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Aβ-结合性酒精脱氢酶蛋白在缺氧性细胞中的表达及其对细胞缺氧性损害的保护作用 被引量:2
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作者 王朝东 吴晓牧 +3 位作者 胡国柱 柳喆 徐红薇 SHI Du-yan 《江西医学院学报》 CAS 2006年第6期5-8,共4页
目的研究Aβ-结合性酒精脱氢酶蛋白(ABAD)在缺氧性细胞中的表达及其对细胞缺氧性损害的保护作用,以探讨急性缺氧性疾病的治疗新方法。方法①观测缺氧状态下细胞Aβ-结合性酒精脱氢酶蛋白表达水平的变化:体外培养的COS-1细胞置于缺... 目的研究Aβ-结合性酒精脱氢酶蛋白(ABAD)在缺氧性细胞中的表达及其对细胞缺氧性损害的保护作用,以探讨急性缺氧性疾病的治疗新方法。方法①观测缺氧状态下细胞Aβ-结合性酒精脱氢酶蛋白表达水平的变化:体外培养的COS-1细胞置于缺氧箱诱导缺氧1~16h(氧浓度控制1%~2%),收集细胞,裂解,离心得到蛋白提取液,同时用TRlzol方法提取总RNA;Northern blot法检测正常和缺氧状态下细胞ABADmRNA的表达水平;15μg总RNA于10%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳分离并转移至尼龙膜,采用QuikHyb快速杂交系统与α-^32P标记的全长ABAD cDNA探针杂交,杂交膜于-80℃放射自显影18h;Western blot检测正常和缺氧状态下细胞ABAD蛋白的表达水平:20μg蛋白样品于SDS-NuPAGE胶电泳分离,电转移使样品印迹至尼龙膜上,后者依次与鼠抗人ABAD单克隆抗体(一抗)和兔抗鼠抗体(二抗)孵育,用化学发光法显示印迹条带;②观测上调ABAD表达对细胞缺氧性损害的影响:采用逆转录PCR(RT—PCR)方法,扩增ABAD全长编码序列,PCR产物直接克隆至pcDNA3表达质粒中,构建ABAD-pcDNA3表达质粒;将1μgpcDNA3-ABAD表达质粒DNA用Lipofectmine2000转染剂转染至COS-1细胞株,培养36h。正常对照组则以1μg pcDNA3空载体转染;转染后细胞按上述方法进行缺氧处理,收集细胞,裂解,采用DNA片段化检测试剂盒定量检测ABAD正常表达和高表达条件下缺氧诱导的细胞死亡事件。结果与正常表达组相比,ABADmRNA及蛋白水平均于缺氧后1h开始下降,4~8h后显著降低,至16h表达几乎完全消失;提高ABAD的表达可明显降低缺氧所致的DNA片段化水平(P〈0.05)。结论ABAD是缺氧高度敏感性蛋白,同时又是一个对缺氧性损害有明显保护作用的蛋白。因此,它可望成为急性缺血缺氧性疾病临床监测的一个新指标,并具有潜在治疗应用价值。 展开更多
关键词 Aβ-结合性酒精脱氢酶蛋白 细胞 缺氧 损害 保护作用
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酒精脱氢酶基因2的扩增参数探讨
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作者 屈卫东 吴玮 +4 位作者 吴德生 王晋清 张雪 王云波 周颖 《现代预防医学》 CAS 1998年第1期11-14,共4页
酒精脱氢酶(ADH)在人类酒精氧化代谢过程中发挥着重要作用。机体摄入的醇类超过80%是依靠该酶作用。ADH2具有很高的活性,被认为是最关键的酶。编码该酶的ADH2基因与ADH1和ADH3基因在基因序列上有94%是一致... 酒精脱氢酶(ADH)在人类酒精氧化代谢过程中发挥着重要作用。机体摄入的醇类超过80%是依靠该酶作用。ADH2具有很高的活性,被认为是最关键的酶。编码该酶的ADH2基因与ADH1和ADH3基因在基因序列上有94%是一致的。因而在扩增过程中存在相互干扰,进而影响基因多型的确定。为区别它们,我们在其3′端设计了3个不翻译的碱基使其有别于ADH3基因。同时对该基因的扩增参数(复性温度、复性时间、引物浓度)进行优化,改善了运行条件,排除干扰,为利用限制性片段长度多态型进行基因多态型研究提供了较好的实验基础。 展开更多
关键词 扩增参数 ADH2 酒精脱氢酶 酒精代谢
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Aβ-结合性酒精脱氢酶蛋白在急性缺氧性细胞损害中的表达调节机制研究
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作者 王朝东 吴晓牧 +3 位作者 胡国柱 张昆南 徐红薇 YAN Shi-du 《实用临床医学(江西)》 CAS 2006年第12期1-4,8,共5页
目的探讨Aβ-结合性酒精脱氢酶蛋白(ABAD)的基因表达调控机制及其对缺氧反应的分子生物学机理。方法根据Genebank中包含ABAD基因全长序列的DNA序列设计引物,PCR扩增ABAD基因上游启动子区全长2055bp之片段,并将其亚克隆至荧光酶报告载体L... 目的探讨Aβ-结合性酒精脱氢酶蛋白(ABAD)的基因表达调控机制及其对缺氧反应的分子生物学机理。方法根据Genebank中包含ABAD基因全长序列的DNA序列设计引物,PCR扩增ABAD基因上游启动子区全长2055bp之片段,并将其亚克隆至荧光酶报告载体LuciferasepGL3中的NheI/SmaI位点,构建ABAD启动子-pGL3表达质粒(P-2055)及5′-端截短的ABAD启动子-pGL3表达载体(P-1453,P-128)。用脂质体Lipofectmine2000将1μg待转染的空pGL3表达载体DNA(阴性对照)及ABAD全长和5′截短启动子-pGL3表达质粒DNA(P-2055,P-1453,P-128)转染至对数生长的COS-1细胞中。细胞转染后48h,收集细胞,裂解,提取蛋白,以Dual-luciferasere-porter系统为底物并采用荧光测定仪测定荧光酶活性。采用相对活性方法比较全长和截短的ABAD启动子活性,以确定核心启动子序列。采用缺氧箱分别诱导细胞缺氧后,测定ABAD核心启动子序列的活性改变。结果ABAD全长启动子-pGL3表达质粒(P-2055)的荧光酶活性较pGL3空表达载体高300倍以上(P<0.001)。该全长启动子截短至-128bp(P-128)时,活性仍为全长序列的105%,而将该128bp序列去除后,其活性几乎全部消失。ABAD核心启动子序列(P-128)经缺氧处理1、4、8、16h后,其活性分别降为正常氧状态的(64.5±1.7)%、(51.4±1.6)%、(17.8±1.1)%、(8.3±0.3)%,各缺氧时间点相对活性与正常氧状态相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论ABAD上游128bp为该基因的核心启动子序列,决定了ABAD的表达活性。该启动子对缺氧高度敏感,其对缺氧的反应是ABAD缺氧性改变的主要分子机理。 展开更多
关键词 Aβ-结合性酒精脱氢酶蛋白 细胞 缺氧 表达调节
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酒精性肝病不同阶段大鼠胃乙醇脱氢酶活性变化研究 被引量:2
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作者 王国祥 刘春荣 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2000年第3期181-183,共3页
目的探讨酒精性肝病(Alcohohc liver disease,ALD)不同病理阶段胃乙醇脱氢酶(Alcohol dehydrogenase,ADH)活性变化。方法用酶组织细胞化学染色技术,在光镜下观察酒精性肝病不同... 目的探讨酒精性肝病(Alcohohc liver disease,ALD)不同病理阶段胃乙醇脱氢酶(Alcohol dehydrogenase,ADH)活性变化。方法用酶组织细胞化学染色技术,在光镜下观察酒精性肝病不同阶段胃ADH活性变化,并用LUZEX—F灰度图像分析仪半定量。结果ALD不同阶段胃ADH活性进行性下降,差异有显著性(P<0.05)。结论提示酒精性肝病不同阶段胃AD H活性进行性下降,从而降低了乙醇的第一关卡代谢,增加了乙醇对肝脏的毒害作用。 展开更多
关键词 酒精性肝病 酒精脱氢酶 组织细胞化学
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中国五个民族人群样本中酒精代谢相关酶基因多态型分布比较 被引量:13
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作者 曹西蓉 吴德生 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期156-159,共4页
采用聚合酶链式反应 限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)方法测定酒精脱氢酶 2 (ADH2 )和乙醛脱氢酶 2 (ALDH2 )的基因型 ,以获得ADH2、ALDH2基因多态型在中国汉、回、蒙古、维吾尔、白五个民族正常人群样本中的分布并对其进行比较。结果... 采用聚合酶链式反应 限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)方法测定酒精脱氢酶 2 (ADH2 )和乙醛脱氢酶 2 (ALDH2 )的基因型 ,以获得ADH2、ALDH2基因多态型在中国汉、回、蒙古、维吾尔、白五个民族正常人群样本中的分布并对其进行比较。结果显示 :(1)五民族中均为杂合型ADH2与纯合型ALDH2占优势 ;(2 )ADH2。 展开更多
关键词 酒精脱氢酶2 乙醛2 民族 基因多态性 易感基因型 饮酒 酒精 人群样本
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育龄期女性酒精代谢相关基因多态型的分布 被引量:3
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作者 曹西蓉 吴德生 周蓉 《环境与健康杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期25-28,共4页
目的研究酒精脱氢酶2(ADH2)基因型和乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因型在育龄期妇女中的分布 ,为筛选高危敏感个体、采取针对性预防措施以减少酒精相关性出生缺陷(ARBD)的发生提供理论基础和技术指导。方法用PCR_RFLP技术测定随机抽取的60名健... 目的研究酒精脱氢酶2(ADH2)基因型和乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因型在育龄期妇女中的分布 ,为筛选高危敏感个体、采取针对性预防措施以减少酒精相关性出生缺陷(ARBD)的发生提供理论基础和技术指导。方法用PCR_RFLP技术测定随机抽取的60名健康孕妇的ADH2、ALDH2基因型。结果杂合型ADH2与纯合型ALDH2占优势(分别为0.800 ,0.617) ;9种不同ADH2基因型与ALDH2基因型的组合分布间差异无显著性(χ2=1.80,P>0.05)。结论杂合型ADH2占优势可能与样本量偏低、突变等因素有关 ,需进一步研究验证 ;育龄期妇女中携带酒精相关性疾病易感基因型个体占多数(0.617) ,应加强监测与预防酒精相关性出生缺陷 (ARBD) 展开更多
关键词 酒精脱氢酶 乙醛 酒精 相关性出生缺陷 健康危害 饮酒 ARBD 相关基因 多态型分布
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酒精依赖与多巴胺系统基因多态性研究进展 被引量:2
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作者 武晓华 景强 《医学研究杂志》 2009年第1期88-90,共3页
关键词 酒精依赖 基因多态性 多巴胺系统 P4502E1 代谢相关基因 遗传因素 动物模型 酒精脱氢酶
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酒精中毒在遗传学上的新发现
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作者 静雨 《国外医学情报》 1999年第3期32-32,共1页
美国国立酒精滥用与酒精中毒研究所(NLAAA)最近报道了他们在影响对酒精敏感性基因位点研究方面的第一个重要发现。来自于酒精中毒遗传学合作研究组(COCA)的两项研究显示,酒精中毒-易感基因存在于许多染色体上。一项研究检查了103个... 美国国立酒精滥用与酒精中毒研究所(NLAAA)最近报道了他们在影响对酒精敏感性基因位点研究方面的第一个重要发现。来自于酒精中毒遗传学合作研究组(COCA)的两项研究显示,酒精中毒-易感基因存在于许多染色体上。一项研究检查了103个易发生酒精中毒家族中的607名成员。正如以前的研究所表明的那样,这样的人都有一个低的P<sub>3</sub>振幅(ampitude)。 展开更多
关键词 酒精中毒 遗传学 染色体 敏感性 易感基因 酒精滥用 合作研究 基因位点 研究所 酒精脱氢酶
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生物标志物ADH1C、PCK1、MARCO在急性阑尾炎诊断中的作用 被引量:1
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作者 史伟山 王定一 廖新伟 《中国医学工程》 2022年第7期17-21,共5页
目的探讨急性阑尾炎的潜在生物标志物酒精脱氢酶1C(ADH1C)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(PCK1)、胶原结构巨噬细胞受体(MARCO)在急性阑尾炎的诊断中的作用。方法采用GSE9579阵列用于差异化鉴定急性阑尾炎相关标志物,选取2020年1月至2021年... 目的探讨急性阑尾炎的潜在生物标志物酒精脱氢酶1C(ADH1C)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(PCK1)、胶原结构巨噬细胞受体(MARCO)在急性阑尾炎的诊断中的作用。方法采用GSE9579阵列用于差异化鉴定急性阑尾炎相关标志物,选取2020年1月至2021年6月在泌阳白云山中西医结合医院急诊科住院的80例腹痛患者作为研究对象。其中最终确诊为急性阑尾炎的患者46例为阑尾组,其他原因腹痛的患者34例为对照组。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测不同组患者的血清ADH1C、PCK1、MARCO水平,比较两组患者血清ADH1C、PCK1、MARCO水平异常率及血清学水平。利用曲线下面积(AUC)值检验ADH1C、PCK1、MARCO的诊断性能。结果从GSE25765数据集中,进行阑尾组与对照组的差异性基因表达,发现ADH1C、PCK1显著下调,而MARCO显著上调。KEGG富集分析发现这些差异基因参与P450-药物代谢、酪氨酸代谢、丙酮酸代谢、类固醇激素生物合成及PPAR信号通路等生物学功能。与对照组相比,阑尾组患者血清中ADH1C、PCK1含量显著均较低,MARCO含量显著升高(P<0.05)。血清ADH1C、PCK1、MARCO水平对急性阑尾炎分别具有良好的诊断效能(AUC值>0.07)。结论ADH1C、PCK1、MARCO在急性阑尾炎患者中变化显著,对阑尾炎的临床诊断具有一定指导意义。 展开更多
关键词 急性阑尾炎 酒精脱氢酶1C 磷酸烯醇式丙酮酸羧激1 胶原结构巨噬细胞受体
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消化系肿瘤
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《国外科技资料目录(医药卫生)》 CAS 2001年第10期140-141,共2页
0137932 酒精脱氢酶3和细胞色素 P-450 E1表型对上气消化道癌易感性的作用/Bouchardy C//Int J Cancer.-2000,87(5).-731~740 津医情0137933 上气消化道癌化学预防试验中生物分子标记为中间终点/Papadimi-trakopoulou V A//Int J Cance... 0137932 酒精脱氢酶3和细胞色素 P-450 E1表型对上气消化道癌易感性的作用/Bouchardy C//Int J Cancer.-2000,87(5).-731~740 津医情0137933 上气消化道癌化学预防试验中生物分子标记为中间终点/Papadimi-trakopoulou V A//Int J Cancer.-2000,88(6).-852~855 津医情0137934 淋巴地形图和集中分析警戒淋巴结追溯胃肠道肿瘤/Tsioulias G J//ArchSurg.-2000,135(8).-926~932 展开更多
关键词 生物分子标记 消化道癌 癌易感性 酒精脱氢酶 预防试验 胃肠道肿瘤 细胞色素 地形图 消化系肿瘤 淋巴结
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酒肉穿肠过
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作者 杨珏 《茶(健康天地)》 2008年第2期48-49,共2页
年节前后是应酬与喝酒的高峰时节,谈到饮酒吃肉,健康就是一个不能绕过去的话题,尤其是在如今人人珍惜生命的时代。餐桌上"冲锋陷阵",大鱼大肉,红酒、白酒、葡萄酒,忙不完的应酬,吃不完的饭局,酒肉穿肠过,酒与肉的关系,当然值... 年节前后是应酬与喝酒的高峰时节,谈到饮酒吃肉,健康就是一个不能绕过去的话题,尤其是在如今人人珍惜生命的时代。餐桌上"冲锋陷阵",大鱼大肉,红酒、白酒、葡萄酒,忙不完的应酬,吃不完的饭局,酒肉穿肠过,酒与肉的关系,当然值得细细梳理,慢慢道来。 展开更多
关键词 红葡萄酒 一杯牛奶 开胃酒 母鸡汤 伤肝 下午两点 酒精脱氢酶 酒精 油腻感 红肿热痛
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Relationship between genetic polymorphisms of alcohol and aldehyde dehydrogenases and esophageal squamous cell carcinoma risk in males 被引量:7
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作者 Chia-Fang Wu Deng-Chyang Wu +4 位作者 Hon-Ki Hsu Ein-Long Kao Jang-Ming Lee Cheng-Chieh Lin Ming-Tsang Wu 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2005年第33期5103-5108,共6页
AIM: To investigate the association between the genetic polymorphisms of ADH2 and ALDH2, lifetime alcohol consumption and esophageal cancer risk in the Taiwan Residents men. METHODS: Between August 2000 and June 200... AIM: To investigate the association between the genetic polymorphisms of ADH2 and ALDH2, lifetime alcohol consumption and esophageal cancer risk in the Taiwan Residents men. METHODS: Between August 2000 and June 2003, 134 pathologically-proven esophageal squamous cell carcinoma male patients and 237 male controls were recruited from Kaohsiung Medical University Hospital and Kaohsiung Veterans General Hospital in southern Taiwan. ADH2 and ALDH2 polymorphisms were genotyped using PCR-RFLP. RESULTS: Compared to those with ADH2*2/*2, individuals with ADH2*1/*2 and ADH2*1/*1 had 2.28- and 7.14-fold, respectively, increased risk of developing esophageal cancer (95%CI = 1.11-4.68 and 2.76-18.46) after adjusting for alcohol consumption and other covariates. The significant increased risk was also noted among subjects with ALDH2*1/*2 (adjusted OR (AOR) = 5.25, 95%CI = 2.47-11.19), when compared to those with ALDH2*1/*1. The increased risk of esophageal cancer was made greater, when subjects carried both ADH2*1/*1 and ALDH2*1/*2, compared to those with ADH2*1/*2 or ADH2*2/*2 and ALDH2*1/*1 (AOR = 36.79,95%a = 9.36-144.65). Furthhermore, we found a multipticative effect of lifetime alcoholic consumption and genotypes (ADH2 and ALDH2) on esophageal cancer risk. CONCLUSION: Our findings suggest that polymorphisms of ADH2 and ALDH2 can modify the influence of alcoholic consumption on esophageal cancer risk. 展开更多
关键词 Esophageal cancer ALCOHOL Alcoholdehydrogenase Aldehyde dehydrogenase Geneticpolymorphisms
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