酚糖酯-免疫球蛋白M和鼻分泌物中麻风菌PCR检测在麻风流行病学中的应用

目的通过对流行乡村(同烘和南丘)麻风病患者、家内接触者及普通人群麻风菌感染的检测,评估实验流行病学对预测麻风病传播的意义。方法采用酚糖酯-酶联免疫吸附试验(PGL-ELISA)和检测鼻携带麻风菌的PCR方法,开展流行病学调查。结果(1)麻风病家内接触者的酚糖酯-免疫球蛋白M(PGL-IgM)阳性率和PCR检测的麻风菌鼻携带率分别为30.4%和23.1%;但PGL抗体阳性率在家内接触者和普通村民之间却无显著性差异。(2)两村普通村民的PGL-IgM阳性率,在统计学上无显著差异。然而,在<20岁的年龄组中,同烘村的PGL-IgM阳性率却显著高于南丘村。无论同烘或南丘村,PGL-IgM阳性率高峰均在<20岁的年龄组。随年龄的增加,阳性率逐渐下降。此外,女性的PGL-IgM阳性率高于男性。结论两村的新发现病人主要为年轻人,这与两村PGL-IgM阳性高峰位于<20岁年龄组相关。在<20岁的年龄组中,同烘村的PGL-IgM阳性率显著高于南丘村,除与同烘村患病率和发现率均高于南丘村相关,也与消除麻风病运动(LEC)后,同烘村仍有新病人出现有关。这一现象似乎支持麻风患病率与PGL-IgM阳性率相关。为评价麻风病的传播是否得到控制,以PGL的血清学仍是一种有用的方法。

抗麻风杆菌酚糖脂1末端三糖的单克隆抗体的制备

将麻风杆菌特异性抗原酚糖脂Ⅰ(phenolic glycolipid I,PGL-I)包被在明尼苏达沙门氏菌(Salmonella minisota)表面,制成免疫原、脾脏内免疫BALB/c鼠,取免疫鼠脾脏制成脾细胞悬液,与Sp2/0细胞按常法融合,选择性培养。凡有克隆生长的,对其上清,用人工合成、含PGL-I末端三糖的人工半合成抗原——NT-O-BSA作ELISA进行筛选。从中选择了一株对PGL-I末端三糖表位特异的单克隆抗体——E_(10)F_1进行了初步鉴定。E_(10)F_1的Ig亚类为IgG3,与大多数抗糖抗体的Ig亚类一致。经ELISA及斑点免疫吸附试验鉴定,E_(10)F_1仅与PGL-I包被的明尼苏达沙门氏菌出现阳性反应,不与明尼苏达沙门氏菌、BSA、BCG、耻垢分枝杆菌和堪萨斯分枝杆菌发生反应。证明单克隆抗体E_(10)F_1所识别的抗原表位为PGL-I分子末端三糖,也是麻风杆菌的特异性抗原表位。文中对制备抗糖的单克隆抗体的实验设计进行了讨论。

酚糖脂抗原及S100蛋白检测在麻风病组织学诊断中的意义

对原临床和常规病理确诊有困难的１０例ＰＢ和１１例ＭＢ的复发皮损组织进行了平行的常规ＨＥ、ＡＦ和特异性的ＰＧＬ－、Ｓ１００蛋白免疫组化染色，并与９例已确诊ＰＢ和１例ＭＢ进行了对比。结果证明在疑似复发的１例ＰＢ中虽然ＡＦ和ＰＧＬ－１均为阴性，但病灶内显示Ｓ１００蛋白阳性；疑似复发的１１例ＭＢ中有８例ＡＦ和ＰＧＬ－１染色一致，在ＨＥ非特异性病变的４例病例中有３例ＡＦ和ＰＧＬ－１染色均呈阴性。ＰＧＬ－１、Ｓ１００蛋白染色在复发病例中，分布部位典型，为正确诊断麻风病。

一个麻风病高发家系的血清及分子流行病学调查

本文对一瘤型麻风患者在详细询问接触史和对所有家内接触者进行体检后,发现了一个麻风病高发家系。为了追溯传染源,对家系内患者皮损内麻风菌DNA,对AC9、6-7、GTA9、AT17四位点分型。家系中5例患者长期居住两地数十年,但基因型一致则证实患者均感染同一传染源。应用Flow-Test检测家系内患者及家内接触者血清PGL-I-Ab水平显示,患者PGL-1抗体滴度均在(++)或以上,阳性率100%(5/5);家内接触者阳性率66.7%(6/9),提示家内接触者感染较严重。该文有助于提高皮肤科大夫对麻风病的诊断水平。

酶联免疫吸附试验检测麻风特异性抗PGL－1抗体

用麻风菌特异性酚糖脂－１（ＰＧＬ－１）抗原（ＮＴ－Ｐ－ＢＳＡ）作酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ），分别检测麻风病人５０例（ＬＬ４０例。阳性１６例，占４０．０ｆ％；ＢＬ９例，阳性４例，占４４．４％；Ⅰ１例为阴性），总阳性２０例，占４０．０％。治愈老残病人１３３例阳性１９例，占１４．３％；家内接触者１０２例，阳性９例，占８．８％。并作了结核病人８７例及正常人群１７４例。结果表明ＮＴ－Ｐ－ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ法具有较高的敏感性和特异性，将有助于麻风的早期诊断、判愈、复发予测及亚临床感染和免疫流行病学等研究。