基于Cre/Loxp系统Tyro3、Axl受体酪氨酸激酶转基因小鼠的建立

目的采用大肠杆菌β-半乳糖酶基因LacZ作为报告基因,建立Tyro3、Axl受体酪氨酸激酶含有loxp位点的转基因小鼠。与不同组织特异性Cre小鼠杂交,获得时空性表达Tyro3、Axl的转基因小鼠,为研究其在各个组织中的功能奠定基础。方法构建含有loxp位点的Tyro3、Axl受体酪氨酸激酶质粒,测序正确后,通过显微注射法将插入CAG启动子下游的Geo-STOP-msAxl及Geo-STOP-msTyro3基因的转基因载体注射入BDF1供体鼠受精卵,移植受精卵至ICR受体鼠,待产仔后,通过双引物PCR鉴定F0以及Fn代小鼠的基因型,RT-PCR,X-gal染色观察小鼠组织中LacZ基因,运用WB(Western Blot)检测转基因小鼠和野生型小鼠体内目的蛋白表达的差异。结果获得了含有目的基因的转基因阳性小鼠;通过RT-PCR对阳性小鼠证明LacZ基因的存在;对存在LacZ基因的小鼠进行X-gal染色,在Geo-STOP-msTyro3的脑、睾丸、胸腺中观察到蓝色沉淀,在Geo-STOP-msAxl的脑、心、肾中观察到蓝色沉淀,间接说明目的基因能表达的组织和器官;对双阳性的Geo-STOP-msTyro3、Geo-STOP-msAxl转基因小鼠和野生型小鼠,WB检验证实Tyro3、Axl基因的表达没有差异,说明在加入stop序列之后,Tyro3基因确实存在,而且表达受到抑制。结论成功建立Geo-STOP-msAxl及Geo-STOP-msTyro3酪氨酸受体转基因小鼠。

鼻咽癌组织的erb-b2受体酪氨酸激酶3水平及临床意义

目的探讨鼻咽癌(NPC)组织的erb-b2受体酪氨酸激酶3(ErbB3)水平及临床意义。方法选取2013年1月至2015年9月65例经病理证实为NPC患者的癌组织及对应癌旁正常鼻咽部组织,采用实时荧光定量PCR(qPCR)和Western blotting检测NPC组织的ErbB3 mRNA和蛋白水平,分析ErbB3 mRNA水平与NPC临床病理特征和预后的关系。结果Western blotting结果显示,30例NPC组织的ErbB3蛋白水平高于对应癌旁组织(P<0.05);qPCR结果显示,65例NPC组织的ErbB3 mRNA水平为4.625±1.980,高于对应癌旁组织的1.033±0.600(P<0.05)。ErbB3 mRNA水平与NPC患者的性别、年龄、病理分型、肿瘤最大径和是否复发无关(P>0.05),而与肿瘤侵犯深度的T分期、淋巴结有无转移的N分期、有无远处转移的M分期和综合的TNM分期有关(P<0.05)。ErbB3 mRNA高水平组与低水平组的中位总生存期(OS)分别为52.0个月和未达,3年总生存率分别为75.0%和86.2%,5年总生存率分别为33.3%和65.5%,差异有统计学意义(P<0.05);多因素分析显示ErbB3 mRNA水平是影响NPC患者OS的独立风险因素(HR=2.907,95%CI:1.372~6.160,P=0.005)。结论ErbB3在NPC的发生发展中可能起至关重要作用,与预后密切相关,有望成为判断NPC预后的新指标及临床治疗的新靶点。

止麻消痰活血汤对老年心肌梗死大鼠神经调节蛋白-1/受体酪氨酸蛋白激酶erbB3通路及心室重构的影响

目的 探讨止麻消痰活血汤对老年心肌梗死大鼠神经调节蛋白-1(NRG-1)/受体酪氨酸蛋白激酶erbB3(ErbB3)通路及心室重构的影响。方法 研究起止时间为2019年2—10月,大鼠来源于上海邦耀生物公司。制备老年心肌梗死模型大鼠,以随机数字表法分为模型组、止麻消痰活血汤低中高剂量组(10 mL/kg、20 mL/kg、30 mL/kg)、地尔硫‰组(2.61 mg/kg),每组12只,另取12只SD老年大鼠设为假手术组,分组处理后,测定各组大鼠左心室质量指数;苏木精-伊红(HE)、马松(Mosson)染色分别检测大鼠心肌病理形态变化及心室纤维化程度;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;蛋白质印迹法检测大鼠心肌NRG-1/ErbB3通路相关蛋白的表达。结果 与假手术组比较,模型组大鼠心肌纤维扭曲、断裂,心肌细胞肥大、坏死,可见炎性细胞浸润等病理损伤,且胶原纤维显著增多,纤维化严重,血清TGF-β1、IL-6及TNF-α水平、左心室质量指数[(23.27±1.84)‰比(12.23±0.85)‰]显著升高(P<0.05),心肌NRG-1/ErbB3通路相关蛋白NRG-1[(0.30±0.04)比(2.16±0.37)]、p-ErbB3/ErbB3[(0.09±0.02)比(1.02±0.20)]显著降低(P<0.05);与模型组比较,止麻消痰活血汤低、中、高剂量组、地尔硫‰组大鼠病理损伤及纤维化症状得到改善,血清TGF-β1、IL-6及TNF-α水平、左心室质量指数[(19.92±1.47)‰、(16.36±1.06)‰、(12.89±0.87)‰、(12.84±0.86)‰比(23.27±1.84)‰]降低(P<0.05),心肌NRG-1/ErbB3通路相关蛋白NRG-1[(0.94±0.18)、(1.27±0.23)、(2.09±0.31)、(2.11±0.33)比(0.30±0.04)]、p-ErbB3/ErbB3[(0.27±0.04)、(0.51±0.08)、(0.92±0.16)、(0.94±0.18)比(0.09±0.02)]升高(P<0.05),且止麻消痰活血汤组间有剂量依赖性(P<0.05);与地尔硫‰组相比,止麻消痰活血汤高剂量组大鼠各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论 止麻消痰活血汤可激活NRG-1/ErbB3通路,减轻心肌梗死大鼠炎症,缓解其心肌组织病理损伤及纤维化变性,改善大鼠心室重构症状。

食管癌组织中ErbB3、miR-27a表达情况及与临床预后的关系

目的探究食管癌组织中Erb-B2受体酪氨酸激酶3(ErbB3)、微RNA-27a(miR-27a)表达情况及与临床预后的关系。方法回顾性选取2019年6月至2023年6月杨凌示范区医院病理科收治的120例食管癌患者作为研究对象。根据格拉斯哥预后评分(GPS)将患者分为预后良好组(97例)和预后不良组(23例)。选取50例同期体检的健康人员作为对照组。比较预后良好组和预后不良组一般资料,食管癌患者和对照组ErbB3、miR-27a表达水平。采用logistic回归分析食管癌患者预后的影响因素并构建列线图。采用Spearman相关性分析ErbB3、miR-27a与预后的相关性。采用受试者操作特征曲线(ROC)分析ErbB3、miR-27a对食管癌患者预后的预测效能。采用独立样本t检验、单因素方差分析和χ^(2)检验。结果预后良好组男55例,女42例;年龄47~68岁。预后不良组男14例,女9例;年龄45~66岁。预后不良组肿瘤分期Ⅲ期、淋巴结转移人数占比均高于预后良好组,低分化程度人数占比低于预后良好组(均P<0.05)。预后不良组ErbB3[(1.59±0.45)]、miR-27a[(2.59±0.95)]表达水平均高于预后良好组[(1.28±0.37)、(1.84±0.52)]和对照组[(0.72±0.28)(0.85±0.33)],且预后良好组均高于对照组(均P<0.05)。logistic回归分析显示,肿瘤分期、分化程度、淋巴结转移、ErbB3和miR-27a表达水平均是食管癌患者预后的影响因素(均P<0.05)。Spearman相关性分析显示,食管癌患者ErbB3、miR-27a表达水平均与GPS呈正相关(r=0.294、0.282,P=0.001、0.002)。ROC分析结果表明,ErbB3、miR-27a联合预测的曲线下面积(AUC)大于ErbB3、miR-27a单独预测(0.873比0.715、0.715)。结论食管癌组织中ErbB3、miR-27a表达水平对食管癌患者预后有良好评估价值。

伴FLT3突变的急性髓系白血病患者淋巴细胞亚群和细胞因子的表达水平及意义

目的:探讨伴FMS样酪氨酸激酶3受体(FMS like tyrosine kinase 3 receptor,FLT3)突变的初诊急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者外周血淋巴细胞亚群、细胞因子表达水平及其与血细胞计数、突变类型之间的相关性。方法:168例伴FLT3突变的AML患者纳入研究,进一步对FLT3突变类型进行分类,收集患者治疗前外周血淋巴细胞亚群、细胞因子数据及血细胞计数,分析其之间的相关性。结果:与健康对照组相比,伴FLT3突变的AML患者治疗前外周血CD4、白介素6(interleukin 6,IL-6)、IL-10表达水平升高,CD8、CD16+CD56、IL-2、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)、干扰素-γ(interferon gamma,IFN-γ)表达水平下降。按白细胞计数分组,CD3、CD4、CD8、CD19、IL-4、IL-10在组间分布差异具有统计学意义(P=0.039、P=0.024、P=0.034、P=0.008、P=0.048、P=0.024);按血小板计数分组,CD19、CD16+CD56在组间分布差异具有统计学意义(P=0.030、P=0.045)。按FLT3类型分组,分为FLT3-ITD^(+)、FLT3-TKD^(+)、FLT3(-ITD^(+)+TKD^(+))和FLT3-(ITD^(-)+TKD^(-))组,CD3、CD8、CD19、IL-10、TNF在4组间分布差异具有统计学意义(P=0.046、P=0.048、P=0.041、P=0.042、P=0.013)。结论:伴FLT3突变AML患者的血细胞计数及FLT3突变类型与淋巴细胞亚群和细胞因子的表达水平有关,可能有助于AML危险分层并对AML患者的预后有一定影响。

卵圆孔未闭合并偏头痛患者NTRK3基因表达水平及其与临床指标相关性分析

目的评估卵圆孔未闭(PFO)合并偏头痛(MA)患者的神经营养受体酪氨酸激酶3(NTRK3)基因表达水平及其与临床指标的相关性。方法选取收治的86例PFO患者为研究对象,根据临床症状不同分为合并MA组(n=46)、未合并MA组(n=40)。同期选取40例健康体检者作为对照组。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测3组NTRK3基因表达水平。比较合并MA组、未合并MA组患者的PFO直径、静息下右向左分流(RLS)、Valsalva状态下RLS、头痛影响测验-6(HIT-6)评分、偏头痛残疾程度评价量表(MIDAS)评分。分析NTRK3基因表达水平与PFO合并MA患者临床指标的相关性;分析PFO合并MA患者封堵术后MA缓解的影响因素。结果合并MA组和未合并MA组的NTRK3基因表达水平低于对照组,且合并MA组低于未合并MA组,差异有统计学意义(P<0.05)。合并MA组患者的静息下RLS、HIT-6评分、MIDAS评分高于未合并MA组,差异有统计学意义(P<0.05)。NTRK3基因表达水平与PFO合并MA患者静息下RLS、HIT-6评分、MIDAS评分存在负相关(P<0.05)。NTRK3基因表达水平是PFO合并MA患者封堵术后MA缓解的保护性因素(OR=0.621,P=0.018)。结论PFO合并MA患者的NTRK3基因表达水平显著较低,其与临床指标以及预后存在显著相关性。

海马微量注射酪氨酸激酶受体结合蛋白B3激动剂对癫痫模型大鼠自发性痫性发作的影响及其机制

目的探讨海马内注射酪氨酸激酶受体结合蛋白B3(Ephrin-B3)激动剂对癫痫模型大鼠自发性痫性发作及海马组织分泌型糖蛋白Reelin及磷酸化接头蛋白(p-Dab1)表达的影响。方法将78只大鼠按照体质量匹配原则随机分成对照组和模型组,每组39只。对照组大鼠正常饲养,模型组大鼠采用氯化锂-匹罗卡品注射法建立大鼠癫痫模型,在癫痫持续状态诱导成功后的急性期(7 d),静止期(14 d)和慢性期(60 d)取海马组织,采用免疫组化及蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测癫痫模型大鼠和正常大鼠海马组织Reelin蛋白及p-Dab1蛋白表达变化,每个时间点每组随机选取13只大鼠。另取48只大鼠,按照随机数字表法分为正常对照Fc-control组、正常对照EphB3-Fc组、癫痫Fc-control组和癫痫EphB3-Fc组,每组12只,前两组正常饲养,后两组进行癫痫造模,造模后7 d,所有大鼠按照分组分别进行双侧海马内注射Ephrin-B3的激动剂(EphB3-Fc)和Ephrin-B3激动剂的对照剂Fc-control,1次/d,连续7 d。给药结束后,观察两周内大鼠行为与脑电图的变化,采用免疫组化及Western blot检测Reelin蛋白及p-Dab1蛋白表达变化。采用SPSS 21.0进行统计分析,多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用Tukey's检验。结果免疫组化和Western blot结果均显示,模型组大鼠海马组织中Reelin和p-Dab1蛋白在致痫后7 d、14 d、60 d表达均低于对照组(均P<0.01)。免疫组化结果显示,与癫痫后Fc-control组相比,癫痫后EphB3-Fc组大鼠海马组织中p-Dab1蛋白的平均光密度值更高[(0.41±0.04),(0.58±0.06),P<0.05]。Western blot结果显示,癫痫后EphB3-Fc组大鼠海马组织中p-Dab1蛋白表达显著高于癫痫后Fc-control组[(1.34±0.04),(2.26±0.10),P<0.01]。动物行为学监测显示,与癫痫后Fc-control组相比,癫痫后EphB3-Fc组大鼠自发性痫性发作持续时间更短[(39.00±1.79)s,(26.50±1.87)s;t=23.21,P<0.01],频率更低[(2.00±0.89)次,(0.50±0.55)次;t=2.32,P<0.01],潜伏期延长[(6.33±1.37)d,(12.50±1.87)d;t=2.52,P<0.01]。脑电图结果显示,与癫痫后Fc-control组相比,癫痫后EphB3-Fc组的大鼠脑电图痫性放电幅度下降[(37.30±1.21)μV,(29.00±1.41)μV;t=25.14,P<0.01],发作持续时间缩短[(5.35±0.19)s,(2.35±0.19)s;t=3.13,P<0.01]。结论Ephrin-B3通过上调Reelin和p-Dab1减轻颞叶癫痫大鼠自发复发性癫痫发作。

Flt3配体增强HCV核心-包膜E2融合基因DNA疫苗诱导的细胞免疫应答

建立一种可高效诱导细胞免疫应答 ,对丙型肝炎病毒 (HCV)感染可能起预防和治疗作用的DNA疫苗。将小鼠Flt3配体 (FL)信号肽和胞外段cDNA插入结构优化的HCV核心 包膜E2融合抗原DNA疫苗pST CE2t,构建成pST CE2t FL。将pST CE2t FL转染COS7细胞 ,Westernblot和ELISA检测表明该重组质粒能表达HCV核心 包膜E2融合抗原和可溶性小鼠FL。分别将pST CE2t、pST CE2t FL和空载体pCI neo肌肉注射接种BALB c小鼠 ,检测小鼠的体液和细胞免疫应答。结果表明两种DNA结构均能在小鼠体内诱生细胞和体液免疫应答 ,但pST CE2t诱导的体液免疫应答强于pST CE2t FL ,而后者诱导的细胞免疫应答明显强于前者。FL能明显增强HCV核心 包膜E2融合抗原DNA疫苗诱导的细胞免疫应答 ,对于发展HCV预防和治疗性疫苗有潜在的应用价值。

MIP-1α和Flt3l基因佐剂联合应用对HPV16E7 DNA疫苗的免疫增强作用

目的:探讨巨噬细胞炎性蛋白1α(Macrophage inflammatory protein-1α,MIP-1α)和酪氨酸激酶受体3配体(Flt3ligand,Flt3l)基因佐剂联合应用增强人乳头瘤病毒16型(Human papillomavirus16,HPV16)E7DNA疫苗免疫效果的可能性。方法:构建真核表达质粒pcDNA3/MIP-1α、pcDNA3/Flt3l和pcDNA3/HPV16E7。C57BL/6小鼠随机分为8组,分别为pcDNA3组、pcDNA3/MIP-1α组、pcDNA3/Flt3l组、pcDNA3/MIP-1α和pcDNA3/Flt3l混合组、pcDNA3/HPV16E7组、pcDNA3/MIP-1α和pcDNA3/HPV16E7混合组、pcDNA3/Flt3l和pcDNA3/HPV16E7混合组以及pcDNA3/MIP-1α、pcDNA3/Flt3l和pcDNA3/HPV16E7混合组。每组14只,肌肉注射质粒免疫小鼠,每3周免疫1次,共3次;末次免疫后2周每组随机抽取6只小鼠,取脾脏制备淋巴细胞悬液,用CCK-8试剂盒检测其对TC-1靶细胞的特异性杀伤能力。其余小鼠在腹股沟处皮下注射5×104个TC-1细胞,观察肿瘤生长情况。结果:成功构建了真核表达质粒pcDNA3/MIP-1α、pcDNA3/Flt3l和pcDNA3/HPV16E7;pcDNA3/MIP-1α、pcDNA3/Flt3l和pcDNA3/HPV16E7混合组的CTL杀伤能力明显高于其它各组(P<0.01);肿瘤细胞攻击后16天,pcDNA3组小鼠全部长出肿瘤,而pcDNA3/MIP-1α、pcDNA3/Flt3l和pcDNA3/HPV16E7混合组的成瘤率仅为12.5%,明显低于其他组,统计学分析示8组之间成瘤率差异有显著性(P=0.007)。60天后各组成瘤率之间的差异无统计学意义(P=0.229)。结论:联合应用MIP-1α和Flt3l基因佐剂增强了HPV16E7DNA疫苗的免疫效果,一定程度上延缓了肿瘤的发生。

FN1、LZTS2、ERBB3在甲状腺癌演进过程中表达水平变化分析

目的分析纤连蛋白1(FN1)、亮氨酸拉链肿瘤抑制因子2(LZTS2)、Erb-B2受体酪氨酸激酶3(ERBB3)在甲状腺癌演进过程中的表达水平变化情况。方法选取2015年1月至2017年1月该院收治的110例甲状腺癌患者作为研究对象,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测甲状腺癌组织和癌旁组织中FN1 mRNA、LZTS2 mRNA、ERBB3 mRNA的表达水平。比较甲状腺癌组织与癌旁组织中FN1 mRNA、LZTS2 mRNA、ERBB3 mRNA表达水平,并比较不同临床病理特征甲状腺癌患者FN1 mRNA、LZTS2 mRNA、ERBB3 mRNA表达水平。根据甲状腺癌组织中FN1 mRNA、LZTS2 mRNA、ERBB3 mRNA表达水平分为高表达组和低表达组,采用Kaplan-Meier法绘制不同FN1 mRNA、LZTS2 mRNA、ERBB3 mRNA表达水平甲状腺癌患者生存曲线。结果与癌旁组织比较,甲状腺癌组织中FN1 mRNA、ERBB3 mRNA表达水平均升高,LZTS2 mRNA表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。不同TNM分期、有无淋巴结转移甲状腺癌患者FN1 mRNA、LZTS2 mRNA、ERBB3 mRNA表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。中位随访40个月,110例甲状腺癌患者总生存率为81.82%(90/110)。Kaplan-Meier生存曲线结果显示,FN1 mRNA、ERBB3 mRNA高表达组总生存率低于FN1 mRNA、ERBB3 mRNA低表达组,LZTS2 mRNA高表达组总生存率高于LZTS2 mRNA低表达组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论甲状腺癌组织中FN1 mRNA、ERBB3 mRNA呈高表达,LZTS2 mRNA呈低表达,与TNM分期、淋巴结转移有关,可作为甲状腺癌预后的评估指标。

EFNA3在人卵巢浆液性腺癌中的表达及临床意义

目的检测人卵巢浆液性腺癌中的EFNA3表达情况,对其临床意义进行分析。方法用免疫组织化学方法检测人正常卵巢组织、卵巢浆液性囊腺瘤组织以及卵巢浆液性腺癌组织中EFNA3的表达,并作免疫组化半定量分析,比较EFNA3在以上3种组织表达及其与临床病理参数的关系。结果 3种组织均能检到EFNA3的表达且定位于胞质浆;ENFA3在3组的半定量评分分别为正常卵巢组(5.29±0.71)、卵巢浆液性囊腺瘤组(5.64±0.51)、卵巢浆液性腺癌组(4.83±0.57),3组组织中的EFNA3表达程度差异有统计学意义(F=12.959,P<0.01),其中卵巢浆液性腺癌组低于正常卵巢组及卵巢浆液性囊腺瘤组(P<0.05)。在卵巢浆液性腺癌组EFNA3的表达:有淋巴结转移组(4.51±0.38)低于无淋巴结转移组(4.93±0.58)(P<0.05),低分化组(4.62±0.61)低于中高分化组(4.97±0.51)(P<0.05),Ⅲ~Ⅳ期(4.51±0.38)低于Ⅰ~Ⅱ期(4.96±0.59)(P<0.05)。结论人卵巢浆液性腺癌EFNA3表达程度比人正常卵巢组织及卵巢浆液性囊腺瘤组织低,且与有无淋巴结转移、分化程度、临床分期密切相关。

紫草素对人白血病MV4-11细胞的增殖抑制和促凋亡作用

目的:探讨紫草素对FMS样酪氨酸激酶3受体基因内部串联重复序列(FLT3-ITD)突变急性髓系白血病(AML)MV4-11细胞的增殖抑制和促凋亡作用,并初步阐明其分子机制。方法:生长状态良好的MV4-11细胞分为二甲基亚砜(DMSO)组和不同浓度(0.5、1.0、2.0、4.0和8.0μmol·L-1)紫草素组,处理细胞24和48 h,采用CCK-8法检测各组细胞增殖抑制率,并计算半数抑制浓度(IC 50)。MV4-11细胞分为空白对照组、DMSO组和不同浓度(0.25、0.50和1.00μmol·L-1)紫草素组,处理细胞48和72 h,采用羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)标记法检测各组细胞增殖率。MV4-11细胞分为DMSO组和不同浓度(0.702、1.404和2.808μmol·L-1)紫草素组,处理细胞48 h,采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率。MV4-11细胞分为DMSO组和不同浓度(0.351、0.702和1.404μmol·L-1)紫草素组,处理细胞48 h,Real-time PCR法检测各组细胞中微小RNA-155(miR-155)的表达水平。结果:CCK-8法和CFSE法检测,与DMSO组比较,不同浓度紫草素组细胞增殖抑制率明显升高(P<0.05或P<0.01),增殖率明显降低(P<0.05),且呈剂量依赖性;24和48 h时IC 50分别为1.743和1.404μmol·L-1。流式细胞术检测,与DMSO组比较,不同浓度紫草素组细胞凋亡率明显升高(P<0.01),且呈剂量依赖性。Real-time PCR法检测,与DMSO组比较,不同浓度紫草素组细胞中miR-155表达水平明显降低(P<0.01),1.404μmol·L-1紫草素组细胞中miR-155表达水平降低超过75%。结论:紫草素对人FLT3-ITD突变AML MV4-11细胞具有增殖抑制和促凋亡作用,并可下调miR-155表达,提示紫草素可能作为FLT3-ITD突变AML的潜在治疗药物之一。

唾液腺乳腺样分泌癌的研究进展

唾液腺乳腺样分泌癌(MASC)是一种近年来才被描述的唾液腺肿瘤新类型,因其存在与乳腺分泌性癌类似的特异性的E-二十六变异基因6-神经营养酪氨酸受体激酶3融合基因而得名。MASC在病理形态上非完全特异,与诸多唾液腺肿瘤有重叠,所以在病理诊断中经常将其诊断为腺泡细胞癌或黏液表皮样癌等。本文就MASC的临床表现、病理特点、分子生物学特征、鉴别诊断、预后和治疗等研究进展作一综述。

再生障碍性贫血患者骨髓和外周血中FL水平的测定及意义

目的 :测定再生障碍性贫血 (AA)患者骨髓 (BM)和外周血 (PB)中酪氨酸激酶受体 3的配体 (FL)的水平 ,并探讨其意义。方法 :用常规 EL ISA法检测 16例再障患者骨髓和外周血中 FL、s Fas L和 IL - 2的水平。结果 :再障患者骨髓和外周血中 FL 水平显著升高 ,为正常对照的 2 0倍以上 (P<0 .0 1)。再障患者骨髓及外周血中 s Fas L、IL- 2含量也明显高于正常对照组 (P <0 .0 1)。结论 :再障患者骨髓和外周血中 FL、s Fas L、IL - 2含量与患者疾病的严重程度呈负相关。

造血细胞生长因子FL变化在胚胎期造血中的临床意义

目的 检测胎盘绒毛组织及脐血中造血细胞生长因子酪氨酸激酶受体 3(Flt3)配体 (FL )开始出现的时间及其随胎龄增长的含量变化 ,探讨其在胚胎期造血中的意义。方法 分别取妊娠早期 (6～ 8周 )、妊娠中期(16～ 2 2周 )、妊娠晚期 (37～ 4 2周 )胎盘绒毛组织 2 g各 30份、脐血清 30份 ,采用酶联免疫吸附法测定上清液中的 FL 含量。结果 1早期妊娠开始 FL 已产生 ;其含量随着胎龄增加而逐渐增加 ,各胎龄组间比较有显著性差异(P<0 .0 1)。2 FL 在胎盘和脐动静脉血中的含量有显著性差异 (P<0 .0 1)。结论 FL 来源于胎盘 。

CCL25/CCR9与骨髓祖细胞胸腺归巢

在骨髓中多种祖细胞有T细胞系潜能,但骨髓祖细胞胸腺归巢具有选择性.骨髓祖细胞胸腺归巢是多级粘附分子和趋化因子的级联过程,趋化因子CCL25及其受体CCR9在这一过程中发挥了重要作用.综述了CCL25/CCR9的结构特征及其对骨髓祖细胞胸腺归巢的作用和调节机制.

PTEN在癌症中的研究进展

第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)是维持正常细胞生存所必需的肿瘤抑制因子,具有磷酸酯酶活性。PTEN通过调节酪氨酸激酶受体(RTK)/磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB又称Akt)通路调控细胞增殖、细胞凋亡、细胞迁移和侵袭等过程,进而抑制肿瘤的发生发展。PTEN蛋白具有区域特异性功能,可在细胞核和细胞质之间转移。PTEN编码的蛋白的活性受到许多非基因机制的调控,如转录调控、转录后调控、翻译后调控等。人类多种癌症中发现,PTEN的失调可导致其抑癌功能减弱,对于癌症研究有重要意义。PTEN作为PI3K/Akt通路的负调控因子,其缺失使PI3K/Akt通路过度活化,促进肿瘤的发生发展。

ERBB3表达下调对宫颈癌细胞增殖迁移和侵袭的影响

目的探讨erb-b2受体酪氨酸激酶3(ERBB3)在调节癌细胞的迁移和侵袭及其在宫颈癌的发生和进展过程中的作用。方法收集2014年4月—2016年12月期间在本院接受治疗的25例宫颈鳞状细胞癌患者和25例宫颈腺癌患者。通过荧光定量PCR(qRT-PCR)检测了宫颈鳞状细胞癌和子宫颈腺癌患者体内肿瘤组织和癌旁组织中ERBB3 mRNA的表达水平。用siRNA转染宫颈鳞状细胞癌细胞沉默ERBB3的表达后,应用Transwell细胞迁移实验检测细胞迁移和侵袭能力,利用CCK-8检测细胞增殖,应用Western blotting检测MTK-1蛋白的表达变化。结果宫颈鳞状细胞癌和宫颈腺癌患者癌组织中ERBB3 mRNA水平均低于其正常组织(P=0.00,P=0.00)。HPV感染对ERBB3蛋白在宫颈鳞状细胞癌细胞系的表达水平为10.30±0.07(HPV阳性)、7.99±0.75(HPV阴性)和正常宫颈细胞系中的的表达水平为3.02±0.47(HPV阳性)、3.16±0.22(HPV阴性),差异均无统计学意义(P均>0.05)。ERBB3 si RNA沉默后宫颈鳞状细胞癌细胞SiHa和C33A的增殖(0.20±0.10,0.16±0.08)、迁移(64.87±0.26,55.02±0.06)和侵袭(49.99±0.06,62.80±0.19)能力显著低于正常宫颈细胞系中SiHa和C33A的增殖(0.86±0.49,0.60±0.34)、迁移(99.99±0.31,100.07±0.23)和侵袭(99.89±0.35,99.89±0.14)能力,差异具有统计学意义(P<0.05)。ERBB3通过si RNA沉默后MTK-1蛋白的表达水平也显着降低。结论 ERBB3的下调很可能通过抑制MTK-1的表达来抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭,从而抑制肿瘤的发展。

乳腺分泌性癌的临床病理特征分析

目的探讨乳腺分泌性癌(SCB)的临床病理特征。方法收集3例SCB的临床资料,采用免疫组化SP法检测雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人表皮生长因子受体2(HER-2)、Ki-67、S100、CK5/6、p63、平滑肌肌动蛋白(SMA)、钙调理蛋白(calponin)、巨囊性病液体蛋白15(GCDFP-15)和表皮生长因子受体(EGFR)等的表达情况,采用荧光原位杂交技术检测ETS变异基因6-神经酪氨酸激酶受体3(ETV6-NTRK3)融合基因。结果例1和例2 ER(局灶弱+,约5%),例3 ER(-);例1 PR(局灶弱+,约5%),例2和例3 PR (-);3例均HER-2(-),S100(弥漫强+),CK5/6(+),SMA(-),calponin(-), GCDFP-15(-),EGFR(+)。例1 Ki-67指数为15%,例2为15%,例3为10%。例1大部分肿瘤细胞p63(-)、局灶区域细胞核(+)、局灶区域细胞质(+);例2 p63(-),例3肿瘤细胞p63染色细胞质(+)、部分分泌物阳性着色。3例均成功检测出ETV6-NTRK3融合基因。结论SCB是一种罕见的低级别特殊类型三阴性乳腺癌,具有独特的病理形态学特征,分子遗传学上具有特征性t(12;15)(p13;q25)平衡易位,产生ETV6-NTRK3融合基因,临床过程惰性,预后好。