荧光法研究牛血清白蛋白与三羟基苯基荧光酮-钼(Ⅵ)配合物探针的作用机理

用荧光光谱法研究了三羟基苯基荧光酮(TH-PF)-钼(Ⅵ)配合物与牛血清白蛋白的结合反应。探讨了TH-PF-Mo(Ⅵ)配合物对蛋白质内源荧光的猝灭机理,并测定了不同温度下的结合常数,温度为25℃时,荧光猝灭法测得该反应的结合常数为K=4.78×104L.mol-1,温度为40℃时,荧光猝灭法测得该反应的结合常数为K=3.72×104L.mol-1。根据F rster非辐射能量转移理论,确定了给体-受体之间的作用距离和能量转移效率(E=0.314),并根据热力学参数确定了TH-PF-Mo(Ⅵ)配合物与牛血清白蛋白之间的作用力类型,以静电引力为主。

蛋白质含量镧(Ⅲ)-铬天青S配合物探针法测定

目的用镧（Ⅲ）-铬天青S配合物光谱探针测定生物样品中蛋白质含量。方法在pH4～6的clrak-lubs（KH2PO4-NaOH）缓冲介质中,蛋白质与镧（Ⅲ）-铬天青S配合物发生结合反应,引起配合物溶液褪色及吸光度降低,在一定范围内其吸光度降低与蛋白质浓度成正比。结果牛血清蛋白（BSA）含量在0～50 mg/L范围内遵循比耳定律,配合物表观摩尔吸光系数ε478=3.3×10^5L/（mol.cm）,4 h内稳定。各种蛋白质检出限为0.23～1.12 mg/L,蛋白尿和唾液2种样品回收率分别为92%和105%,相对标准偏差为1.8%,生物体内常见物质基本上不干扰测定。结论该法灵敏度高,稳定性好,抗干扰强,可直接应用于人血清样品及其他生物样品中蛋白质总量的测定。