百合高效液相色谱指纹图谱的建立及3种酚酸甘油酯苷活性成分含量的测定

称取过筛后的百合样品粉末2 g,加入80%(体积分数,下同)乙醇溶液150 mL,超声2 h,加热回流提取2 h,趁热抽滤,残渣用80%乙醇溶液150 mL再次加热回流提取2 h,抽滤,合并滤液,减压浓缩,用3 mL水和7 mL甲醇超声溶解残渣,以转速12000 r·min^(-1)离心20 min,取上清液,过0.45μm微孔滤膜,滤液注入高效液相色谱仪,以不同体积比的乙腈和0.1%(体积分数)磷酸溶液的混合液为流动相进行梯度洗脱。利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004 A版)建立11批不同产地百合样品指纹图谱,结合分层聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘-判别分析(OPLS-DA),筛选出对百合质量影响较大的差异性标志物,并对3种酚酸甘油酯苷活性成分王百合苷H、王百合苷A和王百合苷B的含量进行测定。结果表明:从11批不同产地百合样品指纹图谱中共标定了40个共有峰,相似度均大于0.950;HCA、PCA和OPLS-DA结果一致,均将11批百合样品分为5类,并且筛选出了5种差异性标志物,包含王百合苷H、王百合苷A、王百合苷B和两种未知物;王百合苷H、王百合苷A、王百合苷B的质量浓度在一定范围内与对应的峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)为0.0085~0.3190 mg·L^(-1);按照标准加入法进行回收试验,回收率为98.0%~105%,测定值的相对标准偏差(n=6)为1.1%~2.2%。

百合磷茎中Regaloside A、Acetylregaloside C与Regaloside B高速逆流色谱分离及生物活性研究

建立了高速逆流色谱分离制备药食同源植物百合磷茎中3个酚酸甘油酯苷的方法,同时测定了化合物对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基的清除作用、脂质的过氧化抑制作用及对α-淀粉酶活性的促进作用。以乙酸乙酯-正丁醇-水(0. 5%乙酸,3∶1. 5∶5,体积比)为溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,从250 mg百合磷茎提取物中分离得到4. 2 mg纯度为96. 2%的化合物1,2. 3 mg纯度为95. 1%的化合物2,5. 8 mg纯度为98. 8%的化合物3。经质谱及核磁共振鉴定化合物1~3分别为王百合苷A(Regaloside A)、乙酰化王百合苷C(Acetylregaloside C)、王百合苷B(Regaloside B);活性研究表明,Acetylregaloside C对DPPH自由基清除作用及脂质过氧化抑制作用均最强,Regaloside A与Regaloside B对DPPH自由基清除作用很弱,对脂质过氧化有一定的抑制作用且相近,化合物抗氧化作用强弱为:化合物2> 1≈3。化合物在不同浓度下对α-淀粉酶活性的促进作用具有一定差异,但化合物间无显著差异。

卷丹化学成分研究

目的:研究卷丹Lilium lancifolium Thunb.的化学成分。方法:采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶色谱及高压制备色谱等方法对卷丹的化学成分进行分离纯化,并通过其理化性质及波谱数据对分离得到的化合物进行结构表征。结果:从卷丹中共分离得到8个酚酸甘油酯、4个苯丙素及2个黄酮类化合物,分别鉴定为:regaloside M(1)、1-O-阿魏酰基-2-O-对香豆酰甘油酯(2)、regaloside A(3)、regaloside B(4)、regaloside E(5)、regaloside F(6)、regaloside H(7)、regaloside J(8)、2,6-dimethoxy-4-(prop-2-enyl)phenyl-O-α-L-rha-(1→6)-β-D-glucoside(9)、2,6-dimethoxy-4-(prop-2-enyl)phenyl-O-β-D-glu-(1→6)-β-D-glucoside(10)、对香豆酸(11)、咖啡酸(12)、根皮苷(13)、矢车菊素-3-芸香糖苷(14)。结论:其中,化合物1为新的酚酸甘油酯类化合物,化合物2、7~9为首次从该植物中分离得到。

基于UPLC-Q-TOF-MS技术分析百合地黄汤的化学成分

目的:采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术对百合地黄汤中的化学成分进行研究。方法:选择ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),以乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱(0~3 min,5%~11%A;3~6 min,11%~12%A;6~8 min,12%A;8~12 min,12%~20%A;12~13 min,20%~26%A;13~15 min,26%~32%A;15~17 min,32%~42%A;17~19 min,42%~5%A;19~20 min,5%A),流速0.4 m L·min-1,柱温30℃,进样量5μL;采用电喷雾离子源,在正、负离子模式下采集数据。运用SCIEX OS 1.4软件,根据化合物的相对保留时间、准分子离子峰和碎片离子峰等信息,结合对照品和相关文献资料进行化学成分分析。结果:在百合地黄汤中共鉴定出49个化学成分,包括酚酸甘油酯类5个,苯乙醇苷类15个,环烯醚萜类11个,紫罗兰酮类8个,苯丙素类3个,核苷类2个,有机酸类1个,其他类4个;其中酚酸甘油酯类来源于百合,其他成分主要来源于地黄,4个化学成分(毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、阿魏酸、咖啡酸)经对照品比对鉴定。结论:该研究建立了能快速、准确分析百合地黄汤化学成分的检测方法,较全面地阐述了百合地黄汤的化学成分信息,为该方的质量控制、药效物质基础研究以及复方制剂开发奠定了基础。