成纤维细胞生长因子受体1配体精细结合位点的确定

目的 确定人成纤维细胞生长因子受体 1(FGFR1)的配体精细结合位点。方法 合成肽文库筛选 ,定向点突变 ,原核细胞重组蛋白质表达及受体 配体结合实验。结果 采用1 2 5 I标记的酸性成纤维细胞生长因子 (aFGF) ,自合成肽文库中筛选到一个五肽序列 (WGPGM) ,其序列及立体结构和FGFR1细胞外段的一个基序 (WTSPEKM)相似。为了证明FGFR1的WTSPEKM基序是结合FGF的重要结构 ,采用定向突变技术将WTSPEKM基序中的P(CCA)突变成A(GCA) ,并在原核细胞中表达了野生型和突变型FGFR1细胞外段重组蛋白质 ,受体 配体结合实验显示突变的FGFR1细胞外段结合aF GF的能力明显降低。结论 FGFR1的WTSPEKM基序是配体结合的一个重要部位。