水平。分析各项指标与高危型HPV感染、宫颈病变的相关性,以及对宫颈病变患者高危型HPV感染的诊断价值。结果研究组HPV DNA负荷量、Th17、FoxP3^(+)Treg及宫颈灌洗液中IL-10、TNF-α、IL-17A水平均高于对照组(P<0.05),HPV16/18组各项指标水平均高于其他亚型组(P<0.05)。不同宫颈病变患者各项指标水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。HPV DNA负荷量、FoxP3^(+)Treg、Th17及宫颈灌洗液中IL-10、TNF-α、IL-17A水平与高危型HPV感染分型(HPV16/18=1,其他亚型=2)均呈负相关(P<0.05),与宫颈病变(宫颈上皮内瘤变Ⅰ级=1,宫颈上皮内瘤变Ⅱ级=2,宫颈上皮内瘤变Ⅲ级=3,宫颈癌=4)均呈正相关(P<0.05)。各项指标联合诊断高危型HPV16/18阳性的曲线下面积(AUC)为0.911(95%CI:0.837~0.959),大于各指标单独诊断。结论高危型HPV感染患者HPV DNA负荷量、Th17、FoxP3^(+)Treg及炎症因子水平异常,与高危型HPV感染分型、宫颈病变密切相关,而且HPV DNA负荷量与Th17、FoxP3^(+)Treg、炎症因子相关,各项指标联合检测可为临床防治高危型HPV持续感染提供可靠依据。

血清中IL-33在1型糖尿病患儿中的表达情况及其与部分Th1/Th2细胞因子的相关性研究

目的 检测1型糖尿病患儿血清中白细胞介素33(IL-33)的表达水平,研究其与部分Ⅰ型T辅助细胞/Ⅱ型T辅助细胞(Th1/Th2)细胞因子的相关性。方法 选取2020年3月至2022年3月在秦皇岛市妇幼保健院内分泌科接受治疗的125例1型糖尿病患儿为研究对象,将其纳入1型糖尿病患儿组,另选取120例同期健康体检儿童作为对照组。两组研究对象血清IL-33、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素10(IL-10)表达水平通过酶联免疫吸附(ELISA)法检测;比较两组研究对象TNF-α/IL-4、TNF-α/IL-10、IL-2/IL-4、IL-2/IL-10的比值;Pearson相关性分析患儿血清IL-33的表达水平与部分Th1/Th2细胞因子平衡的相关性;采用logistic回归分析患儿发生1型糖尿病的影响因素。结果 与对照组相比,1型糖尿病患儿组总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、空腹血糖(FBG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平均升高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平降低(P<0.05)。与对照组相比,1型糖尿病患儿组IL-33、IL-4、IL-10表达水平降低,TNF-α、IL-2表达水平及TNF-α/IL-4、TNF-α/IL-10、IL-2/IL-4、IL-2/IL-10值升高(P<0.05)。Pearson相关性分析结果发现,1型糖尿病患儿血清IL-33表达水平与TNF-α/IL-4、TNF-α/IL-10、IL-2/IL-4、IL-2/IL-10呈负相关(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,IL-33表达水平(OR=0.725,95%CI:0.571~0.921,P=0.008)、IL-4表达水平(OR=0.694,95%CI:0.533~0.904,P=0.007)、IL-10表达水平(OR=0.715,95%CI:0.559~0.915,P=0.008)是患儿发生1型糖尿病的保护因素,FBG水平(OR=1.445,95%CI:1.116~1.872,P=0.005)、TNF-α表达水平(OR=1.463,95%CI:1.145~1.869,P=0.002)、IL-2表达水平(OR=2.007,95%CI:1.322~3.047,P=0.001)是患儿发生1型糖尿病的危险因素。结论 血清IL-33水平与部分Th1/Th2细胞因子平衡状态具有相关性,且IL-33、IL-4、IL-10、FBG、TNF-α、IL-2等表达水平是儿童发生1型糖尿病的影响因素。

阿胶对哮喘大鼠气道炎症及外周血Ⅰ型/Ⅱ型T辅助细胞因子的影响

目的探讨阿胶对哮喘大鼠Th1/Th2细胞因子的影响及其防治哮喘的作用机制。方法60只Wistar大鼠随机分为生理盐水(NS)对照组(A),低剂量阿胶组(B),中剂量阿胶组(C),高剂量阿胶组(D),斯奇康组(E),哮喘对照组(F)。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血液中白介素-4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)水平的变化。HE染色观察肺组织病理学变化。结果与NS对照组比较,哮喘模型组血液中IFN-γ水平显著降低(P<0.01)。与哮喘模型组比较,阿胶低、中剂量组和斯奇康组IL-4水平显著降低(P<0.0 1),NS对照组、阿胶低、中剂量组和斯奇康组人鼠肺组织嗜酸性细胞浸润程度也明显减轻。结论哮喘大鼠存在Th2型细胞优势反应,而阿胶可能具有抑制哮喘Th2细胞优势反应的作用,从而调节Th1/Th2型细胞因子平衡,同时,可减轻哮喘大鼠肺组织嗜酸性细胞炎症反应。

新银灵颗粒对寻常型银屑病血热证患者外周血Th22细胞及其细胞因子的影响

目的观察新银灵颗粒对寻常型银屑病(PsV)血热证患者外周血辅助性T细胞22(Th22)及其细胞因子的影响。方法选取2019年12月—2020年12月在天津市中医药研究院附属医院皮肤科门诊就诊的30例PsV血热证患者为研究组,10例健康志愿者为对照组。研究组采用新银灵颗粒治疗8周,分别于治疗前后采取外周血,流式细胞术检测外周血Th22细胞比例,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测白细胞介素-22(IL-22)水平,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测IL-22 mRNA表达。结果经过新银灵颗粒治疗,研究组与治疗前比较,银屑病面积及严重程度指数(PASI)评分、中医证候评分和皮肤病生活质量指数评分(DLQI)均显著下降(均P<0.01);治疗后外周血中Th22细胞比例、IL-22及IL-22信使RNA(mRNA)表达水平均显著降低(P<0.01)。结论新银灵颗粒可能通过抑制Th22细胞活化、降低Th22细胞因子表达,从而治疗PsV血热证。

二型免疫细胞(Th2/ILC2)在肺部过敏性炎症中作用机制的研究进展

二型炎症反应主要由二型免疫细胞和二型细胞因子介导,例如二型辅助型T细胞(Th2细胞)和二型先天样淋巴细胞(ILC2细胞),以及IL-4、IL-5、IL-13等。二型炎症反应在体液免疫、抗寄生虫、中和毒素、组织损伤修复和再生等过程中发挥重要调控作用,但其也有促进疾病发生的作用。目前认为二型炎症反应主要在皮肤、呼吸道、消化道和脂肪等组织中发挥生理和病理性作用,是导致过敏性疾病发生的主要炎症反应类型。呼吸道由于其特殊的免疫微环境,是二型炎症高发区域,涉及的疾病包括慢性鼻窦炎、过敏性鼻炎、过敏性哮喘、过敏性支气管肺曲霉菌病、嗜酸性粒细胞增多的慢性阻塞性肺疾病等。本文将重点综述二型炎症反应中的关键免疫细胞Th2和ILC2细胞在肺部过敏性炎症中的最新研究进展和过敏性炎症相关疾病靶向治疗的情况。

骨形态构建蛋白2型受体下调单核细胞趋化蛋白1/CC类趋化因子受体2通路对哮喘小鼠气道炎症和Th1/Th2平衡的影响

目的探究骨形态构建蛋白2型受体(BMPR2)对小鼠哮喘模型气道炎症和Th1/Th2平衡的影响及其机制。方法于2021年9月至2022年11月选用24只C57BL/6小鼠尾静脉注射BMPR2腺病毒,随后卵清蛋白(OVA)致敏和激发建立哮喘小鼠模型;采用随机数字表法分为对照组(生理盐水替代OVA造模)、OVA模型组(OVA诱导小鼠哮喘模型)、OVA+载体(Vector)组(空载慢病毒处理的OVA哮喘模型小鼠)、OVA+BMPR2组(BMPR2过表达慢病毒处理的OVA哮喘模型小鼠),每组6只。收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织。免疫组织化学检测肺组织BMPR2表达水平;苏木精-伊红染色观察肺组织病理学改变;瑞氏染色后计数BALF中各类炎症细胞数目;酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒检测BALF中白细胞介素(IL)-4,IL-5和IL-13炎症因子水平;蛋白质印迹法检测肺组织和气道上皮细胞16HBE中BMPR2、单核细胞趋化蛋白-1(MCP1)及其受体CC类趋化因子受体2(CCR2)蛋白表达水平。免疫共沉淀实验检测BMPR2与MCP1相互作用。结果与对照组相比,OVA模型组肺组织BMPR2(0.36±0.05比1.04±0.04)显著降低(P<0.01);小鼠肺泡破坏程度严重,肺组织有大量的淋巴细胞浸润;BALF中炎症细胞总数[(93.25±9.32)×10^(4)个/毫升比(4.79±0.41)×10^(4)个/毫升,P<0.001]、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞均升高;Th1相关炎症因子γ干扰素(IFN-γ)水平降低,Th2相关炎症因子IL-4,IL-5和IL-13水平升高。过表达BMPR2可降低肺泡破坏程度和淋巴细胞浸润程度。与OVA+Vector组相比,OVA+BMPR2组BALF中炎症细胞总数、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞均降低;ELISA结果表明,OVA+BMPR2组BALF中IFN-γ水平升高,IL-4,IL-5和IL-13水平降低,提示过表达BMPR2可上调Th1百分比,下调Th2细胞百分比。进一步研究表明,BMPR2过表达显著下调了MCP1及其受体CCR2的表达水平,且BMPR2与MCP1存在相互作用。结论BMPR2可通过下调MCP1/CCR2通路降低哮喘小鼠气道炎症,并调节Th1/Th2平衡。

芦荟多糖对自身免疫性甲状腺炎小鼠辅助型T细胞亚群的影响

目的探究芦荟多糖对自身免疫性甲状腺炎(autoimmune thyroiditis,AT)小鼠辅助型T细胞亚群的影响。方法将50只健康无特定病原体的BALB/C雌性小鼠。随机分为芦荟多糖低、中、高剂量组、AT组、对照组,每组各10只。其中对照组小鼠均为健康小鼠,AT组及芦荟多糖低、中、高剂量组均为AT小鼠(使用猪甲状腺球蛋白免疫联合高碘水法建立小鼠AT模型),且芦荟多糖低、中、高剂量组采取药物治疗。比较5组小鼠的甲状腺功能指标[促甲状腺激素(thyroid‑stimulating hormone,TSH)、游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)、游离四碘甲状腺原氨酸(free tetraiodothyronine,FT4)]。分别比较小鼠外周血和脾脏组织的CD3^(+)CD8^(+)IL‑4^(+)(白细胞介素‑4,interleukin‑4)辅助T淋巴细胞和CD3^(+)CD8^(+)IFN‑γ^(+)(干扰素,interferon)辅助T淋巴细胞水平。结果在芦荟多糖治疗4周后,芦荟多糖低、中、高剂量组及AT组小鼠,TSH水平较对照组高,而FT3、FT4水平较对照组低(P<0.05)。治疗4周后,与芦荟多糖低、中、高剂量组比较,AT组TSH水平降低,而FT3、FT4水平升高(P<0.05)。治疗4周后,与对照组比较,AT组、芦荟多糖低、中、高剂量组小鼠外周血及脾脏组织的CD3^(+)CD8^(+)IL‑4^(+)辅助T淋巴细胞和CD3^(+)CD8^(+)IFN‑γ^(+)辅助T淋巴细胞水平升高(P<0.05)。治疗4周后,与AT组比较,芦荟多糖低、中、高剂量组小鼠外周血及脾脏组织的CD3^(+)CD8^(+)IL‑4^(+)辅助T淋巴细胞和CD3^(+)CD8^(+)IFN‑γ^(+)辅助T淋巴细胞水平降低(P<0.05)。结论芦荟多糖可有效改善AT小鼠的甲状腺功能,同时还可降低辅助型T细胞亚群的表达。

高危型HPV感染不孕症女性外周血T淋巴细胞亚群分布特征及辅助生殖临床结局

目的:探讨高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染不孕症女性外周血T淋巴细胞亚群分布特征及应用辅助生殖技术的临床效果和妊娠结局。方法:选取2020年5月—2022年10月我院收治的62例宫颈高危型HPV感染不孕症患者为试验组,同时选取50例HPV感染阴性不孕症患者为参照组,试验组患者根据感染的HPV类型分为HPV16型组(29例)、HPV18型组(21例)、其他(12例)。患者入院后均采集外周静脉血,同时均接受我院体外受精—胚胎移植进行辅助生殖,随访观察妊娠结局。比较两组患者外周血T淋巴细胞亚群水平、B细胞百分比、NK细胞百分比及CD4^(+)/CD8^(+)分布特征;比较试验组不同HPV感染类型及妊娠成功、失败患者外周血T淋巴细胞亚群水平及B细胞、NK细胞百分比。结果:试验组患者外周血CD3^(+)、CD4^(+)、NK细胞百分比及CD4^(+)/CD8^(+)比值低于参照组,CD8^(+)高于参照组(P<0.05),两组外周血B细胞百分比无明显差异(P>0.05)。HPV16、HPV18及感染HPV其他类型的患者外周血CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)比值及B细胞、NK细胞百分比无明显差异(P>0.05)。试验组CD4^(+)/CD8^(+)比值在1.0~2.0正常范围的比例明显低于参照组,<1.0、>2.0的患者占比高于参照组(P<0.05)。对试验组随访统计显示,妊娠成功30例(48.39%),妊娠失败32例(51.61%),失败组患者外周血CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)比值及B细胞、NK细胞百分比低于参照组,CD8^(+)高于参照组(P<0.05)。结论:高危型HPV感染不孕患者外周血T淋巴细胞亚群明显降低,存在免疫功能紊乱状态,但与HPV感染类型无关,而辅助生殖妊娠失败的患者免疫功能紊乱状态较成功的患者更为严重。

α1-抗胰蛋白酶、微小RNA-155与人类免疫缺陷病毒-1感染患者Ⅰ型辅助性T细胞/Ⅱ型辅助性T细胞细胞因子的相关性

目的探究α1-抗胰蛋白酶(α-1-AT)、微小RNA-155(miR-155)与人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)感染患者Ⅰ型辅助性T细胞(Th1)/Ⅱ型辅助性T细胞(Th2)细胞因子的相关性。方法选取2019年4月至2020年4月武汉市金银潭医院接诊的85例HIV-1感染患者(HIV-1感染组)作为研究对象。另外选取同期武汉市金银潭医院诊治的85例HIV-1阴性的体检健康者作为健康组。检测两组α-1-AT、miR-155表达量及Th1/Th2细胞因子水平。结果与健康组相比,HIV-1感染组白细胞介素(IL)-2、γ干扰素(INF-γ)水平较低,α-1-AT、miR-155表达量及IL-4、IL-10水平较高,差异具有统计学意义(P<0.05)。性行为感染、有生殖器疱疹、有淋巴瘤患者α-1-AT、miR-155表达量高于血液传播、母婴传播感染途径以及无生殖器疱疹、无淋巴瘤患者(P<0.05)。α-1-AT、IL-2,α-1-AT、INF-γ,miR-155、IL-2,miR-155、INF-γ之间呈负相关;α-1-AT、IL-4,α-1-AT、IL-10,miR-155、IL-4,miR-155、IL-10之间呈正相关。结论α-1-AT、miR-155在HIV-1感染患者外周血中表达异常,与其传播途径、有无生殖器疱疹、有无淋巴瘤等呈线性相关,可能共同参与此病的进展。

哮喘患者急性加重期滤泡辅助型T细胞的分化水平及临床意义

目的观察滤泡辅助型T细胞(Tfh细胞)在支气管哮喘患者急性发作期和治疗后的分化水平,探讨Tfh细胞是否在哮喘中存在分化异常及其临床意义。方法采用流式细胞术检测健康志愿者、哮喘患者急性发作期及治疗后外周血单个核细胞中CD4~^+CXCR5~^+T细胞、CD4~^+ICOS^+T细胞、CD4~^+CXCR5~^+ICOS~^+T细胞的比例;反转录PCR法检测CD4^+T细胞中Bcl-6mRNA的水平;ELISA检测血浆白细胞介素21(IL-21)的水平;采用直线回归统计学分析IL-21与患者第一秒用力呼气容积/用力肺活量百分比(FEV1/FVC)及第一秒用力呼气容积/预计值百分比(FEV1/Pre)之间的相关性。结果哮喘患者CD4~^+CXCR5~^+细胞、CD4~^+CXCR5~^+ICOS~^+T细胞比例、Bcl-6 mRNA表达水平、IL-21水平均显著高于正常对照组;治疗后哮喘患者CD4~^+CXCR5~^+细胞、CD4~^+ICOS~^+细胞、CD4~^+CXCR5~^+ICOS~^+T细胞表达比例、Bcl-6 mRNA表达水平、IL-21水平均显著低于急性发作时;哮喘患者IL-21表达水平与患者FEV1/FVC、FEV1/Pre存在负相关。结论 Tfh细胞在哮喘急性期存在分化增强,治疗后Tfh细胞分化减弱,提示Tfh细胞可能参与哮喘的炎症反应,其水平可能反映哮喘患者气道受限程度。

人工虫草对2型糖尿病早期肾病辅助T细胞1/2平衡的影响

目的探讨人工冬虫夏草(简称虫草)对早期2型糖尿病肾病(T2DN)患者辅助T细胞(Th)1/2细胞的影响。方法选择60例T2DN患者,随机分为两组,虫草治疗组30例,在原用药物基础上加用人工虫草(金水宝胶囊)3粒,每天3次,口服,连用12 w。常规治疗组30例,原用药继续,不加用虫草。健康对照组20例。检测T2DN患者治疗前后及健康受检者外周血Th、24 h尿微量白蛋白排泄率(UAER)及高敏C反应蛋白(hs-CRP)的表达。结果 T2DN组外周血CD4+IFN-γT1细胞,Th1/Th2比值,hs-CRP,UAER均高于健康对照组(P<0.05);T2DN组CD4+IL-4Th2细胞低于健康对照组(P>0.05);虫草治疗组治疗后外周血CD4+IFN-γT细胞,Th1/Th2比值,hs-CRP,UAER较常规治疗组下降更明显(P<0.05),CD4+IL-4 Th2细胞数较常规治疗组升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论虫草通过调节T2DN患者外周血Th1/Th2淋巴细胞的失衡,减轻其免疫炎症反应,从而减轻尿白蛋白的排出,有利于早期肾功能的恢复。

不同分期老年2型糖尿病肾病患者外周血调节性和辅助性T细胞的表达

目的分析不同分期老年2型糖尿病肾病(DN)患者外周血调节性和辅助性T细胞的表达水平。方法选择老年DN患者38例(早期DN23例和中、晚期DN15例),另择同期老年糖耐量异常(IGT)患者19例,同期健康老年人21例为对照组,入选对象均接受了外周血调节性T细胞(CD4+CD25+Treg和CD4+CD25+Foxp3+Treg)和辅助性T细胞(CD+3、CD+4、CD+8、CD+4/CD+8)检测。结果不同分期的老年DN患者外周血CD4+CD25+Treg和CD4+CD25+Foxp3+Treg水平均明显低于IGT组和对照组,而前两者的外周血CD+4水平和CD+4/CD+8比值均显著高于对照组,CD+8水平显著低于对照组(P<0.05,P<0.01)。中、晚期DN患者的外周血CD4+CD25+Treg和CD4+CD25+Foxp3+Treg水平均明显低于早期DN组,而CD+4水平和CD+4/CD+8比值均显著高于早期DN组(P<0.05,P<0.01)。结论老年DN患者存在明确的外周血调节性T细胞和辅助性T细胞异常表达,并随病情分期升级而进一步失衡。

血必净注射液对脓毒症大鼠Claudin4蛋白和辅助性T淋巴细胞1型表达的影响

目的探讨血必净注射液对脓毒症大鼠肺组织Claudin4蛋白表达的影响。方法健康成年Sprague-Dawley大鼠100只,体重(250±25)g,随机分入4组,每组25只:假手术组大鼠只开腹、关腹和复苏,不行盲肠结扎穿孔术(CLP);脓毒症组大鼠行CLP;血必净3h组大鼠于CLP后3h腹腔内注射血必净注射液2mL/kg;血必净12h组大鼠于CLP后12h腹腔内注射血必净注射液2mL/kg。每组随机留取8只大鼠进行生存率分析。假手术组、脓毒症组、血必净3h组大鼠在术后6、15和24h,血必净12h组大鼠在术后15和24h各随机处死5只,分别留取血液和肺组织标本,测定肺组织湿/干质量比(肺水肿指数),对肺组织进行病理学观察并进行肺损伤病理学评分,测定血清促炎细胞因子IL-6和TNF-α水平,采用免疫组织化学方法测定肺组织骨架蛋白Claudin4蛋白表达情况,采用流式细胞术检测辅助性T淋巴细胞1型(Th1)在外周血单核细胞中的表达情况。结果假手术组、脓毒症组、血必净3h组和血必净12h组大鼠的术后72h存活率分别为8/8、0、1/8和0,血必净3h组显著高于脓毒症组(P<0.01),血必净12h组与脓毒症组的差异无统计学意义(P>0.05)。假手术组大鼠术后各项检测指标均基本不变。脓毒症组、血必净3h组和血必净12h组大鼠术后15和24h的肺水肿指数,以及术后6、15和24h的肺损伤病理学评分、血清IL-6和TNF-α水平、肺组织Claudin4蛋白表达阳性率均显著高于假手术组同时间点(P值均<0.01);脓毒症组大鼠术后6、15和24h,以及血必净12h组大鼠术后15和24h的肺水肿指数、肺损伤病理学评分、血清IL-6和TNF-α水平、肺组织Claudin4蛋白表达阳性率均显著高于血必净3h组同时间点(P值分别<0.05、0.01);脓毒症组与血必净12h组术后同时间点间上述指标的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。脓毒症组和血必净3h组大鼠术后各时间点的外周血单核细胞中Th1的表达率均显著高于假手术组同时间点(P值均<0.01);脓毒症组大鼠术后6和15h的外周血单核细胞中Th1的表达率均显著高于血必净3h组同时间点(P值均<0.01),术后24h的外周血单核细胞中Th1的表达率显著低于血必净3h组同时间点(P<0.05)。结论早期使用血必净治疗可以有效地抑制脓毒症大鼠肺组织的炎性反应,减轻肺损伤,提高大鼠存活率,其可能机制与抑制肺组织Claudin4蛋白表达,降低肺泡通透性有关。

克拉霉素对铜绿假单胞菌慢性肺部感染小鼠辅助性T淋巴细胞1型/辅助性T淋巴细胞2型免疫平衡的调节作用

目的探讨克拉霉素对铜绿假单胞菌(PA)慢性肺部感染小鼠肺组织辅助型T淋巴细胞(Th)1/Th2免疫平衡的调节作用。方法将54只小鼠随机分入克拉霉素组、0.9%氯化钠溶液组和对照组。克拉霉素组和0.9%氯化钠溶液组通过小鼠气道接种由包裹PA的琼脂糖珠方法建立的PA慢性肺部感染模型,自建模后第7天起分别给予克拉霉素和0.9%氯化钠溶液治疗,对照组小鼠经气道接种无菌琼脂糖珠给予0.9%氯化钠溶液。分别于建模后第7、10、14天处死小鼠。标本进行肺组织细菌培养、病理学检查、支气管肺泡灌洗液(BALF)中γ-干扰素(IFN-γ)/白细胞介素(IL)-4水平测定和肺组织转录因子T-betmRNA/GATA-3mRNA表达水平分析。结果克拉霉素组小鼠在治疗后慢性肺部感染的症状明显改善。经气道接种后第7天,0.9%氯化钠溶液组和克拉霉素组BALF中IFN-γ、IL-4水平均显著高于对照组(P值均<0.05)。气道接种后第14天,克拉霉素组的IFN-γ水平显著低于0.9%氯化钠溶液组(P<0.05)。气道接种后第10、14天,克拉霉素组BALF中IL-4水平均显著高于0.9%氯化钠溶液组和对照组同时间点(P值均<0.05),而IFN-γ/IL-4比值均显著低于0.9%氯化钠溶液组同时间点(P值均<0.05)。气道接种后第7、10天,克拉霉素组与0.9%氯化钠溶液组的Th1、Th2细胞转录因子T-betmRNA、GATA-3mRNA表达水平相近,均显著高于对照组(P值均<0.05)。气道接种后第14天,克拉霉素组T-betmRNA表达水平、T-betmRNA/GATA-3mRNA比值均显著低于0.9%氯化钠溶液组(P值均<0.05)。结论在PA慢性肺部感染初期采用克拉霉素治疗可使小鼠肺组织的Th1/Th2平衡向Th2偏移,有利于缓解气道炎症。

全身型幼年特发性关节炎患儿T辅助细胞及细胞因子变化

目的探讨辅助性T淋巴细胞及相关细胞因子在全身型幼年特发性关节炎(SoJIA)患儿中表达的变化。方法 2012年1月至2013年6月住院的36例SoJIA患儿,按疾病活动情况分为活动期组、缓解期组,另以健康儿童20例为对照组。比较各组流式细胞技术检测的外周血单个核细胞中Th1、Th2和Th17细胞比例,及酶联免疫吸附法检测的血清INF-γ、IL-4、IL-17水平的差异。结果 SoJIA活动期组、缓解期组和对照组的Th17占CD3+CD8-细胞比例分别为(3.30±2.15)%、(1.78±1.14)%和(1.22±1.14)%,差异有统计学意义(H=14.437,P=0.001),活动期组高于缓解期组和对照组,差异有统计学意义(P均<0.05);三组间Th1、Th2占CD3+CD8-细胞比例的差异无统计学意义(P>0.05)。SoJIA活动期组、缓解期组和对照组的血清IL-17水平分别为(125.82±45.87)pg/ml、(57.79±25.84)pg/ml和(50.02±18.37)pg/ml,差异有统计学意义(F=31.82,P=0.000),活动期组高于缓解期组和对照组,差异有统计学意义(P均<0.05);三组血清INF-γ和IL-4水平的差异无统计学意义(P>0.05)。结论获得性细胞免疫参与SoJIA发病,且Th1、Th17细胞比例升高及其相关细胞因子变化与SoJIA患儿疾病活动有关。

循环滤泡型辅助性T淋巴细胞及IL-21在自身免疫性肝炎中的初步研究

目的检测外周血滤泡型辅助性T淋巴细胞百分率(Tfh)及细胞上CCR7、PD-1、IL-21R等分子的表达水平,血清IL-21的表达水平,为进一步研究Tfh细胞及其相关分子在自身免疫性肝炎发病机制中的作用提供实验依据。方法收集20例自身免疫性肝炎患者与20例健康志愿者外周抗凝血,流式细胞仪检测循环Tfh细胞百分率与细胞膜上CCR7,PD-1,IL-21R等分子的表达水平,并进一步分析CCR7+Tfh亚型细胞上PD-1、IL-21R等分子的表达水平,同时ELISA检测外周血血清IL-21的水平;统计分析健康对照与自身免疫性肝炎患者的外周血Tfh细胞百分率、细胞膜上PD-1与IL-21R分子表达水平,血清IL-21表达水平的差异。结果 1)循环Tfh细胞百分率在健康对照(4.793%±1.5609%)与自免肝患者(8.915%±3.235%)具有显著性差别;循环Tfh细胞表达的PD-1分子(健康对照:91.173%±5.032%,自免肝患者:5.177%±3.267%)与IL-21R(健康对照97.625%±1.137%,自免肝患者27.800%±7.918%)具有显著性差别;2)外周血血清IL-21水平[健康对照(:444.75±75.05)pg/ml,自免肝患者(:862.80±109.83)pg/ml]也具有显著性差别;3)自身免疫性肝炎患者循环Tfh细胞百分率与血清GGT、ALP呈正相关与细胞上的PD-1表达水平呈负相关,后者与血清TB呈正相关。结论 Tfh细胞及其表达的相关分子(PD-1,IL-21R)在健康人与自免肝患者的表达水平是不同的,可能参与介导了自身免疫性肝炎的发生与发展。

T-bet重组腺病毒调节哮喘小鼠辅助性T细胞1型/2型免疫平衡

目的研究静脉注射T-bet重组腺病毒(AdT-bet)对小鼠哮喘模型过敏性气道炎症及辅助性T细胞1型/2型(Th1/Th2)免疫失衡的影响。方法随机将36只C57BL/6小鼠分为AdT-bet治疗(A)组、模型对照(B)组、正常对照(C)组。以卵蛋白、氢氧化铝免疫建立哮喘模型,A组激发前尾静脉注射1×10~8 pfu/100μL的AdT-bet,各组激发后进行肺泡灌洗分析细胞组分,分离肺T淋巴细胞测定细胞因子分泌水平,以流式细胞仪检测CD3^+、CD4^+T细胞比例及表达γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素(IL)-4、IL-5的比例,比较各组肺组织学改变。结果A组与B组相比:①明显抑制抗原激发后气道内嗜酸性粒细胞的浸润(0.004±0.003比0.221±0.067,P<0.01);②明显抑制肺T淋巴细胞产生IL-4[(22±12)pg/mL比(170±28)pg/mL]、IL-5[(16±13)pg/mL比(330±30)pg/mL],增加了IFN-γ[(2100±360)pg/mL比(60±50)pg/mL]的产生,差异均有统计学意义(P值均<0.01);③肺T淋巴细胞CD4^+IFN-γ%及IFN-γ^+/IL-4^+明显升高(P值均<0.01),而CD4^+IL-4^+%明显下降(P<0.01);④明显抑制哮喘鼠气道内及肺泡内的过敏性炎症反应。结论激发前静脉应用AdT-bet对哮喘小鼠过敏性气道炎症有明显的防治作用,其机制可能与表达的T-bet上调Th1/Th2比值,从而调整了免疫平衡有关。

辅助性T细胞17/调节性T细胞失衡在儿童激素敏感型原发性肾病综合征发病机制中的研究

原发性肾病综合征(primary nephrotic syndrome,PNS)约占小儿时期NS总数的90%[1],临床上≥85%PNS患儿的肾脏病理改变为微小病变,对糖皮质激素治疗敏感.现阶段对儿童激素敏感型原发性肾病综合征(steroid-sensitive nephrotic syndrome,SSNS)的病因和发病机制尚不明确.有学者认为,可能与淋巴细胞免疫功能紊乱有关[2],主要表现为T细胞数目异常和各亚群间的比例失衡[3].因此,本研究通过检测SSNS患儿在激素治疗前后与健康对照者外周血的辅助性T细胞(Th/17)调节性T细胞(Treg)水平,旨在研究Th17/Treg细胞失衡在儿童SSNS发病过程中的作用机制以及糖皮质激素对Th17/Treg细胞免疫平衡的影响.