二甲基亚砜对海带配子体克隆低温冻存的影响

以海带配子体克隆为试验对象,采用4种体积分数二甲基亚砜(DMSO)冷冻保护液,对10个品种(系)20个克隆系进行了低温冷冻保存试验。结果表明,海带配子体克隆在-80℃冻存10 d,复苏后培养,DMSO各体积分数组均有海带配子体细胞存活,其中10%和15%体积分数组冻存的20个克隆系均有存活细胞,5%和20%体积分数组仅部分克隆系有存活细胞。对于相同克隆系,10%和15%体积分数组配子体存活率高于5%和20%体积分数组。指出,在海带配子体低温冻存中,10%和15%DMSO可作为冷冻保护液,为降低成本,优选10%DMSO作为冷冻保护液。提出,经-80℃冻存的海带配子体复苏后培养,进行繁育能力验证,能正常发育,形成孢子体,低温冻存不影响其繁育能力。

海带配子体克隆育苗生产中采苗技术的研究

采苗前,将♀♂配子体克隆混合并由长光照(连续光照)转入短光照(光期L:D 10∶14)培养,连续观测克隆生长情况,结果显示,进入配子体发育阶段需11天时间,细胞增加量达40%;以孢子体发生时间和发生率为指标,研究不同♀♂比例的配子体发育情况,结果显示,1∶1和3∶1比较接近,5∶1以上配比出现了孢子体发生时间延迟、发生率降低和孤雌生殖现象;通过不同克隆喷洒量的孢子体发生密度实验,3g/帘(♀系)与孢子采苗(孢子附着密度20～25/160X)的发生密度接近;干帘喷洒、干帘浸泡和间接喷洒的采苗方法比较显示,间接喷洒法简便易行、孢子体发生整齐.本文据以上结果探讨了采苗时机、雌雄比、喷洒量、附苗方法等克隆采苗的关键技术,就附苗不匀和脱落的技术难题进行了讨论.

超声波对海带配子体克隆的作用

研究了超声波对海带配子体克隆粉碎效果、存活率及生长发育的作用。实验表明：在４００Ｗ处理３０ｓ后再用２００Ｗ处理６０ｓ，海带配子体克隆簇状体的粉碎效果较好：培养７天时细胞日生长速率为０．１５７；大量扩增７天雌、雄配子体克隆的鲜重增重最大为 ３．４７０ｇ：培养 １４天雌性配子体克隆发育率为 ５２．１％。可作为一种快速、高效、简便的粉碎海带配子体克隆簇状体，制备单细胞悬液的方法。

海带配子体克隆的培养及应用

克隆技术在当前是生命科学前沿领域之一，对遗传育种、生物工程研究及 应用具有重要的意义。综述了有关海带配子体克隆研究进展以及在种质资源和苗种生产中的 应用情况。

包埋脱水法冷冻保存裙带菜配子体克隆的研究

将裙带菜配子体克隆包埋在含3%褐藻酸钙的胶球中,研究了预培养中的蔗糖浓度和培养时间,脱水过程中的脱水速率和胶球含水量以及化冻速度对配子体克隆的存活率和发育能力的影响,结果表明含裙带菜配子体克隆的胶球在0.3 mol/dm3的蔗糖培养基中培养9 h可以获得较高的存活率;胶球最适平均脱水速率为含水量的5%每小时,最适含水量为25%;较快的化冻速度可以显著提高配子体克隆的存活率,在优化条件下存活率可高达66%;经过冷冻保存的裙带菜配子体克隆在适合发育的条件下能够正常形成孢子体.

海带配子体克隆育苗生产中幼苗培育技术的研究

探索了海带配子体克隆育苗生产中的幼苗培育技术,试验证明,流水速度和洗刷压力是幼苗培育技术中的关键技术.其技术指标如下:在采苗结束时,(1)流水,应采取附苗后静水、24h后微流水(表层流速5 cm/s以下)、72 h后正常流水;(2)洗刷,在孢子体生长到8～16列c时开始以0.5 kg/cm2的压力洗刷,以后随着孢子体的生长及附着力的提高逐渐增加洗刷强度和次数.结果显示,这样的措施可使配子体附着率达到80%以上、幼苗健壮、出苗质量达到国家一类帘标准,使克隆采苗自8～16列c期间的生长发育速度较常规孢子体采苗后的生长发育速度快20 d.另外,还统计分析了克隆育苗和孢子体育苗两种大孢子体的主要经济性状,并从遗传角度证明前者种群变异程度明显小于后者.

褐藻酸降解菌对海带配子体克隆的作用及其药物防治研究

通过回染实验 ,确认褐藻酸降解菌是海带配子体克隆病害的主要致病菌 ;观察了其对海带配子体克隆细胞侵染的现象 ,并研究了抗生素对海带配子体克隆细胞和褐藻酸降解菌的作用 ,发现 0 .5～ 10 0 mg/ L青霉素对配子体克隆细胞的生长有一定促进作用 ,实验范围内各浓度青霉素对褐藻酸降解菌均有较好的抑菌效果 ,且抑菌效果随浓度的提高而加强。其中 10 0 mg/ L青霉素 10 d内可将褐藻酸降解菌浓度降低到初始浓度的 1/ 2 0以下 。

光照强度对海带配子体克隆生长的影响

本试验研究了在充气悬浮培养及静置培养条件下 ,不同光照强度对海带配子体克隆生长的影响。结果表明 :在 4 5 0 0lx光照强度、充气悬浮培养条件下 。

温度对“901”海带配子体克隆生长的影响

温度是影响“90 1”海带配子体克隆生长最重要的环境因子之一。试验结果表明 ,在 15℃条件下 ,配子体克隆的生长速度最快 ,其致死温度为 2 5℃。在相同的环境条件下 ,细胞数基本相同的雌、雄配子体克隆的生长速度相近。

海带配子体克隆培育杂种优势苗种的研究

用日本长海带雌性克隆与海杂海带雄性克隆杂交获得优势苗种LJ组合 ,它对双亲孢子体表现出明显的杂种优势 ,与对照组相比 ,其长度、宽度、株鲜重、株干重均表现出明显的优势 ,并且生长均匀、变异程度小 ,具有广泛的应用前景。

植物激素对海带配子体克隆附着的影响

实验研究 2 ,4 - D、KT、IAA、NAA四种植物激素对海带配子体克隆附着的影响。结果表明 :2 ,4 - D对附着有较明显的促附着作用 ,最有效浓度为 2 .5mg/L 和 5mg/L,其 4 h的附着率分别是对照的 2 .79倍和 2 .95倍 ;KT的作用较复杂 ,在浓度为 1mg/L 时 ,对附着有明显的促进作用 ,其 4 h的附着率是对照的 2 .3倍 ;IAA对配子体附着没有明显的促进或抑制作用 ;NAA对附着有抑制作用 ,浓度越高 ,抑制作用越强。

利用深井海水进行海带配子体克隆育苗试验

以海带配子体克隆为试验对象,研究了深井海水对海带配子体克隆生长、发育的影响,并利用深井海水进行了克隆育苗试验。试验结果表明,利用深井海水培养海带配子体克隆,配子体生长速度较自然海水稍慢,但深井海水可促进配子体发育,加快孢子体的形成,缩短育苗时间,而且利用深井海水进行克隆育苗可取得较好效果。综合考虑克隆培养效果及降低育苗成本,克隆育苗可采取自然海水与深井海水交替使用的模式进行。

海带配子体克隆规模化培育及育苗技术

海带配子体克隆能长期保存,可维持原有性别,对保护海带种质资源,研究海带生理、生化、遗传学、规模化培育及生产等方面均具有重要价值。本文分别从配子体克隆的规模化培养、采苗、幼苗培育3个方面探讨了海带配子体克隆规模化培育及育苗过程中的关键技术。

海带配子体克隆二次附苗技术

本研究主要从生产应用角度出发,在配子体克隆一次附苗的基础上进行二次附苗实验,系统探讨了海带配子体克隆二次附苗、育苗各环节的关键技术,结果显示1.25g/帘为最佳附苗密度;当幼孢子体普遍达到0.3~0.5mm时为最适宜起始洗刷时间,0.05MPa的压力为最佳起始洗刷压力;沉降式附苗法为最适宜附苗法;细胞最优过滤孔径为38μm。配子体克隆二次附苗幼苗发育速度快于孢子体附苗和克隆一次附苗,从而可大大节约生产成本。

海带配子体克隆大规模培养技术的研究

控制适宜条件使海带配子体克隆正常生长,根据生长情况拟合出鲜重增长曲线,并回归分析出鲜重与生长时间关系方程。定期测定培养液中N、P含量,分析出N 6g/m3,P 1g/m3,每周换水1次可满足较小密度克隆生长需要;N 10 g/m3,P2 g/m3,每周换水1次,可满足较大密度克隆生长需要。通过不同接种密度瞬时生长率比较,证明克隆密度越低,生长速度越快;分瓶数量越多,总重量增长越多。大规模培养结果:起始重量48 g,2个月达到12 276 g,生长速度约每周翻1番,结束培养时平均密度达22.8 g/L。

海带配子体无性繁殖(克隆)技术研究与应用进展

海带具有异型世代交替,其配子体在单独分离培养时可进行营养生长,形成无性繁殖系(克隆)。本文简要回顾了海带配子体克隆技术研究与应用的历程,综述海带配子体克隆在海带种质资源保存、海带生理和遗传学研究及海带育种和苗种繁育中的应用现状。

海水不同消毒方式对海带配子体克隆生长发育的影响

通过5种海水不同消毒方式对海带配子体克隆生长发育进行试验,结果表明:无论是静置还是充气条件下,煮沸海水培养的配子体克隆生长最快,盐酸消毒的海水次之,次氯酸钠消毒海水最差,紫外线消毒和臭氧介于其间。煮沸和紫外线消毒海水中的海带配子体克隆发育率较高,2者非常接近,盐酸消毒和臭氧消毒海水中的海带配子体克隆发育也较高,而次氯酸钠消毒海水中的海带配子体克隆发育非常缓慢。试验证明除煮沸消毒外,盐酸消毒海水可以用于海带配子体克隆扩大培养。

不同封口方式对901杂交海带♂配子体的影响

传统的海带配子体种质资源保存是用锥形瓶保存,纸盖封口,但由于近些年来污染比较严重,所保存的海带配子体附着大量的细菌和各种杂藻,对克隆生长有很大的影响。为了更有效地保存海带种质资源,我们实验了三种不同的封口方式进行培养,探求其对克隆生长状态的影响。结果证明,最有效的封口方式为:滤纸膜的封口方式,不论是对配子体细胞状态,还是对克隆增殖都要好于其它方式。