酪氨酸激酶Jak3抑制剂的研究进展

Jak3抑制剂对器官移植以及自身性免疫疾病的治疗有着非常重要的意义。本文根据Jak3抑制剂的化学结构,将其分为WHI系列化合物、CP690550衍生物及其他Jak3抑制剂等3类,并对其作用机制、构效关系及生物活性进行综述,指出提高化合物对Jak3作用的选择性是新的Jak3抑制剂的研究重点和难点。

胃癌患者JAK3表达的研究

目的探讨胃癌患者JAK3的表达与胃癌发病的关系。方法采用荧光定量逆转录聚合酶链反应检测33例胃癌患者胃癌组织及其相应切缘组织中JAK3mRNA的表达,并分析JAK3mRNA在胃癌中的表达水平与癌胚抗原(CEA)之间的关系。结果①胃癌及其相应切缘组织中均有JAK3的表达,胃癌中的JAK3mRNA表达(6.27±0.89)极显著高于其相应切缘组织中的表达(0.93±0.18),P<0.01。②CEA阳性的胃癌患者胃癌组织中JAK3mRNA的表达水平较CEA阴性的胃癌患者高(P<0.05)。结论正常胃组织及胃癌组织均存在JAK3,JAK3的高表达在胃癌发病机制中有着重要意义。

转基因JAK3体外长期扩增T淋巴祖细胞的实验研究

目的探讨激活JAK3信号传导通路是否能够体外长期扩增调控T淋巴祖细胞并评价其定向分化潜能的可行性。方法构建含有JAK3基因的逆转录病毒载体MG I-F2JAK3,内含有绿色荧光蛋白(GFP)和两个可以结合小分子二聚化合物AP20187的结合位点F36v。将该载体转入小鼠的骨髓造血干细胞中,在无血清培养基X-V ivo15培养体系中扩增,分为4组:空白对照组;AP20187组;干细胞因子(SCF)组;AP20187+SCF组。对扩增的细胞进行流式细胞仪检测免疫分型,定向分化、胸腺内注射等研究。结果AP20187+SCF组可以使转导的造血细胞获得长期大量对数级的扩增,扩增50 d后细胞可以达到1.2×1012倍±0.2×1012倍,所扩增的细胞为最早期的T淋巴祖细胞,表型为C-k ith iCD44+CD25-TN。该祖细胞群在SCF+IL-7+IL-3培养条件下,可定向分化为Thy1.2阳性的T淋巴细胞,并在小鼠的胸腺内可定向分化为GFP+CD3+和GFP+CD4+双阳性的成熟T淋巴细胞。结论AP20187联合SCF激活JAK3信号,可以大量扩增最早期的T淋巴祖细胞。该祖细胞具有定向分化为成熟T淋巴细胞的功能。该系统有助于研究T淋巴细胞的发生发育。

桂枝芍药知母汤对胶原诱导性关节炎小鼠软骨破坏及JAK2/STAT3信号通路的影响

目的:研究桂枝芍药知母汤在胶原诱导性关节炎(CIA)小鼠软骨破坏中的作用及其作用机制。方法:取SPF级DBA/1小鼠36只,随机分组为正常组、模型组、甲氨蝶呤组(MTX)、桂枝芍药知母汤低、中、高剂量组6组。除正常组外,其余5组小鼠采用二次免疫法构建CIA模型,并在小鼠开始出现后肢肿胀当天分别予生理盐水,MTX(1.5 mg·kg^(-1),每周2次)和桂枝芍药知母汤低、中、高剂量(6.3、12.6、25.2 g·kg^(-1)·d^(-1))灌胃,共给药4周。观察并记录各组小鼠足肿胀度变化,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、MMP-3、MMP-9、MMP-13含量,苏木素-伊红(HE)染色观察踝关节病理改变,番红固绿染色法观察软骨破坏,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠踝关节酪氨酸激酶2(JAK2)/转录激活因子3(STAT3)信号通路蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组足肿胀度,血清MMP-1、MMP-3、MMP-9和MMP-13含量和踝关节磷酸化(p)-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3的表达水平均显著上升(P<0.01),关节破坏加重。与模型组比较,MTX组和桂枝芍药知母汤低、中、高剂量组明显减轻小鼠足肿胀度(P<0.05,P<0.01),明显降低小鼠血清MMP-1、MMP-3、MMP-9和MMP-13含量(P<0.05,P<0.01),关节病理破坏减轻,明显降低踝关节p-JAK2/JAK2和p-STAT3/STAT3的表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论:桂枝芍药知母汤能减轻CIA小鼠的关节肿胀程度,抑制MMP-1、MMP-3、MMP-9和MMP-13的表达,改善关节软骨破坏,其作用机制与JAK2/STAT3信号通路有关。