过氧亚硝基阴离子调控谷氨酸脱氢酶的催化功能

目的：观察过氧亚硝基阴离子（ONOO-）对谷氨酸脱氢酶（GDH）的硝基化修饰及功能调控.方法：GDH与ONOO-体外反应,测定酶活性及别构调节效应,Western Blot检测GDH硝基化修饰;制备含＂去硝基化酶＂的脾脏蛋白,观察能否逆转ONOO-作用.结果：4-12μmol/L ONOO-不影响GDH活性和二磷酸腺苷（ADP）别构激活作用,但使三磷酸鸟苷（GTP,10μmol/L）别构抑制作用由（49±4）%降低至（69±7）%和（75±3）%;36-108μmol/L ONOO-使GDH活性由（0.81±0.05）kat/kg降低至（0.55±0.06）和（0.29±0.07）kat/kg,使GTP（10μmol/L）别构抑制作用降低至（83±4）%和（95±7）%;324μmol/L ONOO-使GDH完全失活.Western Blot检测到ONOO-使GDH发生硝基化修饰.脾脏蛋白可部分逆转上述作用.结论：ONOO-可通过硝基化修饰调控GDH催化功能.