人血管形成素在大肠杆菌中的融合表达、纯化及活性测定

RT PCR获取的血管形成素AngiogenincDNA片段 ,克隆入融合表达载体 pRSETB中 ,表达产物为N端融合了His6的融合蛋白 ,以包涵体形式存在 ,占菌体总蛋白的 10 %。用 8mol/L脲溶解包涵体 ,利用His6与过渡态金属离子Ni2 +高亲合力结合的性质 ,经Ni2 + NTA亲和树脂一步法纯化 ,获得纯度达 98%以上His6 ANG融合蛋白 ,Western blot结果表明在相应分子量处有一条特异性条带。重组蛋白复性后活性测定表明 ,在体外可促进鸡胚绒毛尿囊膜 (CAM )血管形成 ,并可降解tRNA。

伊氏锥虫病原性受体纯化的研究

以伊氏锥虫表膜蛋白做配基辛和层析，从小鼠淋巴细胞、巨噬细胞和肾上皮细胞上分别纯化出了分子量相同的一种蛋白质。该蛋白经ＰＡＧＥ电泳分析，是表观分子量约为１２０．１ｋＤ的单一蛋白质，在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳系统中显示为分子量分别是７５．１ｋＤ和３５．６ｋＤ的两种蛋白质，从淋巴细胞上纯化出来的该蛋白质具有免疫球蛋白的抗原性，但来源于肾上皮细胞的物质却无此活性。用淋巴细胞膜上的该受体做阻断试验发现，某一浓度下的该受体不仅不能阻断，反而会促进固定的小鼠细胞与锥虫的粘附结合。