脂肪非典型钙黏蛋白4及O型蛋白酪氨酸磷酸酶受体与胃癌预后的关系研究

目的分析脂肪非典型钙黏蛋白4(FAT4)及O型蛋白酪氨酸磷酸酶受体(PTPRO)与胃癌预后的关系。方法收集112例胃癌患者的胃癌组织及正常胃组织(距肿瘤≥5 cm),对比不同组织中FAT4及PTPRO表达情况,分析影响胃癌预后的危险因素。结果正常胃组织中FAT4及PTPRO阳性表达率均高于胃癌组织,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。预后良好与预后不良患者TNM分期、分化程度、淋巴结转移情况、FAT4表达情况、PTPRO表达情况比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。非条件多因素Logistic回归模型分析显示,TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期、分化程度为低分化、淋巴结转移、FAT4阴性、PTPRO阴性均是胃癌患者预后不良的独立危险因素(P﹤0.05)。结论FAT4、PTPRO在胃癌组织中表达下调,为影响预后的独立危险因素,与预后密切相关。

PTPRO通过减少STAT3磷酸化抑制黑色素瘤的恶性行为

目的探讨酪氨酸磷酸酶O型变体(PTPRO)对黑色素瘤恶性行为的抑制作用及可能机制。方法应用针对人PTPRO基因启动子区的小激活RNA过表达黑色素瘤B16-F10细胞中的PTPRO,利用CCK8、平板克隆形成实验、划痕愈合实验、Trannswell小室迁移和侵袭实验分别检测激活PTPRO后黑色素瘤B16-F10细胞的存活、增殖、迁移和侵袭能力的改变。并用Western blot检测STAT3和磷酸化的STAT3的表达变化。结果PTPRO-saRNA组显著抑制黑色素瘤B16-F10细胞的活力(P<0.01)、克隆形成能力(P<0.01)、划痕愈合能力(P<0.01)、迁移和侵袭能力(P<0.01);而且,过表达PTPRO减少STAT3蛋白的磷酸化。结论过表达PTPRO通过减少STAT3的磷酸化抑制皮肤黑色素瘤的恶性行为。

受体O型蛋白酪氨酸磷酸酶的分子生物学研究概述

细胞增殖、分化、黏附、侵袭等生物学行为的调控很大程度上依赖于细胞内各种蛋白激酶的磷酸化活化级联反应。蛋白酪氨酸激酶（protein tyrosine kinase,PTK）表达或活性改变能够影响细胞增殖、黏附、侵袭等,并促进正常细胞向恶性转化[1]。蛋白酪氨酸磷酸酶（protein tyrosine phosphatases,PTPs）的作用与PTK相反。

酪氨酸磷酸酶Z1型受体、环氧合酶-2、人端粒酶逆转录酶在口腔黏膜下纤维性变癌变中的表达及相关性研究

目的:探究酪氨酸磷酸酶Z1型受体(PTPRZ1)、环氧合酶-2(COX-2)、人端粒酶逆转录酶(hTERT)在口腔黏膜下纤维性变(oral submucosal fibrosis,OSF)癌变中的表达及相关性。方法:采集2018年6月-2019年6月于我院接受治疗的OSF癌变患者OSF癌变组织30例,作为本文研究OSF癌变组;采集2018年6月-2019年6月于我院接受治疗的OSF患者OSF组织30例,作为本文研究OSF组;同时选取无槟榔、烟酒嗜好、正常口腔粘膜组织30例作为本文研究正常组。Western blot法检测PTPRZ1、hTERT相对表达量,酶联免疫吸附法检测COX-2表达,对待测标本进行免疫组化染色,并对PTPRZ1、COX-2、hTERT在OSF癌变中的相关性进行分析。结果:OSF组PTPRZ1、COX-2、hTERT相对表达量均高于正常组(P<0.05);OSF癌变组PTPRZ1、COX-2、hTERT相对表达量均高于正常组、OSF组(P<0.05)。低分化OSF癌变组织中PTPRZ1、COX-2、hTERT相对表达量均高于高分化、中分化OSF癌变组织(P<0.05)。Ⅳ期OSF癌变组织中PTPRZ1、COX-2、hTERT相对表达量均高于Ⅱ期、Ⅲ期OSF癌变组织(P<0.05)。OSF癌变组织中PTPRZ1、COX-2、hTERT相对表达量呈正相关。结论:PTPRZ1、COX-2、hTERT在OSF癌变中呈异常高表达,低分化、病理分期较高的OSF癌变中PTPRZ1、COX-2、hTERT表达较高,并且PTPRZ1、COX-2、hTERT在OSF癌变中表达呈正相关。

基于TGF-β/Smad信号通路调控PTPRZ1对口腔黏膜下纤维性变的干预效果

目的 基于转化生长因子(TGF)-β/Smad信号通路调控酪氨酸磷酸酶Z1型受体(PTPRZ1)对口腔黏膜下纤维性变的干预效果。方法 选取65只大鼠,10只为空白组,其余55只建立口腔黏膜下纤维性变模型,最终有45只建模成功,分为模型组、上调组(转染10μl PTPRZ1过表达慢病毒悬液)、下调组(转染10μl PTPRZ1沉默慢病毒悬液)各15只,7 d后观察大鼠变化。结果 与空白组相比,模型组、下调组、上调组PTPRZ1表达量、颊黏膜评分、Ⅰ、Ⅲ型胶原水平及TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA和蛋白表达量明显上升,张口度水平明显下降(P<0.05);与模型组相比,上调组PTPRZ1表达量、颊黏膜评分、Ⅰ、Ⅲ型胶原水平、TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA及蛋白表达量明显上升,张口度水平明显下降(P<0.05);下调组PTPRZ1表达量、颊黏膜评分、Ⅰ、Ⅲ型胶原水平、TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA及蛋白表达量明显下降,张口度水平明显上升(P<0.05);与上调组相比,下调组PTPRZ1表达量、颊黏膜评分、Ⅰ、Ⅲ型胶原水平、TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA及蛋白表达量明显下降,张口度水平明显上升(P<0.05)。结论 下调PTPRZ1可改善口腔黏膜下纤维性变大鼠临床症状,调节胶原水平,其机制可能与TGF-β/Smad信号通路被抑制有关。

去甲斑蝥素对食管癌细胞株Eca-109中hTERT的表达和PTPRO基因启动子甲基化影响的实验研究

目的探索去甲斑蝥素(NCTD)诱导食管癌细胞Eca-109对人端粒酶逆转录酶(hT ERT)表达和受体O型蛋白酪氨酸磷酸酶(PTPRO)基因启动子甲基化的影响。方法 MTT比色法检测不同浓度(0、1、2、4、8、16μg/ml)NCTD及不同作用时间(12、24 h)对食管癌细胞Eca-109增殖的影响;TUNEL法配合激光共聚焦扫描显微镜检测NCTD+Eca-109组(实验组)和Eca-109组(对照组)细胞凋亡情况;甲基化特异性PCR(MSP)检测实验组和对照组中PTPRO基因启动子的甲基化状态,Western blotting检测实验组和对照组hT ERT蛋白的表达。结果 MTT检测显示,NCTD可抑制Eca-109细胞增殖,呈时间和浓度依赖性,不同作用时间和浓度的细胞增殖抑制率的差异有统计学意义(P<0.05);TUNEL法结合激光共聚焦扫描显微镜观察显示,实验组细胞内部结构发生剧烈的变化,较对照组细胞核染色质致密浓染,核形缩小;MSP检测显示,对照组PTPRO基因启动子发生明显甲基化;Western blotting检测显示,实验组hT ERT蛋白表达较对照组明显降低(P<0.05)。结论NCTD对食管癌细胞Eca-109有细胞毒性,能够抑制细胞生长,其机制可能与下调hT ERT蛋白表达和PTPRO基因启动子去甲基化有关。

PTPRO对妊娠期肝内胆汁淤积症患者Th1/Th2细胞偏倚的影响

目的探讨受体O型蛋白酪氨酸磷酸酶(PTPRO)对妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者Th1/Th2细胞偏倚的影响。方法分离获取正常妊娠(A组,30例)、轻型ICP(B组,28例)和重型ICP(C组,30例)孕妇胎盘来源的单核-巨噬细胞,采用RT-PCR和Western blot法分别检测PTPRO mRNA和蛋白的表达,Western blot法检测NF-κB/p65的磷酸化水平。分离获取孕妇外周血T淋巴细胞,与胎盘来源的单核-巨噬细胞共培养,ELISA法检测细胞培养上清液中IFN-γ、IL-12、IL-4和IL-10水平。结果与A组相比,B、C组单核-巨噬细胞PTPRO表达和NF-κB/p65磷酸化水平升高,与其共培养的外周血T淋巴细胞高分泌IFN-γ和IL-12(P<0.05);与B组相比,C组PTPRO表达和NF-κB/p65磷酸化水平升高,IFN-γ和IL-12分泌增多(P<0.05)。结论 ICP患者胎盘单核-巨噬细胞高表达PTPRO,促使T淋巴细胞向Th1细胞偏倚。

PTPRO在妊娠期肝内胆汁淤积症孕妇胎盘组织中的表达及意义

目的通过观察妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)与正常妊娠孕妇的胎盘来源的单核-巨噬细胞中受体O型蛋白酪氨酸磷酸酶(Protein tyrosine phosphatase receptor-type O,PTPRO)的表达情况、细胞因子的分泌及胞内信号分子NF-κB/P65活化水平的变化,探讨PTPRO在妊娠胎盘免疫微环境的平衡维持中的作用。方法选取3组孕妇:正常妊娠(26例)、ICP轻型(24例)及ICP重型孕妇(24例),分离并由密度-梯度离心法获得其胎盘来源的单核-巨噬细胞,ELISA法检测细胞培养上清液中TNF-α、IFN-γ、IL-6的水平;Real-time PCR及Western blot法分别检测PTPRO mRNA、蛋白水平的表达以及NF-κB/P65的磷酸化改变。结果与正常妊娠者相比,ICP孕妇胎盘来源的单核-巨噬细胞高分泌TNF-α、IFN-γ、IL-6(P均<0.01),NF-κB/P65的磷酸化增多,ICP轻型及重型孕妇胎盘来源的单核-巨噬细胞细胞因子PTPRO的表达上调。结论 ICP孕妇胎盘组织内炎性因子浸润,可能与PTPRO、NF-κB/P65的相互调控有关。

作用于2型糖尿病新靶点的天然产物研究进展

2型糖尿病又称非胰岛素依赖型糖尿病,由胰岛素分泌障碍和组织器官对胰岛素抵抗引起。目前2型糖尿病患者占糖尿病人群的90%以上,严重危害人类健康,然而目前临床应用的化学合成降糖药均有不同程度的副作用。因此,从作用温和、毒副作用小的天然植物提取物中,依据不同的靶点筛选和发现治疗2型糖尿病的活性成分,成为国内外学者的研究热点。现已发现的2型糖尿病的新靶点主要包括蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)、二肽基肽酶IV(DPP-IV)、过氧化物酶体增殖活化受体(PPAR)和腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)等。现对天然产物中作用于糖尿病新靶点的活性成分研究进展进行综述,以期为开发治疗2型糖尿病新药提供参考。