大肠癌血管内皮生长因子-C及酪氨酸激酶受体-4的表达与淋巴管生成及其转移的关系

①目的探讨血管内皮生长因子-C(VEGF-C)及酪氨酸激酶受体-4(Flt-4)在大肠癌中的表达及其对大肠癌淋巴管生成及淋巴结转移中的作用。②方法以80例大肠癌标本作为研究对象,另15例大肠黏膜作为对照,采用流式细胞术分析,分别检测VEGF-C和Flt-4的表达在不同指标及临床病理特征之间的关系。③结果大肠癌组织中VEGF-C及Flt-4的表达量高于正常黏膜,VEGF-C及Flt-4在大肠癌中的表达都与分化程度、Dukes分期及淋巴结转移有关,且二者呈正相关。④结论VEGF-C可能在大肠癌癌变过程中起一定的促进作用,VEGF-C/Flt-4调控系统与大肠癌组织的淋巴管生成及肿瘤细胞的淋巴结转移密切相关。

NRG1/ErbB4通路在七氟醚诱导大鼠认知功能障碍中的作用

目的 探讨神经调节蛋白1(NRG1)/ErbB4通路在七氟醚诱导的大鼠认知功能障碍中的作用。方法 48只SD大鼠随机分为对照组、七氟醚组、七氟醚+NRG1-β1(NRG1类似物,5μg/kg)组、七氟醚+NRG1-β1+AG1478(ErbB4受体阻断剂,2.5微克/只)组,每组12只。大鼠喂养至第14天,Morris水迷宫实验测定各组大鼠认知功能,苏木精-伊红染色(HE)染色观察海马组织神经元状态,原位细胞凋亡法(TUNEL)检测海马组织神经元凋亡情况,酶联免疫吸附(ELISA)法测定海马组织炎症因子表达水平,WB检测海马组织凋亡相关蛋白及NRG1/ErbB4通路相关蛋白表达。结果 与对照组相比,七氟醚组大鼠潜伏期明显增加,穿台次数和目标象限停留时间明显降低,认知功能、海马组织严重受损,海马组织神经细胞凋亡率[七氟醚组(30.17±6.29)%、对照组(3.06±0.63)%]、炎症因子水平及凋亡相关蛋白表达明显增加,NRG1(七氟醚组0.21±0.04、对照组1.03±0.15)、p-ErbB4/ErbB4(七氟醚组0.19±0.03、对照组0.98±0.10)显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与七氟醚组相比,七氟醚+NRG1-β1组大鼠认知功能、海马组织损伤得到缓解,海马组织神经元细胞凋亡率[(12.61±2.61)%比(30.17±6.29)%]、凋亡相关蛋白表达、炎症因子水平显著降低,NRG1(0.79±0.12比0.21±0.04)、p-ErbB4/ErbB4(1.27±0.13比0.19±0.03)显著升高(P<0.05);AG1478逆转了NRG1-β1对七氟醚诱导的大鼠认知功能障碍的减轻作用。结论 NRG1/ErbB4通路在七氟醚诱导大鼠认知功能障碍中发挥重要作用,可能激活NRG1/ErbB4通路以改善大鼠认知功能障碍。

酪氨酸激酶受体B4及其相关配体B2双向信号对血管生成的调节作用及中药应用展望

Eph受体作为受体酪氨酸激酶家族(RTKs)最大的的亚群,在与配体ephrin相互作用中,形成颇具特色的正、负信号通路;尤其是EphB4-ephrinB2双向信号对血管生成的调节作用,为相关领域科研和临床治疗带来了新的希冀。中医药通过活血、祛瘀、理气、化痰、补益等多种治疗手段参与人体机能的调节,对血管生成同样具有促进和阻抑的双向作用。近年来随着国内外对EphB4-ephrinB2双向信号和中医药应用领域探索的进一步深入,中医药对血管生成信号机制调控作用受到越来越多的关注;有研究显示血府逐瘀汤在促内皮细胞ECV304血管新生中上调EphrinB2的基因表达,为中医药研究ephrinB2-EphB4及其双向信号提供了线索。

神经调节蛋白1/erb-b2受体酪氨酸激酶4与癫痫相关性及其遗传易感性研究进展

癫痫是一种病因复杂、反复发作的神经系统疾病,其发作难以预测,约1/3的患者经过抗癫痫治疗无效发展成为药物难治性癫痫。神经调节蛋白1(Neuregulin 1,NRG1)是一种内源性生长因子,erb-b2受体酪氨酸激酶4(erb-b2 receptor tyrosine kinase 4,ErbB4)是其重要受体。NRG1和ErbB4都与神经发育、神经传递和突触可塑性有关。而遗传因素作为内因,在癫痫的发病机制中起到非常重要的作用,因此NRG1和/或ErbB4基因突变可能增加癫痫易感性和加剧癫痫进程。既往研究在NRG1和ErbB4功能以及基因多态性可能导致癫痫风险增加的生物学基础方面取得了令人振奋的进展,文章就相关研究作一综述,以期为NRG1/ErbB4与癫痫相关基础研究提供方向。

与翼状胬肉发病和复发相关的蛋白及基因的研究进展

翼状胬肉是一种常见的眼表疾病,当其侵犯角膜时会导致视力受损。翼状胬肉发病率高,且术后极易复发。近年来有大量学者从蛋白和基因的角度开展研究,认为遗传因素在翼状胬肉的发病中具有重要作用。本文对当前发现的与翼状胬肉相关的蛋白和基因进行梳理,发现血管内皮生长因子、缺氧诱导因子、酪氨酸激酶受体4、环氧化酶2、转化生长因子、活性氧调节因子、细胞增殖因子、细胞凋亡因子等蛋白和基因与翼状胬肉的发病和复发具有相关性,并简要阐述上述蛋白和基因影响翼状胬肉发病与复发的内在机制,发现将它们作为干预靶点可有效降低发病率及术后的复发率。本研究为精准医学干预在翼状胬肉治疗中提供一定的参考。

木犀草素对视网膜缺血-再灌注损伤(RIRI)大鼠TLR4/Syk/NF-κB信号通路及视网膜的影响

目的探讨木犀草素对视网膜缺血-再灌注损伤(RIRI)大鼠Toll样受体4(TLR4)/脾脏酪氨酸激酶(Syk)/核因子-κB(NF-κB)信号通路及视网膜的影响。方法40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、木犀草素低剂量组(5 mg·kg^(-1))、木犀草素高剂量组(10 mg·kg^(-1)),每组10只,除对照组外,其余各组大鼠制备RIRI模型,造模成功后分别进行腹腔注射不同试剂处理,每天1次,持续7 d。各组大鼠给药结束后24 h行光学相干断层扫描(OCT)检查,测量视盘周围视网膜厚度;取各组大鼠视网膜行HE染色观察视网膜组织病理形态、行TUNEL染色观察视网膜组织细胞凋亡情况;行酶联免疫吸附试验(ELISA)测定各组大鼠视网膜中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)水平,并检测大鼠视网膜中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;利用Western blot检测各组大鼠视网膜TLR4/Syk/NF-κB信号通路相关蛋白表达水平。结果与对照组相比,模型组大鼠视网膜出现水肿、空泡变性及凋亡等损伤,视网膜厚度(156.31±18.76)μm、视网膜神经节细胞数(66.25±15.18)个·mm-1、SOD活性(50.33±1.98)U·mg^(-1)均显著降低(均为P<0.05),视网膜细胞凋亡率(21.36±2.04)%、视网膜中MDA(1.82±0.14)μmol·g^(-1)、TNF-α(98.42±11.25)g·L^(-1)、IL-6(87.34±7.62)g·L^(-1)含量及TLR4、p-Syk/Syk、p-NF-κB/NF-κB蛋白相对表达水平均显著升高(均为P<0.05)。与模型组相比,木犀草素低剂量组、木犀草素高剂量组大鼠视网膜水肿等损伤程度逐渐减轻,视网膜厚度(170.62±12.46)μm、(183.54±13.75)μm、视网膜神经节细胞数(86.74±16.21)个·mm-1、(105.44±14.23)个·mm-1、SOD活性(65.26±2.64)U·mg^(-1)、(73.48±3.13)U·mg^(-1)均依次增加(均为P<0.05),视网膜细胞凋亡率(16.75±1.55)%、(9.65±1.23)%、视网膜中MDA(1.23±0.12)μmol·g^(-1)、(0.86±0.09)μmol·g^(-1)、TNF-α(61.48±8.37)g·L^(-1)、(36.83±8.49)g·L^(-1)、IL-6(55.47±6.12)g·L^(-1)、(38.71±3.85)g·L^(-1)含量及TLR4、p-Syk/Syk、p-NF-κB/NF-κB蛋白相对表达水平均依次降低(均为P<0.05)。结论木犀草素可抑制RIRI大鼠TLR4/Syk/NF-κB信号激活,减轻视网膜组织氧化应激及炎症损伤,进一步减轻视网膜损伤。

HCC病灶EphB4表达水平与超声造影灌注参数的相关性

背景原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)作为一种富血供肿瘤,其血流灌注变化贯穿于肿瘤的整个病理学过程.超声造影(contrast-enhanced ultrasound,CEUS)通过分析肿瘤组织的血流灌注变化,能客观反映其血管生成状态,继而间接反映其病理生物学特征,有着重要临床意义.目的探讨超声造影灌注参数与原发性肝细胞癌酪氨酸蛋白激酶受体B4(ephrin type-B receptor 4,EphB4)表达水平的相关性.方法选取在我院行手术切除治疗的52例HCC患者作为研究对象.所有患者术前1周内行CEUS检查,测定肝癌组织以及癌旁组织的血流灌注参数:峰值强度(maximum intensity,IMAX)、达峰时间(time to peak,TTP)、流出时间(washout time,WT).术后将肝癌组织以及癌旁组织标本送病理检测,测定各组织EphB4表达水平及微血管密度(microvessel density,MVD).结果肝癌组织IMAX明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);肝癌组织TTP、WT明显短于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);肝癌组织EphB4表达水平及MVD明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);肝癌组织EphB4表达水平与IMAX呈正相关(r=0.862,P<0.05),与TTP、WT呈负相关(r=-0.765,r=-0.781,均P<0.05).结论CEUS能定量评估HCC微循环血流状态,其灌注参数与EphB4表达水平有一定相关性,可为临床无创性评估EphB4表达水平提供参考.

人参皂苷Rg3抑制人膀胱癌细胞增殖作用的研究

目的:探讨人参皂苷Rg3对人膀胱癌细胞增殖作用的影响及作用机制。方法:采用人膀胱癌T24细胞株进行细胞培养,将人参皂苷Rg3分别以0,5,10,20和40μmol·L^(1-)的剂量处理细胞24 h后,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法检测人参皂苷Rg3对人膀胱癌T24细胞增殖的抑制作用,倒置显微镜和流式细胞术观察人参皂苷Rg3对T24细胞凋亡的诱导作用,应用RT-PCR和Western blot方法检测不同浓度人参皂苷Rg3处理后T24细胞中EphB4 mRNA及其蛋白的表达情况。结果:人参皂苷Rg3对膀胱癌T24细胞具有较强的抑制作用,且这种抑制作用随浓度和时间增加而增大,呈浓度依赖关系(P<0.05)。不同浓度人参皂苷Rg3作用下的膀胱癌T24细胞中,EphB4 mRNA及其蛋白的表达明显减弱,且呈剂量梯度下降(P<0.05)。结论:人参皂苷Rg3的抗癌活性与其抑制EphB4表达有关。

人参皂苷Rg3对人前列腺癌细胞EphB4及抗凋亡蛋白bcl-xl表达的影响

目的:研究人参皂苷Rg3对人前列腺癌细胞株PC-3中EphB4及抗凋亡蛋白bcl-xl表达的影响。方法:用浓度为0、5、10、20和40μmol/L的人参皂苷Rg3处理PC-3细胞24 h,然后采用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法检测人参皂苷Rg3对PC-3细胞增殖的抑制作用,用倒置显微镜和流式细胞术观察人参皂苷Rg3对PC-3细胞凋亡的诱导作用,用RT-PCR和Western blot方法检测经不同浓度人参皂苷Rg3处理后PC-3细胞中EphB4和bcl-xl的表达情况。结果:5、10、20和40μmol/L的人参皂苷Rg3对PC-3细胞增殖的抑制率分别为20.93%、31.32%、51.63%、65.43%。5～40μmol/L的人参皂苷Rg3处理细胞呈明显的凋亡形态学改变,40μmol/L人参皂苷Rg3处理PC-3细胞24 h后,凋亡细胞占(12.10±1.2)%,处理组比正常对照组(3.18±2.1)%凋亡明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:不同浓度人参皂苷Rg3处理PC-3细胞24后,EphB4的表达随人参皂苷Rg3浓度的增加而逐渐减弱,而且bcl-xl的表达随人参皂苷Rg3浓度的增加逐渐减弱。

肾癌中原癌基因EphB4及其蛋白表达的研究

目的:研究人肾癌组织中EphB4基因及其蛋白的表达及其在肾癌发生、发展中的作用和临床意义。方法:取液氮保存的原发性肾癌新鲜标本40例,相应癌旁组织(阴性切缘)40例,正常肾脏组织30例,采用半定量逆转录PCR(RT-PCR)和免疫组化SP法检测EphB4基因及其蛋白表达水平,并结合临床病理资料进行分析。结果:EphB4基因在肾癌组织和癌旁组织中都表达,且癌旁表达低于肿瘤表达,差异有统计意义(P<0.05);正常肾脏组织不表达(P<0.01);40例肾癌标本中,25例EphB4蛋白表达阳性,阳性率为62.5%,40癌旁组织中,10例EphB4蛋白表达阳性,阳性率为25.0%;两者有显著差异性(P<0.05)。EphB4蛋白的表达与患者的性别、年龄无关(P>0.05),但与肿瘤浸润深度、肿瘤分化程度、淋巴结转移密切相关(P<0.05)。结论:原癌基因EphB4及其蛋白在人肾癌组织中过度表达,且与肾癌的发生,发展相关,可能成为肾癌预后的侯选标志物之一。