茭白中过氧化物酶的部分纯化及其性质的初步研究

采用硫酸铵沉淀及DEAE-SepharoseFF离子交换色谱对茭白中过氧化物酶进行了初步纯化,得到了部分纯化的两种过氧化物酶(组分A和组分B),其中组分A为酸性过氧化物酶,而组分B为碱性过氧化物酶。两种过氧化物酶的最适pH分别为5.0(A)和5.5(B),同时两种酶的热稳定性有一定的差异。

生姜蛋白酶的部分纯化及酶学性质研究

对姜块中的生姜蛋白酶进行部分纯化 ,并对其主要酶学性质进行了研究 .以酪蛋白为底物时 ,其最适 p H值为 6 .0 ,最适温度为 6 0℃ ,3 0℃下保温 3 0 m in,酶活力不变 ,高于72℃酶活力迅速下降 ,6 0℃、75℃、80℃时 ,该酶的半衰期分别为 17、12和 3 min,Km值为0 .2 70 m mol/L;二硫苏糖醇 DTT 、乙二胺四乙酸二钠 EDTA 对酶有激活作用 ;对氯汞苯甲酸 PCMB 、氯化锌、硫酸铜等对酶有抑制作用 ;氯化钙、硫酸镁。

用于农药残留测定的植物酯酶部分纯化的研究

确定了DEAE-纤维素(DE-52)部分纯化小麦酯酶粗酶的条件,绘出了该酶的洗脱图谱,找出了两个所需的酶活力峰,测定出其酶活力分别为8.2942 U、1.7214 U。算得酶的提纯倍数为2.817、回收率为35.18%。

蒺藜皂甙的提取及部分纯化研究

对蒺藜皂甙的提取、索氏梯度分离和大孔树脂部分纯化进行了系统研究。结果表明,70%乙醇提取法优于水提醇沉法,得率为1.98%;经大孔树脂纯化,皂甙主要存在于40%,50%,55%,60%,65%乙醇洗脱液中,以40%乙醇洗脱液中皂甙含量最高;用薄层分析证实皂甙得到了纯化。

不溶性草酸氧化酶的部分纯化研究

以大麦麦麸为原料,对不溶性草酸氧化酶进行了部分纯化,比较了酶法与滴定法测定草酸的方法。结果表明,粗酶经酸热变性、淀粉酶水解、NaCl洗涤、去离子水洗涤4个步骤的纯化后,不溶性草酸氧化酶的纯化倍数为1.51;酶法与滴定法测定草酸无显著性差异。该技术有望用于草酸检测试剂盒的开发。

金属离子对菜青虫酚氧化酶活力的影响

以菜青虫五龄幼虫为材料,冰浴匀浆,在4℃下8000r/min离心,取上清液,经35%饱和(NH4)2SO4沉淀,经SephadexG100凝胶柱层析等步骤分离,获得部分纯化的菜青虫酚氧化酶制剂.研究多种金属离子对该酶活性的影响,结果表明:碱金属离子K+、Li+和Na+对酶活力没有影响.碱土金属离子Mg2+、Ba2+和Ca2+对酶有激活作用,激活作用的大小顺序为Mg2+>Ca2+>Ba2+.过渡金属离子Mn2+、Co2+、Cu2+和Zn2+对酶活力的影响呈现不同的效应,Mn2+、Co2+和Zn2+对该酶活性有不同程度的激活作用,Cu2+浓度在0.10mmol/L内对该酶有一定的激活作用,浓度大于0.13mmol/L为抑制作用,其IC50为0.65mmol/L.重金属离子Hg2+、Cd2+和Pb2+对酶活力有不同程度的激活作用,以Hg2+的激活作用最为显著.

O_2 、ACC和CO_2 对番木瓜ACC氧化酶活性的影响(英文)

研究了番木瓜果皮 1 氨基环丙烷 1 羧酸(ACC)氧化酶的部分纯化 ,底物 (O2 和ACC)浓度、辅助因子 (CO2 和Fe2 +)和抑制剂 (Co2 +和α 氨基异丁酸 )对体外乙烯产生速率的影响。通过DEAE Sepharose和Phenyl Sepharose柱层析后 ,番木瓜果皮ACC氧化酶被纯化了 1 9.5倍。在乙烯产生中 ,ACC氧化酶对O2 的Km 值主要取决于ACC的浓度 ,随着ACC水平的增加而下降 ;当O2的浓度增加时 ,酶对ACC的Km 值降低。CO2 显著地增加酶的活性以及对O2 和ACC的Km 值。Fe2 +提高酶的活性 ,Co2 +抑制酶的活性 ;Fe2 +能够拮抗Co2 +对酶活性的抑制作用。这些动力学资料表明ACC氧化酶遵循一种顺序结合机制 ,首先与O2 结合 。

The Partial Purification of Angiogenesis Factor of Human Osteosarcoma

Objective To partially purify the angiogenesis factor of human osteosarcoma(HuOs) and study its biological features. Methods The active peptide with a molecular weight of 8000-10000 Da in the conditioned medium obtained from the cultivation of Hu-Os cells(osteoblastic osteosarcoma) was partially purified by ultrafiltration, chromatography and dialysis.The angiogenic effects of the fractions were assessed by proliferation assay of human umbilical vein and pig thoracic aorta endothelial cells. Results The chromatography fractions 4-6 could significantly promote the proliferation of the endothelial cells.Conclusion The HuOs cells could synthesize and secrete angiogenesis factor with a molecular weight of 8000-10000 Da.

应用连续生物反应器和分离系统由D-阿洛酮糖大规模生产D-阿洛糖

来源于施氏假单胞菌LL272的L-鼠李糖异构酶（L-RhI）能将D-阿洛酮糖转化为D-阿洛糖。用大肠杆菌表达的重组L-RhI经部分纯化后固定在壳聚糖BCW-2510珠上，用于生产D-阿洛糖。以总计20000单位的固定化酶用于转化生产D-阿洛糖，使用17d后酶活性无明显降低。50％的D-阿洛酮糖（w／w）以0．8ml／min的流速上样至转化柱，控制温度为42℃，17d内有30％的D-阿洛酮糖异构化成为D-阿洛糖。

凤梨科植物成熟果实中新蛋白水解酶的鉴定

粗提物经有机溶剂分馏进行部分纯化：在粗提液中加入4倍体积的冰丙酮可获最佳提取效果（96％总蛋白，91％总催化活性）。制备的产物（丙酮沉淀物的再溶解产物，RAP）在pH5～9有最大活性（〉80％）和较高的热稳定性（在60℃保温60min仍然保留〉90％的残留活性）。其酶活性完全被E-64反式-环氧琥珀酰亮氨酰胺基（4-胍基）丁烷及碘代乙酸抑制，加入半胱氨酸或巯基乙醇则被激活。

酵母醇脱氢酶在双水相系统中的亲和分配行为

将均三嗪型活性染料—活性嫩黄M—7G共价偶于聚乙二醇(PEG6000)分子上,构建双水相系统,能使醇母脱氢酶(以下简称ADH)分配系数增值11倍。观察了影响ADH分配系数的各种因素,设计了借液—液萃取方式快速部分纯化ADN的方案,经部分纯化后,ADH的比活力按每毫克制剂含单位数计算提高至700倍;按每毫克蛋白质含单位数计算提高至16倍,酶活力回收率可达86％。

用免疫印迹测定法检测BTV

加拿大研究人员用Western印迹分析(IBA)作为标准竞争ELISA(c-ELISA)的一种证实试验对蓝舌病病毒(BTV)进行血清学诊断。在这种印迹分析中使用了单克隆抗-VP7抗体3.17.A3和多克隆牛抗BTV抗血清。用天然-PAGE分离部分纯化的BTV组特异性VP7抗原。

寄生虫病

S858.2 950954我国家畜弓形虫病免疫学诊断进展/吕元聪(广西卫生防疫站 530021)//中国兽医科技.-1994,24(7).-17～18自1948年 Sabin 等开创染色试验(DT)诊断弓形虫病以来,弓形虫病的免疫学诊断方法不断发展,尤其近几年,随着免疫学技术及分子生物学技术的广泛应用。

铜藻活性组分多糖的体外抗氧化性研究

研究旨在探讨铜藻多糖组分的抗氧化活性,试验选取经DEAE-Sepharose-Fast-Flow分离纯化得到铜藻多糖的活性组分为研究对象,通过红外光谱分析和单糖成分析进行初步的结构鉴定,并评价铜藻多糖各个组分的抗氧化活性。结果氯化钠梯度洗脱获得4个多糖组分,由红外光谱扫描发现铜藻多糖的四个组分均具有糖类的特征吸收峰;抗氧化试验结果表明四个组份均表现出较强的抗氧化活性,其中SF2抗氧化活性最高,DPPH自由基的IC50为0.499μg;还原力最强超氧阴离子自由基清除活性最强,因此铜藻活性组分多糖有望开发为新型的抗氧化剂。

EB病毒特异性DNA多聚酶的研究现状

EBV-DP(Epstein-Barr virus specified DNA palymerase)是EB病毒早期抗原成分之一,也是EB病毒复制的关键酶,研究该酶不仅有助于鼻咽癌的早期诊断,而且有可能为研究EB病毒与鼻咽癌的关系提供新的线索。本文就该酶的来源、化学性质、提取、纯化、活性测定以及临床应用等问题作简要介绍。

Isolation and partial purification of fungal ligninolytic enzymes from the forest soil fungi isolated from Bhadra Wildlife Sanctuary

屏蔽从森林土壤样品为有效木质素 degraders 的隔离被做，由提供象通过丰富方法的碳来源的木质素，它导致隔离 8 有效真菌在 14 之中孤立孤立。沉没发酵被作为碳来源提供 Guiaicol 与有效微生物为 ligninolytic 酶的生产做。laccase，木质素 peroxidise 活动和特定的活动的试金在 27 浡湯 ? 在 2， 4， 6， 7， 8， 10 和 12 天的孵化间隔以后被做 ?