FMS样酪氨酸激酶3配体在急性髓系白血病患者血清中的表达及其临床意义

目的:分析血清FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt3 ligand,Flt3L)在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者中的表达水平及其临床意义。方法:选取2017年10月至2019年1月本院收治的200例AML患者为研究对象,分为初治组(n=124)、缓解组(n=39)和复发组(n=37)。用酶联免疫吸附试验检测入组时血清Flt3L表达水平。对初治组患者进行为期1年的随访,根据生存预后分为存活组(n=96)和死亡组(n=28)。AML患者不良生存预后的影响因素用Cox多因素分析,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析Flt3L预测预后的价值。结果:初治组血清Flt3L质量浓度为(83.09±12.09)pg·ml^(-1),复发组为(91.76±20.23)pg·ml^(-1),均低于缓解组的(133.08±30.24)pg·ml^(-1)(均P<0.001),而初治组与复发组差异有统计学意义(P<0.001)。存活组血清Flt3L质量浓度为(88.07±11.82)pg·ml^(-1),高于死亡组的(78.07±10.09)pg·ml^(-1),但差异无统计学意义(t=1.372,P>0.05)。血清Flt3L(OR=0.897)是AML患者死亡的独立影响因素(P<0.05)。血清Flt3L预测AML患者1年内死亡的ROC曲线下面积(AUC)为0.823(P=0.031);当血清Flt3L截断值为75.08 pg·ml^(-1)时,约登指数最大(0.625),此时血清Flt3L预测AML患者死亡预后的价值最高,灵敏度为84.15%,特异度为79.83%。结论:血清Flt3L对AML患者病情及预后早期评价有一定价值。

Fms样酪氨酸激酶3配体联合CpG和肿瘤抗原治疗肿瘤的研究

背景与目的:Fms样酪氨酸激酶3配体(fms-1ike tyrosine kinase 3 ligand,FLT3-L)、CpG虽可作为免疫调节剂发挥抗肿瘤作用,但单独用于治疗肿瘤效果不佳。本研究旨在探讨FLT3-L+肿瘤抗原+CpG联合应用对肝癌小鼠的治疗效果及机制,并探讨FLT3-L与GM-CSF在肿瘤治疗效果方面的差异。方法:选择小鼠H22肝癌模型为研究对象,分为FLT3-L+CpG组、GM-CSF+CpG组和PBS组。皮下注射给药后,用流式细胞术检测各组小鼠体内免疫细胞激活情况,免疫组化法检测肿瘤组织及局部细胞浸润情况,ELISA法检测小鼠体液免疫激活情况,同时观察各组小鼠生存期的差异,评价各组药物的抗肿瘤效果及可能的作用机制。结果:(1)FLT3-L+CpG组小鼠肿瘤生长明显被抑制,小鼠生存期显著延长,同GM-CSF+CpG组和PBS组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)脾脏淋巴细胞亚群分析显示,FLT3-L+CpG组CD3^+T细胞比例显著上升,CD4^+、CD8^+亚群比例较PBS组与GM-CSF+CpG组均明显上升,CD4^+CD25^+Treg细胞比例明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)肿瘤组织形态学分析显示,FLT3-L+CpG组可见大片的组织坏死和显著的淋巴细胞浸润。(4)肿瘤局部浸润淋巴细胞表型分析显示,FLT3-L+CpG组肿瘤局部NK细胞、DC细胞、CD8^+T细胞明显增加,较各治疗组均有明显变化,与PBS相比差异有统计学意义(P<0.05)。(5)FLT3-L+CDG组与GM-CSF+CpG组小鼠体内细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-12均明显升高(P<0.05)。结论:FLT3-L+肿瘤抗原+CpG联合应用可发挥明显的抗肿瘤作用。此方案可能通过打破肿瘤免疫耐受,激活和增加循环中T细胞,并趋化NK细胞、DC细胞、CD8^+T细胞到肿瘤局部,发挥杀伤肿瘤细胞的作用:同时可活化免疫因子网络,通过细胞免疫和体液免疫共同发挥抗肿瘤作用。

健脾补肾颗粒对CAA患者血清酪氨酸激酶3配体和纤维连接蛋白的影响

目的观察健脾补肾颗粒治疗慢性再生障碍性贫血(CAA)患者的临床疗效及其对血清FMS样酪氨酸激酶-3配体(FL)、纤维连接蛋白(Fn)表达水平的影响。方法分别应用健脾补肾颗粒(试验组)及再障生血片(对照组)治疗CAA患者。采用ELISA检测患者治疗前后外周血清FL和Fn的表达水平。结果试验组总有效率明显高于对照组(P<0.05);CAA患者外周血清FL和Fn均呈高表达状态,治疗后两组均有下降,但以试验组为著(P<0.05)。结论健脾补肾颗粒可能通过降低FL和Fn的表达水平而对CAA起治疗作用。

补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血患者血清酪氨酸激酶-3配体和纤维连接蛋白的影响

目的观察补髓生血颗粒治疗慢性再生障碍性贫血(CAA)的临床疗效及其对血清FMS样酪氨酸激酶-3配体(FMS-like tyrosine kinase3 ligand,FL)、纤维连接蛋白(fibronectin,Fn)表达水平的影响。方法将68例CAA患者分为两组,试验组35例应用补髓生血颗粒治疗,对照组33例使用再障生血片治疗,两组均治疗6个月。采用酶联免疫法检测患者外周血清FL和Fn治疗前后的表达水平。结果试验组和对照组治疗CAA的总有效率分别为74.3%(26/35例)和48.5%(16/33例),两组比较差异有统计学意义(P<0.05);且试验组阳虚型患者疗效〔93.8%(15/16例)〕优于肾阴虚型患者〔57.9%(11/19例)〕(P<0.05)。CAA患者外周血清FL和Fn均呈高表达状态,经治疗后两者均有一定程度下降,且试验组两项指标表达的调整程度皆优于对照组(P<0.05),而肾阳虚型患者血清FL和Fn表达水平较肾阴虚型患者更易得到纠正。结论补髓生血颗粒在临床疗效及改善CAA相关黏附分子FL和Fn表达水平均优于再障生血片,CAA阳虚型患者疗效优于阴虚型患者。

Flt3L、TGF-β1及EGFR与急性髓系白血病患者不良预后的关系

目的探究FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt3L)、转化生长因子β1(TGF-β1)及表皮生长因子受体(EGFR)与急性髓系白血病(AML)患者不良预后的关系。方法选取120例首次确诊AML患者作为观察组,募集同期体检的100例健康志愿者为对照组,比较2组的Flt3L、TGF-β1及EGFR水平。观察组患者出院后随访3~12个月,根据预后情况将患者分为良好组(86例)和不良组(34例),比较2组的临床资料,采用COX模型分析上述指标与患者不良预后的关系,采用受试者工作特征(ROC)曲线探究上述指标对AML患者不良预后的预测效能。结果观察组Flt3L、TGF-β1水平低于对照组,EGFR水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。不同预后AML患者的Flt3L、TGF-β1及EGFR水平比较差异有统计学意义(P<0.05);COX模型分析显示Flt3L、TGF-β1及EGFR水平为AML患者预后不良的独立影响因素(P<0.05)。经ROC曲线分析显示,Flt3L、TGF-β1及EGFR水平预测AML患者预后不良的AUC为0.874、0.838、0.858。结论Flt3L、TGF-β1及EGFR与AML患者不良预后相关。

Flt3配体增强HCV核心-包膜E2融合基因DNA疫苗诱导的细胞免疫应答

建立一种可高效诱导细胞免疫应答 ,对丙型肝炎病毒 (HCV)感染可能起预防和治疗作用的DNA疫苗。将小鼠Flt3配体 (FL)信号肽和胞外段cDNA插入结构优化的HCV核心 包膜E2融合抗原DNA疫苗pST CE2t,构建成pST CE2t FL。将pST CE2t FL转染COS7细胞 ,Westernblot和ELISA检测表明该重组质粒能表达HCV核心 包膜E2融合抗原和可溶性小鼠FL。分别将pST CE2t、pST CE2t FL和空载体pCI neo肌肉注射接种BALB c小鼠 ,检测小鼠的体液和细胞免疫应答。结果表明两种DNA结构均能在小鼠体内诱生细胞和体液免疫应答 ,但pST CE2t诱导的体液免疫应答强于pST CE2t FL ,而后者诱导的细胞免疫应答明显强于前者。FL能明显增强HCV核心 包膜E2融合抗原DNA疫苗诱导的细胞免疫应答 ,对于发展HCV预防和治疗性疫苗有潜在的应用价值。

不同海拔急性髓系白血病患者化疗前后血清及骨髓造血因子表达水平差异研究

背景化疗是急性髓系白血病(AML)患者重要的治疗手段,最常见的毒副作用是骨髓抑制。各类血细胞的发育增殖、分化受到多种造血因子的调控,不同海拔AML患者化疗后造血因子表达水平是否存在差异及其变化规律尚未明确。目的探讨不同海拔AML患者化疗前后骨髓及血清造血因子表达水平是否存在差异及其变化。方法选取2021—2022年青海省人民医院血液科(中海拔地区1501~2500 m)及中国人民解放军空军军医大学西京医院血液科(低海拔地区500~1500 m)首诊初治的28例AML患者(非M3型)为研究对象,根据就诊医院海拔高低将AML患者分为中海拔组(13例)和低海拔组(15例)。采用WHO抗癌药物急性及亚急性毒性反应分级标准评估患者化疗第8、14、28天骨髓抑制分度;采用酶联免疫吸附法对两组患者化疗前、化疗第8天、化疗第28天血清及骨髓促红细胞生成素(EPO)、FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt3-L)、促血小板生成素(TPO)和干扰素γ(IFN-γ)表达水平进行检测并比较。结果化疗第14、28天,低海拔组患者骨髓抑制分度均高于中海拔组(Z=-1.975,P=0.048;Z=-2.049,P=0.040)。化疗第28天,低海拔组血清及骨髓EPO表达水平高于中海拔组(P<0.05);中海拔组化疗第28天血清EPO表达水平低于化疗第8天(P<0.05)。化疗第28天,低海拔组血清及骨髓Flt3-L表达水平均高于中海拔组(P<0.05);两组患者化疗第8天、化疗第28天血清Flt3-L表达水平均高于化疗前,两组患者化疗第28天骨髓Flt3-L表达水平均高于化疗前(P<0.05)。化疗前、化疗第8天、化疗第28天,低海拔组血清TPO表达水平均高于中海拔组(P<0.05);低海拔组患者化疗第8天血清TPO表达水平低于化疗前(P<0.05);化疗第28天,低海拔组骨髓TPO表达水平高于中海拔组(P<0.05);中海拔组化疗第28天骨髓TPO表达水平低于化疗前(P<0.05)。两组患者化疗前后血清及骨髓IFN-γ表达水平组间、组内比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论低海拔AML患者化疗后骨髓抑制恢复期间造血生长因子EPO、Flt3-L、TPO表达水平高于中海拔,造血抑制因子IFN-γ两组间无明显差异;中海拔AML患者化疗后骨髓抑制分度及程度较低海拔更严重。

构建的Flt3L胞外域原核表达载体在大肠杆菌中的表达

目的:构建含组氨酸标签的FMS样酪氨酸激酶3配体(Fms-like tyrosine kinase 3 ligand,Flt3L)胞外域蛋白的原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达。方法:依据Flt3L基因序列设计引物,以RT-PCR的方法从小鼠脾脏总RNA中克隆Flt3L基因并构建其胞外域原核表达载体,测序鉴定后在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中诱导表达,用免疫印迹鉴定。结果:克隆到Flt3L编码区全长序列,经DNA测序证明与已报道的序列相同;构建羧基端带有His6标签的Flt3L胞外域蛋白的原核表达载体,转化大肠杆菌后SDS-PAGE分析显示在BL21(ED3)中获得较高表达;免疫印迹分析表明IPTG诱导后表达的Flt3L胞外域蛋白的相对分子质量(Mr)为19 000,与理论值相符,此蛋白与抗His6标签的抗体发生特异性反应。结论:成功克隆Flt3L基因,构建其胞外域蛋白的原核表达载体,并在大肠杆菌中获得表达。

血清Flt3L和Gas6水平对非霍奇金淋巴瘤患者利妥昔单抗化疗后肺部感染预测价值分析

目的探讨血清FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt3L)和生长停滞特异性蛋白6(Gas6)水平对非霍奇金淋巴瘤患者利妥昔单抗化疗后肺部感染的诊断价值。方法选取2019年7月至2021年7月在海南医学院第一附属医院血液内科收治的116例非霍奇金淋巴瘤患者作为研究对象,根据利妥昔单抗化疗后是否发生肺部感染分为肺部感染组48例、非肺部感染组29例以及未感染组39例。对比三组患者一般资料情况以及实验室指标水平,Logistic回归分析化疗后发生肺部感染的危险因素,ROC曲线分析其危险因素对患者化疗后发生肺部感染的预测价值。结果三组肺部疾病史、血清Flt3L、Gas6水平比较:肺感染组>非肺部感染组>未感染组,差异有统计学意义(P<0.05),Logistic回归分析显示,血清Flt3L、Gas6水平升高是患者化疗后发生肺部感染的独立危险因素(P<0.05),ROC曲线图结果显示,血清Flt3L、Gas6水平联合预测非霍奇金淋巴瘤患者利妥昔单抗化疗后肺部感染的曲线下面积(AUC)为0.879,高于单一检测(P<0.05)。结论非霍奇金淋巴瘤患者血清Flt3L和Gas6水平升高是利妥昔单抗化疗后发生肺部感染的独立危险因素,早期联合检测血清Flt3L和Gas6水平有利于预测患者化疗后感染情况和病情判断。

缺铁性贫血患儿Flt-3L、TF、25(OH)D检测的临床意义

目的探讨FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt-3L)、转铁蛋白(TF)、25-羟基维生素D[25(OH)D]对婴幼儿缺铁性贫血的辅助诊断价值。方法选取缺铁性贫血患儿128例(缺铁性贫血组)、非缺铁性贫血患儿68例(非缺铁性贫血组)、体检健康婴幼儿100名(正常对照组)。检测所有对象血红蛋白(Hb)、红细胞平均体积(MCV)、红细胞平均血红蛋白含量(MCH)、红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)、Flt-3L、TF、25(OH)D和血清铁(SI)水平。根据病情严重程度将缺铁性贫血患儿分为轻度贫血组(61例)、中度贫血组(55例)、重度贫血组(12例)。采用Logistic回归分析评估婴幼儿发生缺铁性贫血的危险因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价各项指标辅助诊断婴幼儿缺铁性贫血的效能。结果缺铁性贫血组和非缺铁性贫血组Hb、MCV、MCH、MCHC均低于正常对照组(P<0.05)。缺铁性贫血组血清Flt-3L、TF水平均高于正常对照组和非缺铁性贫血组(P<0.05),SI、25(OH)D水平均低于正常对照组和非缺铁性贫血组(P<0.05)。Flt-3L、TF水平随缺铁性贫血程度的加重而升高(P<0.05);Hb、MCV、MCH、MCHC、25(OH)D、SI水平均随缺铁性贫血程度的加重而降低(P<0.05)。血清Flt-3L、TF、25(OH)D均是婴幼儿发生缺铁性贫血的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,Flt-3L、TF、25(OH)D联合检测诊断缺铁性贫血的曲线下面积(AUC)为0.983,鉴别诊断缺铁性贫血和非缺铁性贫血的AUC为0.981。结论Flt-3L、TF、25(OH)D对婴幼儿缺铁性贫血有较高的辅助诊断价值,且与贫血的严重程度有关。

MIP-1α和Flt3l基因佐剂联合应用对HPV16E7 DNA疫苗的免疫增强作用

目的:探讨巨噬细胞炎性蛋白1α(Macrophage inflammatory protein-1α,MIP-1α)和酪氨酸激酶受体3配体(Flt3ligand,Flt3l)基因佐剂联合应用增强人乳头瘤病毒16型(Human papillomavirus16,HPV16)E7DNA疫苗免疫效果的可能性。方法:构建真核表达质粒pcDNA3/MIP-1α、pcDNA3/Flt3l和pcDNA3/HPV16E7。C57BL/6小鼠随机分为8组,分别为pcDNA3组、pcDNA3/MIP-1α组、pcDNA3/Flt3l组、pcDNA3/MIP-1α和pcDNA3/Flt3l混合组、pcDNA3/HPV16E7组、pcDNA3/MIP-1α和pcDNA3/HPV16E7混合组、pcDNA3/Flt3l和pcDNA3/HPV16E7混合组以及pcDNA3/MIP-1α、pcDNA3/Flt3l和pcDNA3/HPV16E7混合组。每组14只,肌肉注射质粒免疫小鼠,每3周免疫1次,共3次;末次免疫后2周每组随机抽取6只小鼠,取脾脏制备淋巴细胞悬液,用CCK-8试剂盒检测其对TC-1靶细胞的特异性杀伤能力。其余小鼠在腹股沟处皮下注射5×104个TC-1细胞,观察肿瘤生长情况。结果:成功构建了真核表达质粒pcDNA3/MIP-1α、pcDNA3/Flt3l和pcDNA3/HPV16E7;pcDNA3/MIP-1α、pcDNA3/Flt3l和pcDNA3/HPV16E7混合组的CTL杀伤能力明显高于其它各组(P<0.01);肿瘤细胞攻击后16天,pcDNA3组小鼠全部长出肿瘤,而pcDNA3/MIP-1α、pcDNA3/Flt3l和pcDNA3/HPV16E7混合组的成瘤率仅为12.5%,明显低于其他组,统计学分析示8组之间成瘤率差异有显著性(P=0.007)。60天后各组成瘤率之间的差异无统计学意义(P=0.229)。结论:联合应用MIP-1α和Flt3l基因佐剂增强了HPV16E7DNA疫苗的免疫效果,一定程度上延缓了肿瘤的发生。

^(60)Coγ射线全身照射后大鼠血浆中GDF-15、Flt-3L和SAA表达的剂量相关性研究

目的:探讨钴60(^(60)Co)γ射线照射对SD大鼠血浆中Fms样酪氨酸激酶3配体(Flt-3L)、血清淀粉样蛋白A(SAA)和生长分化因子-15(GDF-15)蛋白表达情况的影响。方法:将72只SD大鼠按照不同照射剂量分为0 Gy组、1 Gy组、3 Gy组和5 Gy组,每组18只,采用^(60)Coγ射线照射大鼠,剂量率为1 Gy/min。照射后1 d、3 d和5 d采集4组大鼠外周血,通过酶链免疫吸附试验(ELISA)检测血浆中的Flt-3L、SAA和GDF-15蛋白表达水平。结果:SD大鼠血浆中的Flt-3L和GDF-15蛋白在照射后表达升高,升高的水平与辐射剂量相关。3 Gy组和5 Gy组血浆中的GDF-15蛋白在照射后1 d、3 d和5 d与0 Gy组相比表达均增高,差异有统计学意义(t=3.09,t=6.32,t=8.91,t=10.71,t=2.73,t=6.64;P<0.05);5 Gy组血浆中的Flt-3L蛋白在照后1 d、3 d和5 d与0Gy组相比表达均增高,差异有统计学意义(t=4.22,t=8.48,t=5.51;P<0.05);3 Gy组Flt-3L蛋白只在照后1 d和5 d表达增高,差异有统计学意义(t=5.79,t=3.69;P<0.05);GDF-15蛋白水平在照射后1 d的剂量-效应关系(R^2=0.936,P<0.05)优于照射后3 d和5 d(R^2=0.913,R^2=0.887;P<0.05);Flt-3L蛋白正相反,其在照射后5 d的剂量-效应关系最好(R^2=0.965,P<0.05);SAA只有在照射后1 d有随剂量升高表达增加的趋势。结论:血浆中的Flt-3L和GDF-15蛋白在全身照射的大鼠血浆中特定时间点呈现出比较良好的剂量-效应关系。

苦玄参提取物减轻烧伤脓毒症模型小鼠T细胞功能障碍的机制研究

目的探讨苦玄参提取物(PFE)通过调节酪氨酸激酶-3配体(Flt3L)对烧伤脓毒症模型小鼠T细胞功能的调控作用。方法研究于2022年7月至2023年4月在安康市中医医院动物实验中心进行。按照随机数字表法将72只SPF雄性C57小鼠[体质量为21~25(22±2)g,10周龄]分为6组,烧伤组、模型组和PFE低、中、高剂量组及阳性组。PFE低、中、高剂量组模型制备结束后次日分别灌胃0.5 g/kg、1.0 g/kg、2.0 g/kg PFE,连续给药1周;阳性组:模型制备结束后次日,皮下注射10μg Flt3L,连续注射9 d。给药结束后1、3、5 d分别检测背部皮肤荧光强度;给药后检测血清白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平、外周血T淋巴细胞增殖活性、脾脏T淋巴亚群变化、皮下、肺、脾脏组织病理学变化及IL-2、IL-4、干扰素-γ(IFN-γ)、Flt3L蛋白表达水平。统计学方法采用单因素方差分析和SNK-q检验。结果模型组创面细菌荧光强度、IL-6[(59.44±5.41)μg/L比(23.47±3.29)μg/L]、IL-1β[(80.47±6.83)μg/L比(32.74±4.36)μg/L]、TNF-α[(12.33±1.15)μg/L比(4.76±0.97)μg/L]水平、创面组织、肺组织、脾组织病理评分、IL-2、IL-4、IFN-γ蛋白表达、CD8^(+)T细胞比例[(65.33±5.68)%比(26.72±6.75)%]均高于烧伤组,T淋巴细胞增殖活性、CD3^(+)T细胞比例[(34.55±3.29)%比(64.49±9.33)%]、CD4^(+)T细胞比例[(16.71±3.49)%比(48.18±7.36)%]、CD4^(+)/CD8^(+)[(0.26±0.06)比(1.81±0.35)]均低于烧伤组(均P<0.05)。与模型组相比,PFE低、中、高剂量组、阳性组创面细菌荧光强度较弱;IL-6、IL-1β、TNF-α水平、创面组织、肺组织、脾组织病理评分、IL-2、IL-4、IFN-γ蛋白表达、CD8^(+)T细胞比例均低于模型组,T淋巴细胞增殖活性、CD3^(+)T、CD4^(+)T、CD4^(+)/CD8^(+)均高于模型组,具有剂量依赖性(均P<0.05)。结论PFE可降低感染创面细菌含量,降低炎症反应以及器官损伤,其机制可能与上调Flt3L、促进T淋巴细胞活性缓解免疫抑制有关。

弥漫大B细胞淋巴瘤并乙型肝炎病毒感染血清sIL-2r、Flt3L、cTfh水平及与预后的关系

目的探讨弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)并乙型肝炎病毒(HBV)感染患者血清可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2r)、Fms相关酪氨酸激酶3配体(Flt3L)、循环辅助T细胞(cTfh)水平及与预后的关系.方法选取2019年3月-2022年3月在新乡医学院第一附属医院收治的60例DLBCL并HBV感染患者为合并HBV组,选取同期收治的60例DLBCL未合并HBV感染患者为未合并HBV组,均在治疗前检测血清sIL-2r、Flt3L、cTfh水平.另选取30名健康志愿者为健康对照组.比较各组间指标水平差异.比较两组患者1年生存差异.利用受试者工作特征(ROC)曲线和多因素COX分析各指标与DLBCL并HBV感染患者预后关系.结果DLBCL患者血清sIL-2r、Flt3L、cTfh水平均高于健康对照组(P<0.05);合并HBV组血清sIL-2r、cTfh、Flt3L水平均高于未合并HBV组(P<0.05).合并HBV组无进展生存率、总生存率均低于未合并HBV组(P<0.05).ROC分析结果显示,sIL-2r、Flt3L、cTfh均具有预测DLBCL并HBV患者的预后价值(P<0.05).多因素COX分析结果显示,淋巴瘤分期(AnnArbor)、非霍奇金淋巴瘤预后(IPI)评分、sIL-2r、Flt3L、cTfh是影响患者预后的危险因素(P<0.05).结论HBV感染可影响DLBCL患者预后,DLBCL并HBV感染患者血清sIL-2r、Flt3L、cTfh高表达,具有预测预后的价值,且Flt3L是影响预后的危险因素.

重组质粒pVAX1-HER2-Flt3L构建及抗肿瘤效果

[目的]将具有免疫增效功能的Flt3L分子与HER2抗原融合表达,评价Flt3L是否能够提高抑瘤效果。[方法]将人的HER2编码区基因和小鼠Flt3L编码区基因用Furin/2A进行连接,全基因合成后,克隆至pVAX1载体,从而构建重组质粒pVAX1-HER2-Flt3L,同时构建对照质粒pVAX1-HER2和pVAX1-Flt3L。将上述质粒分别注射正常小鼠和稳定表达HER2抗原的荷瘤小鼠,评价其免疫原性和抑瘤效果。[结果]将各组重组质粒接种于Bal B/c小鼠后,抗体检测结果显示:重组融合质粒pVAX1-HER2-Flt3L组诱导产生的平均抗体滴度为2060,而单纯抗原质粒pVAX1-HER2组诱导产生的平均抗体滴度为1720;ELISPOT检测结果显示:重组融合质粒pVAX1-HER2-Flt3L组诱导产生的平均斑点数为133,而单纯抗原质粒pVAX1-HER2组诱导产生的平均抗体滴度为110;与此一致的是,在荷瘤小鼠中,该融合质粒也显示出更加显著的抑制肿瘤生长的效果,达到47%,而单纯抗原质粒仅为32%。[结论]Flt3L具有一定的免疫增效能力,能够显著提高表达HER2抗原重组质粒的抑瘤效果,深入研究其免疫保护机制具有潜在的临床意义。