玉米肽对酒精损伤PC12细胞的保护作用及机制

在细胞水平上探讨玉米肽对酒精损伤PC12细胞的保护作用及可能机制。首先建立酒精损伤细胞模型,对玉米肽的作用剂量进行筛选;采用酶联免疫吸附试剂盒法测定玉米肽预处理后PC12细胞中氧化应激指标(谷胱甘肽(glutathione,GSH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA))、炎症相关因子(肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB))、神经营养因子(神经生长因子(nerve growth factor,NGF)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF))、突触可塑性相关蛋白(突触后致密物质-95(postsynaptic density-95,PSD-95)、生长相关蛋白-43(growth-associated protein-43,GAP-43)、突触素(synaptophysin,SYN))等指标。通过细胞存活率和形态变化,选择400 mmol/L为酒精损伤的最适浓度,确定玉米肽剂量低、中、高质量浓度为25、100、400μg/mL;实验结果表明3个剂量组的玉米肽对酒精损伤的PC12细胞存活率都具有显著的提高作用;氧化应激指标发现玉米肽可提高酒精损伤PC12细胞中GSH和SOD含量、抑制MDA的生成;炎症相关指标测定结果表明玉米肽可降低酒精损伤PC12细胞中炎症因子TNF-α和IL-6的水平,抑制乙醇导致的NF-κB含量升高;对神经营养因子含量的测定表明玉米肽还可提高酒精损伤细胞中NGF和BDNF的含量;此外玉米肽还可以增加突触可塑性相关蛋白PSD-95和GAP-43的含量,但对SYN无改善作用。总体来看,玉米肽对酒精损伤PC12细胞具有保护作用,其保护作用机制为多种途径共同作用的结果。

二肽AQ、SQ和IQ增强GES-1细胞对酒精损伤的抵抗能力

部分食源性二肽具有良好的吸收特性以及生理活性,在功能食品的开发上具有强大的应用前景。该研究旨在阐明二肽AQ、SQ和IQ具有增强GES-1细胞对酒精损伤抵抗能力的作用。首先,该研究对GES-1细胞进行二肽预处理,之后,利用酒精建立细胞损伤模型;通过检测细胞存活率和细胞的乳酸脱氢酶释放量判断模型是否成立,通过检测细胞内ROS含量、抗氧化酶活力和氧化损伤标志物含量,评价二肽对细胞氧化应激的改善作用;通过检测细胞内紧密连接蛋白以及相关损伤标志物的蛋白表达水平,评价二肽对细胞屏障功能的增强作用。结果表明,上述3种二肽可以减轻细胞氧化应激,减少损伤标志物的表达水平并增加紧密连接蛋白的表达水平。该研究证明了上述3种二肽可以增强GES-1细胞抵抗酒精损伤的能力,在修复酒精性胃黏膜损伤,保护胃黏膜屏障功能方面具有一定的应用价值和潜力。

清中汤加减治疗酒精损伤性胃炎46例

目的 :观察清热燥湿类中药治疗酒精损伤性胃炎的疗效。方法 :采用自拟方清中汤加减 (黄连、栀子、陈皮、茯苓、半夏等 )治疗本病 46例。结果 :总有效率 93 .5%。提示 :清热化湿。

肉苁蓉总苷对原代培养小鼠肝细胞酒精损伤保护作用研究

目的:研究肉苁蓉总苷对原代培养肝细胞的保护作用。方法:采用原位灌流法收集原代肝细胞,MTT法评价肉苁蓉总苷对酒精损伤原代培养肝细胞存活率的影响;荧光显微镜技术评价肉苁蓉总苷对酒精损伤原代培养肝细胞及细胞核形态的影响;流式细胞仪检测肉苁蓉总苷对酒精损伤原代培养肝细胞凋亡的影响;免疫细胞化学染色法检测肉苁蓉总苷对bcl-2和c-fos表达的影响。结果:原代肝细胞经酒精损伤后,存活率降低,出现明显凋亡和坏死改变,凋亡抑制基因bcl-2减弱、促凋亡基因c-fos表达增强。肉苁蓉总苷可明显提高细胞存活率,改善凋亡和坏死情况,增强bcl-2表达,抑制c-fos表达。且作用呈剂量依赖性。结论:肉苁蓉总苷可通过增加凋亡抑制基因bcl-2表达,减少促凋亡基因c-fos表达,减少凋亡和坏死,增加细胞存活率来实现对原代培养肝细胞的保护作用。

植物乳杆菌Zhang-LL及其培养上清液对酒精损伤干预效果评价

世界酒文化盛行,酒精对人体的伤害问题日益严峻。益生菌对酒精损伤的干预效果需针对菌株进行评价。在试验周期内,对ICR小鼠灌胃50%乙醇,并分组给予植物乳杆菌Zhang-LL(低剂量组1.0×107 CFU/d,高剂量组1.0×109 CFU/d)及其培养上清液进行干预,干预12周后评价植物乳杆菌Zhang-LL在长期摄入酒精对机体负面影响方面的缓解作用。研究结果显示:植物乳杆菌Zhang-LL干预可显著缓解长期酒精摄入带来的摄食量减少及体重增长抑制(P<0.05);与模型组相比,植物乳杆菌Zhang-LL培养上清液可显著降低酒精损伤小鼠血清中甘油三酯及低密度脂蛋白胆固醇的水平,增加肝脏组织谷胱甘肽的含量,降低其肠道通透性,保持其小肠绒毛的完整性,平衡其肠道菌群结构(P<0.05)。在试验周期内,酒精损伤小鼠肝脏组织结构并未出现病理性改变,组织及血液中谷氨酸氨基转移酶酶活、天门冬氨酸氨基转移酶酶活,组织中丙二醛含量及谷胱甘肽过氧化物酶酶活均没有显著变化,植物乳杆菌各干预组对这些指标也没有显著影响(P>0.05)。结论:植物乳杆菌Zhang-LL对酒精摄入给机体带来的部分负面影响有显著的改善作用,其培养上清液作用效果最为显著。

雷帕霉素和氯喹对急性酒精损伤后蟾蜍心脏活动的影响

目的探讨突触结合蛋白1（synaptotagmin 1，Syt1）在神经病理性疼痛小鼠前扣带回表达的变化及与痛行为的关系。方法将20～25 g的小鼠随机分为4组：假手术（Sham）＋Syt1抗体（Syt1-Ab）组，Sham＋对照抗体（Con-IgG）组，坐骨神经结扎（CCI）＋Syt1-Ab组，CCI＋Con-IgG组。在CCI第7天给每组小鼠前扣带回立体定位注射相应药物（0.1 μg/0.5 μl），按Hargreaves法用热辐射刺激仪测定小鼠热痛的变化，用电子测痛仪测定小鼠机械痛缩足阈值的变化，免疫印迹法检测各组小鼠前扣带回Syt1的表达。结果免疫印迹显示神经病理性疼痛小鼠前扣带回Syt1表达明显升高，在神经病理性疼痛小鼠前扣带回立体定位注射Syt1-Ab可明显改善痛行为。结论神经病理性疼痛小鼠前扣带回Syt1表达显著升高，在神经病理性疼痛小鼠前扣带回立体定位注射Syt1-Ab可缓解疼痛。

干巴菌多糖对急性酒精损伤小鼠的抗氧化作用

目的:研究干巴菌多糖(Refined polysaccharide from Thelephora ganbajun,RPTG)对急性酒精损伤小鼠心脏、脾脏及肾脏的保护作用。方法:经超声波辅助热水浸提及去蛋白得到干巴菌多糖。将小鼠随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组、RPTG各剂量组,建立小鼠急性酒精肝损伤模型。取小鼠心脏、脾脏及肾脏,测定其丙二醛(malondialdehyde,MDA)、还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量;超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)及过氧化氢酶(catalase,CAT)活性。结果:与模型对照组相比,RPTG高、中、低剂量组均可以显著或极显著提高心脏、脾脏和肾脏的GSH含量、SOD活性、GSH-Px活性、CAT活性(p<0.05或p<0.01);均可以显著或极显著降低心脏、脾脏和肾脏的MDA含量(p<0.05或p<0.01)。结论:RPTG对酒精性肝损伤小鼠心脏、脾脏及肾脏具有明显的抗氧化作用。

牛樟芝固态发酵成分缓解L-O2细胞酒精损伤的研究

牛樟芝谷物固态发酵可产生多种生物活性成分,是具有良好应用潜力的培养方式。本文以牛樟芝青稞固态发酵物为原料,通过硅胶柱层析获得4种生物活性成分,然后利用人正常肝细胞L-O2酒精损伤模型对这4种活性成分进行功能评价。研究结果显示,酒精损伤能够导致L-O2细胞收缩,贴壁能力减弱。在所研究的4种活性成分中,AdA和Aq均能够有效抑制L-O2细胞形态变化并增强细胞的贴壁性能。进一步分析发现,这些活性成分能够通过提高肝细胞抗氧化能力缓解酒精性损伤,其中AdA和Aq具有较好的抗肝损伤能力,能显著降低细胞培养液中ALT(Alanine transaminase,谷丙转氨酶)和AST(Aspertate aminotransferase,谷草转氨酶)的活力,显著降低细胞中MDA(Molondialdehyde,丙二醛)的含量,并提升SOD(Super oxide dismutase,超氧化物歧化酶)和GSH(Glutathione,谷胱甘肽)的含量。本文为研究牛樟芝固态发酵产物缓解酒精性肝损伤机制奠定了基础。

基于代谢组学方法的红花治疗急性酒精性肝损伤的作用机制研究

红花在临床上对急性酒精性肝损伤(Acute Alcoholic Liver Injury,AALI)有很好的疗效,但治疗机制不甚明确。因此,阐明红花治疗AALI的分子作用机制对药物的进一步开发及应用具有十分重要的意义。实验以雄性Wistar大鼠为研究对象,模型组大鼠灌胃8 mL/kg的酒精以建立AALI模型,给药组大鼠以4.29 g/kg/天的剂量灌胃红花提取物。利用大鼠血清代谢组学分析方法鉴定与AALI相关的潜在生物标志物,并研究红花对这些生物标志物的调控机制。从苏木精和伊红(H&E)染色实验发现,灌胃后红花提取物减轻了肝细胞的损伤程度;与模型组相比,红花组中的丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)的表达水平降低,表明红花提取物具有肝保护作用。通过分析火山图,共鉴定出30种与AALI相关的生物标志物。在这些生物标志物中,红花可以对21个标志物产生回调效果。研究发现,红花可能通过对脂肪酸、磷脂、胆汁酸、氨基酸、核苷酸代谢的调控作用从而对AALI产生治疗效果。本文为红花的推广和临床应用提供了理论基础。

麦冬亲水成分分析及提取物对大鼠急性酒精性肝损伤的保护作用

目的 分析麦冬亲水成分,并探究提取物对大鼠急性酒精性肝损伤的保护作用。方法 采用超高效反相/亲水色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC/HILIC-Q-TOF-MS)法、分子排阻色谱-示差折光法、网络药理-分子对接技术测定水提冻干粉及多糖、果糖、酚酸提取物中亲水成分,预测解酒护肝活性。大鼠随机分为正常组、模型组、麦冬水提冻干粉组、麦冬多糖提取物组、麦冬果糖提取物组、麦冬酚酸提取物组、3-O-对香豆酰奎宁酸组,每组9只,分别预防性给药14 d后,除正常组外其余各组大鼠给予50%乙醇(14 mL/kg)建立急性酒精性肝损伤模型,根据血清ALT、AST、LDH、TG、VLDL水平结合肝组织病理学变化分析各提取物及3-O-对香豆酰奎宁酸活性作用的强弱。结果 从各提取物中鉴定出103种亲水成分及分子量为6 000、4 000 Da的多糖类成分,并发现3-O-对香豆酰奎宁酸、对羟基肉桂酸甲酯。对大鼠急性酒精性肝损伤保护作用依次为麦冬酚酸提取物=麦冬果糖提取物=3-O-对香豆酰奎宁酸>麦冬多糖提取物>麦冬水提冻干粉。结论 麦冬果糖、酚酸提取物、3-O-对香豆酰奎宁酸对大鼠急性酒精性肝损伤具有保护作用。

藤梨根多糖对小鼠酒精性肝损伤的保护作用

目的:探究藤梨根(Actinidia chinensis root)多糖提取物对慢性酒精性肝损伤(Alcoholic liver injury,ALI)模型小鼠的保护作用研究。方法:采用超声法提取藤梨根多糖,随机将60只雄性健康昆明小鼠分为空白对照组、模型组、阳性对照组、藤梨根多糖低、中、高剂量组,除空白组外,其余各组小鼠连续灌胃56°红星二锅头酒15天,复制急性酒精性肝损伤模型后处死,检测各组小鼠血清中谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)含量及肝组织中丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathioneperoxidase,GSH-Px)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)水平,以及血清中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)含量,计算小鼠肝脏指数,并对肝组织进行病理切片观察。结果:实验结果表明,与模型组相比,藤梨根多糖各浓度组血清AST、ALT、TG、TC水平显著降低(P<0.05);肝脏SOD和GSH水平上升显著(P<0.05);IL-6、TNF-α和MDA含量下降,有统计学意义(P<0.05);肝脏病理学改变明显改善。结论:藤梨根多糖能缓解快速大量饮酒引起的肝损伤,其机制可能与其抗氧化作用相关。

陈皮复合固体饮料制备工艺及其对急性酒精性肝损伤小鼠的保护作用

[目的]以药食同源的陈皮、山楂、葛根为主要原料,开发一种具有解酒功能的固体饮料,并探究其对急性酒精性肝损伤小鼠的保护作用。[方法]以浸膏得率和总黄酮含量为标准,采用正交试验选取最佳提取工艺;以感官评价、成型率、溶化性的综合评分为指标,采用单因素试验优化成型工艺。采用52%酒精灌胃的方法建立急性酒精性肝损伤小鼠模型,检测陈皮复合固体饮料对模型小鼠肝脏指数,血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT),肝组织中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)及炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,苏木素—伊红(HE)染色分析各组肝脏病理变化。[结果]陈皮复合固体饮料最佳制备工艺:3味药材浸泡30 min后提取2次,第一次料液比1∶12(g/mL)、提取时间2.0 h,第二次料液比1∶10(g/mL)、提取时间1.5 h;经浓缩、干燥、粉碎后得到干膏粉;干膏粉与麦芽糊精1∶1混合,加入1.0%的罗汉果甜苷,并以90%乙醇作为润湿剂进行湿法制粒。动物试验表明:与模型组相比,陈皮复合固体饮料组的AST、ALT、TG、TC、MDA、IL-1β、IL-6、TNF-α水平降低(P<0.01或P<0.05),GSH、SOD含量增加(P<0.01或P<0.05),且肝组织病理切片显示给药组小鼠肝损伤程度均有显著改善。[结论]陈皮复合固体饮料色泽均匀、溶解性好、甜度适中、口感细腻,对急性酒精性肝损伤具有良好的保护作用。

陈皮酵素对小鼠酒精性肝损伤及肠道菌群的调节作用

目的探讨陈皮酵素(Pericarpium citri reticulatae fermentation liquor,PF)对小鼠酒精性肝损伤和肠道的调节作用。方法将40只C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组、模型组、阳性药物组[100mg/(kg·d)水飞蓟宾(silibinin,Sly)]和陈皮酵素组[500 mg/(kg·d)PF],每组10只,持续给药干预2周。通过分子生物学检测生物化学和病理学指标;16S rDNA高通量测序技术检测分析粪便微生物群。结果组织切片结果显示陈皮酵素可以显著改善酒精性肝损伤小鼠的肝脏和回肠组织损伤,减少酒精诱导的肝脏脂质积累。此外,陈皮酵素显著降低肝脏组织促炎因子[白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)]的水平,缓解酒精引起的氧化应激。同时,陈皮酵素可修复酒精引起的肠道菌群紊乱,维持肠道菌群数量,修复肠道黏膜屏障损伤。结论陈皮酵素可改善酒精性肝损伤,其机制与抗氧化、抗炎和调节肠道菌群紊乱有关,值得推广应用与开发。

酒精性肝病肝损伤的超声图像与ElastPQ参数关联研究

酒精性肝病是全球慢性肝病的主要原因,可导致纤维化和肝硬化。在早期无症状阶段检测ALD可以通过加强酒精康复治疗和代谢共病治疗来减缓或预防疾病进展。疾病的准确诊断需要活检,这一过程会导致1%的病例出现主要并发症,而现有的非侵入性生物标志物在疾病早期的准确性有限,因此严重减少了及时检测和干预疾病的机会。因此,迫切需要无创诊断策略来筛查高危人群中的患者。ElastPQ是一种点剪切波弹性成像技术,用于非侵入性评估肝纤维化。我们在一组酒精性肝病肝损伤患者中比较了通过ElastPQ和超声(ultrasonography ,USG)进行肝硬度测量。进一步进行酒精性肝病肝损伤的超声图像与ElastPQ参数关联研究。

基于文献计量分析药食同源物质缓解酒精性肝损伤研究进展

目的:分析药食同源物质缓解酒精性肝损伤相关领域的研究现状及热点内容,为学者对药食同源物质缓解酒精性肝损伤的深入研究提供思路。方法:采用文献计量学方法,以CNKI、WOS及PubMed数据库为文献源,对自建库起至2022年12月药食同源物质缓解酒精性肝损伤研究领域文献的分布情况进行检索和分析。结果:共检索药食同源物质缓解酒精性肝损伤的中英文文献418篇,专利276项。国内该领域研究起步较晚,但发展速度快,且发文量及专利数量均高于国外,发文量呈指数型结构上升,专利量呈线性结构上升;研究热点主要为葛根、枳椇子、枸杞等药食同源物质缓解酒精性肝损伤的作用机制研究。结论:通过分析药食同源物质缓解酒精性肝损伤文献及专利现状,系统总结了酒精性肝损伤的发病机制,主要与乙醇代谢、氧化应激、免疫炎症反应及肠道屏障受损和菌群失调相关;药食同源物质缓解酒精性肝损伤的作用机制主要与抗脂质过氧化、抗氧化应激反应、抗炎作用及清除自由基、调节肠道菌群有关;未来该领域将以网络药理学、组学技术等技术手段进行更深入的机制研究。

DHA单酰基甘油酯型藻油对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用

研究DHA单酰基甘油酯对小鼠急性酒精性肝损伤的保肝作用及机制。将雄性小鼠随机分为正常组、模型组、实验组(DHA单酰基甘油酯组)、阳性对照组(DHA三酰基甘油酯组和DHA乙酯组)5组。给药15 d后,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)含量,肝组织Toll样受体4(TLR 4)、髓样分化因子(MyD88)、核转录因子κB(NF-κB)基因表达水平。观察肝组织病理性改变;分析小鼠粪便细菌多样性。DHA单酰基甘油酯能显著降低急性酒精肝损伤小鼠血清ALT、AST、ALP、TG、TC和LDL浓度,而显著增加HDL浓度,改善酒精引起的肝组织病理性改变,而且DHA单酰基甘油酯对小鼠肝损伤改善效果优于DHA三酰基甘油酯和DHA乙酯。此外,DHA单酰基甘油酯能显著抑制酒精肝损伤小鼠肝组织TLR 4、MyD88、NF-κB基因表达,对酒精引起的肠道菌群紊乱具有一定恢复作用。DHA单酰基甘油酯对酒精诱导小鼠肝损伤具有一定保护作用,其机制可能与抑制TLR 4/NF-κB通路和改善肠道菌群有关。

杏鲍菇发酵苦荞提取物对小鼠酒精性肝、胃损伤的保护作用

目的:研究杏鲍菇发酵苦荞提取物的体外抗氧化活性及体内对酒精性肝脏、胃黏膜损伤的保护作用。方法:本实验检测杏鲍菇发酵苦荞提取物中功能成分的含量,并分析提取物的抗氧化能力;以Lieber-DeCarli酒精液体饲料建立小鼠慢性酒精性肝脏、胃黏膜损伤模型,考察发酵后的苦荞提取物在低、高剂量(1.5 g/kg B.W.、3.0 g/kg B.W.)对肝脏和胃粘膜损伤的保护作用。结果:杏鲍菇发酵苦荞提取液中含有较多的抗氧化成分,其中多酚、黄酮、三萜含量分别为11.40±0.32 mg GAE/g DW、17.19±0.30 mg RE/g DW、7.59±0.24 mg/g,黄酮类物质:芦丁和槲皮素含量分别为13.55±0.05、0.665±0.01 mg/g;杏鲍菇发酵苦荞提取液的铁离子还原抗氧化能力及其对DPPH和ABTS+自由基清除率分别为:16.66±0.65、33.49±1.26、15.68±1.17μmol Trolox/g DW;与模型组相比,高、低剂量组均能显著降低丙二醛(P<0.05)、天冬氨酸氨基转移酶(P<0.01)、丙氨酸氨基转移酶(P<0.01)、乳酸脱氢酶(P<0.05)、白细胞介素1β(P<0.05)水平,并显著提高超氧化物歧化酶(P<0.01)、谷胱甘肽过氧化物酶(P<0.01)水平,下调了活性氧(P<0.01)、鼠肉瘤蛋白(P<0.01)、丝氨酸/苏氨酸激酶(P<0.01)、细胞外信号调节激酶(P<0.05)、丝裂原活化蛋白激酶激酶(P<0.05)的蛋白表达量。结论:杏鲍菇发酵苦荞提取物具有较好的抗氧化活性,并对小鼠慢性酒精性肝脏、胃黏膜损伤具有明显的保护作用。

副干酪乳杆菌FZU103对小鼠酒精性肝损伤的防控作用

目的:探究副干酪乳杆菌FZU103(Lactobacillus paracasei FZU103,LP-FZU103)对酒精性肝损伤(alcoholic liver injury,ALI)的防控作用。方法:选取36只SPF级ICR小鼠,随机分为空白组、模型组、实验组(LP-FZU103干预),实验6周后测定体质量及脏器系数、血清及肝脏生化、肝组织病理学及炎症因子、肝功能相关基因转录和肠道菌群组成。结果:与模型组相比,LP-FZU103干预可改善ALI小鼠的脏器系数和肝组织病理损伤程度,显著降低血清中总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇浓度以及谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性,提高血清高密度脂蛋白胆固醇浓度;显著提高肝脏中过氧化氢酶和超氧化物歧化酶活性以及谷胱甘肽含量,降低肝脏中丙二醛含量和白细胞介素6、干扰素γ水平;显著上调脂质代谢相关基因Ldlr及下调Acc1、Hmgcr和Cd36的mRNA水平;显著增加小鼠肠道中约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii)、罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)、副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)等有益细菌的相对丰度。结论:LP-FZU103干预可一定程度防控小鼠ALI的发生,这与其改善肠道菌群及肝脏代谢功能密切相关。

基于网络药理学探讨沙棘治疗酒精性肝损伤的作用机制

目的:基于网络药理学预测沙棘治疗酒精性肝损伤(Alcohol Liver Injury)的作用机制,并通过建立斑马鱼酒精性肝损伤动物模型来验证沙棘治疗酒精性肝损伤的功效。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology,TCMSP)、Uniprot数据库收集有效成分及其作用靶标,Venny2.1寻找交集靶点。通过GeneCards及OMIM数据库收集和筛选疾病靶点,STRING v12.0数据库进行PPI网络分析,PDB及PubChem进行蛋白质结构及小分子结构确认。通过Cytoscape(Version 3.9.1)软件网络图构建沙棘治疗酒精性肝损伤关联网络。利用Metascape数据库对共有靶点进行基因本体(Gene Ontology,GO)、京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Gene,KEGG)数据库通路富集分析。通过斑马鱼实验进行功能验证:选取受精后3 d(3 dpf)野生型AB品系斑马鱼,正常组喂养于正常饲养用水,其余各组饲养于2%的无水乙醇溶液中建立酒精性肝损伤模型。沙棘组给予不同浓度的沙棘溶液,28℃处理2 d后,确定沙棘对酒精性肝损伤模型斑马鱼的最大耐受浓度(MTC)剂量,并根据MTC结果进行下一步给药,测定样品肝保护功效评价表型实验结果。结果:筛选后得到沙棘活性成分33个,主要包括槲皮素、花葵素、儿茶酸等;治疗酒精性肝损伤的潜在靶点1434个,主要包括ADH1C、CTNNB1、TGFB1等。调控这些核心靶点的信号通路主要富集在Lipid and atherosclerosis、Fluid shear stress and atherosclerosis、PI3K-Akt signaling pathway等多条信号通路中。动物实验结果显示:与模型组相比,沙棘可显著降低酒精性肝损伤模型斑马鱼肝脏不透明值(P<0.01),改善肝脏和卵黄囊肿大(P<0.01),下调AST和ALT的活力值(P<0.001),改善肝细胞核肿大,减少肝组织脂肪空泡样变性的功效。结论:沙棘可改善酒精性肝损伤,其机制可能与改善脂肪酸氧化、细胞代谢和抑制细胞凋亡有关。

急性酒精性肝损伤小鼠口服五味子总木脂素后8种木脂素的药代动力学分析

目的建立高效液相色谱法(HPLC),同时测定小鼠血浆中的8种五味子木脂素单体,分析正常小鼠和急性酒精性肝损伤小鼠灌胃五味子总木脂素后的药代动力学特征差异。方法选用雄性C57BL/6小鼠,一次性灌胃给予50%酒精溶液(12 mL/kg)建立急性酒精性肝损伤模型;于给药后不同时间点取血,测定小鼠血浆中的8种五味子木脂素单体,分析其药代动力学参数。结果在HPLC条件下,8种五味子木脂素的分离度良好;与正常组比较,急性酒精性肝损伤小鼠血液中8种五味子木脂素的半衰期(t_(1/2))明显增加,达峰时间(t_(max))延后,曲线下面积(AUC)、平均驻留时间(MRT)和表观分布容积(V_(d))也有所增加,清除率(CL)减少。结论急性酒精性肝损伤后,五味子木脂素在小鼠体内的暴露增加,半衰期体内作用时间延长,清除率减少,可能是酒精影响肠道吸收功能和肝药酶释放所导致的结果。