小鼠蓝斑内酪氨酸羟化酶阳性神经元向丘脑室旁核投射的形态学研究

目的:观察蓝斑(LC)内酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元向丘脑室旁核(PVT)内速激肽-1(TAC1)阳性神经元的投射,并从形态学上观察该通路是否参与伤害性信息的传递或调控。方法:利用TAC1-ires-Cre与Rosa26:CAG-LSL-tdTomato(Ai9)小鼠杂交,繁育TAC1-ires-Cre::Ai9小鼠,并制备坐骨神经分支损伤(SNI)模型,观察PVT内TAC1阳性神经元与FOS免疫阳性产物的共存情况,以及TAC1/FOS双标神经元与TH阳性轴突终末之间的密切接触。其次在C57BL/6小鼠PVT内注入荧光金(FG),在显微镜下观察LC内TH阳性神经元与FG逆标神经元的共标情况。最后在TAC1-ires-Cre小鼠的PVT注射RV逆行跨单突触三联病毒,观察LC内TH阳性神经元与RV逆标神经元之间的共存情况。结果:在TAC1-ires-Cre::Ai9小鼠脑内,TAC1阳性神经元为红色荧光所标记。SNI模型下PVT内可观察到部分TAC1阳性神经元同时表达FOS蛋白,且与TH阳性轴突终末之间形成密切接触。将FG注射入小鼠PVT后,在LC内可观察到大量的FG逆标神经元,且部分FG标记神经元同时表达TH阳性。利用RV逆行跨单突触示踪病毒,也可在LC内观察到PVT内TAC1阳性神经元的突触前神经元,且大部分突触前神经元为TH阳性。结论:LC内TH阳性神经元可向PVT内TAC1阳性神经元发出投射,形成LC^(TH+)-PVT^(TAC1+)神经通路,该通路可以被伤害性信息激活,提示其可能在痛觉信息的传递或调控过程中发挥一定的作用。

小鼠胚胎干细胞的体外培养及诱导分化成酪氨酸羟化酶阳性神经元

探索小鼠胚胎干细胞 (ES)在体外培养及向酪氨酸羟化酶阳性神经元诱导分化的可能性。将小鼠胚胎干细胞在含有白血病抑制因子 (LIF)的ES培养基中扩增 ,并通过以下几个步骤 :胚胎体的形成、巢蛋白 (Nestin)阳性细胞的筛选、Nestin阳性细胞的体外扩增及撤除碱性成纤维细胞生长因子等后观察向酪氨酸羟化酶阳性神经元的分化。结果表明小鼠胚胎干细胞在含有LIF的特定培养基中能够稳定传代并保持不分化状态 ,经过无血清培养基的筛选和培养 ,在SonicHedgehog(SHH)及成纤维细胞生长因子 (fibroblastgrowthfactor 8,FGF8)等细胞因子的作用下能定向分化成酪氨酸羟化酶阳性神经元。这种方法有望为帕金森病等神经变性病的细胞移植治疗提供充足的细胞来源。

白细胞介素-1β和胶质源性神经营养因子体外诱导鼠胚中脑神经干细胞向酪氨酸羟化酶阳性神经元分化

目的：以白细胞介素1β（IL-1β）和胶质源性神经营养因子（GDNF）为诱导剂,探索小鼠胚胎中脑神经干细胞（M-NSCs）向多巴胺能神经元的的分化.为M-NSCs移植治疗帕金森病（PD）提供实验依据.方法： 在有血清条件下体外培养鼠胚M-NSCs,予以IL-1β和GDNF作诱导分化.酪氨酸羟化酶（TH）免疫细胞化学鉴定.流式细胞术检测TH阳性神经元的百分率.结果： GDNF组促进M-NSCs分化为TH阳性神经元的比例为13.53%,IL-1β组为9.66%,GDNF＋IL-1β联合培养组为16.22%,空白对照组仅3.46%,差异有统计学意义.结论： IL-1β和GDNF可明显促进M-NSCs分化成多巴胺能神经元.

白细胞介素-1β体外诱导小鼠中脑神经干细胞向酪氨酸羟化酶阳性神经元分化

目的:探讨白细胞介素-1β(IL-1β)体外诱导中脑神经干细胞(M-NSCs)向酪氨酸羟化酶阳性神经元分化情况,为帕金森病的转基因移植治疗在体外获得足够的多巴胺能神经元提供实验依据。方法:在有血清条件下体外培养鼠胚M-NSCs,予以IL-1β作诱导分化。酪氨酸羟化酶(TH)免疫细胞化学鉴定,流式细胞术检测TH阳性神经元的百分率。结果:实验组促进M-NSCs分化为TH阳性神经元的比例为9.54%,而对照组仅3.46%,差异有统计学意义。结论:IL-1β可明显促进中脑神经干细胞分化成多巴胺能神经元。

酪氨酸羟化酶阳性神经元在扬子鳄、家鸡及大鼠脑桥的分布比较

目的:观察并比较扬子鳄、家鸡及大鼠脑桥酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase,TH)阳性神经元的形态和分布,为生物进化及扬子鳄种群遗传保护与神经系统疾病防治提供比较解剖学资料。方法:扬子鳄6只、家鸡和SD大鼠各15只。三种动物再各分三组进行分次实验,每次扬子鳄2只,家鸡和SD大鼠各5只,同一时间内电击处死后,取脑桥组织,采用免疫组织化学方法结合黑马病理图像分析系统检测三种动物脑桥TH阳性神经元的分布特征。结果:三种动物脑桥均见TH阳性神经元成团或散在分布,均可见椭圆形、圆形、梭形、多角形等,但三种动物间脑桥不同形态的细胞数量大多存在差异(P<0.01);三种动物脑桥TH阳性神经元均以中、小细胞为主,大细胞相对较少;与扬子鳄相比,家鸡及大鼠脑桥同节段TH阳性神经元数均明显增加,灰度值降低,均具有统计学差异(P<0.01);与家鸡相比,大鼠脑桥TH阳性神经元数明显增加,灰度值降低,均具有统计学差异(P<0.01)。结论:扬子鳄、家鸡及大鼠脑桥TH神经元数量依次增多,细胞平均灰度值依次降低,不同形态的细胞比例存在一定差异,提示脑桥TH神经元的分布差异可能与不同物种脑桥执行其相关神经系统生理功能的不同有关。

嗅黏膜神经干细胞的体外培养和向酪氨酸羟化酶阳性神经元的分化

目的:建立体外培养和诱导嗅黏膜神经干细胞向酪氨酸羟化酶阳性神经元分化的方法,探讨该细胞的干性和分化特性。方法:首先用含10%胎牛血清的DMEM/F-12混合培养基培养成年大鼠嗅黏膜细胞,当细胞贴壁后将培养基更换为含表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblastgrowth factor,bFGF),不含血清的干细胞培养基,以促进干细胞增殖形成神经球。将神经球取出用干细胞培养基悬浮培养以纯化扩增神经干细胞。应用干细胞相关蛋白Nestin及CD133的抗体对神经干细胞进行免疫荧光染色,观察上述蛋白在细胞的表达。用Neurobasal培养基(含B27、NGF、ATRA及SHH)培养扩增后的神经干细胞,诱导其向神经元分化。用神经丝蛋白(neurofilament-200,NF-200)和酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)抗体对分化的细胞进行免疫荧光染色;用免疫印迹法检测上述细胞裂解样品内的相应标志蛋白的电泳条带。结果:嗅黏膜神经干细胞高表达Nestin及CD133两种神经干细胞标志蛋白;干细胞经诱导分化后其形态具有神经元特征,并且高表达NF和TH两种神经细胞标志蛋白。结论:贴壁/悬浮序贯培养方法可体外纯化扩增嗅黏膜神经干细胞,该细胞可分化为酪氨酸羟化酶阳性神经元。

知母皂苷BⅡ对大鼠神经干细胞向酪氨酸羟化酶阳性神经元分化的影响

目的探讨知母皂苷BII ( timosaponin B-II,TB-II)对大鼠来源的神经干细胞( neural stem cells,NSCs)向酪氨酸羟化酶阳性(tyrosine Hydroxylase,TH)神经元分化的影响.方法原代培养大鼠神经干细胞,采用细胞增殖计数法、形态学观察和免疫组化等方法鉴定NSCs的自我增殖能力和多向分化的生物学功能.取第三代( P3) NSCs,设立无添加 TB-II的血清自然分化组为对照组, TB-II实验组依次添加10 μg/ml、30 μg/ml和100 μg/ml ,作用7 d.采用免疫组织化学方法检测TH在各组的表达情况;Western blot法检测分化细胞TH蛋白表达的程度.结果(1)所培养细胞具备自我增殖能力,表达nestin蛋白,分化为神经元和神经胶质细胞,符合神经干细胞生物学属性.(2)与对照组相比,TB-II 30 μg/ml剂量组和TB-II 100 μg/ml剂量组 TH阳性细胞比率均升高[( 10. 03 ± 1. 36)%,(20. 01±3. 37)%,(31. 32±3. 98)%],差异有统计学意义(t=16. 54,6. 15,均P<0. 05). TB-II 10 μg/ml组与对照组比较差异无统计学意义(t=18. 36,P>0. 05).(3)Western结果显示,与对照组比较,TB-II 30 μg/ml剂量组和TB-II 100 μg/ml组的TH蛋白的相对表达量升高,差异有统计学意义[对照组:( 1. 02 ± 0. 24),TB-II 30 μg/ml 剂量组:( 3. 64 ± 1. 78),TB-II 100 μg/ml 剂量组:( 5. 88 ± 2. 34);t=12. 58,9. 15,均P<0. 05]. TB-II 10 μg/ml组与对照组比较差异无统计学意义( t=16. 42,P>0. 05).结论 TB-II可促进NSCs向TH阳性神经元分化.

天麻对帕金森病大鼠黑质凋亡细胞表达及酪氨酸羟化酶阳性神经元的影响

目的研究和探讨帕金森病（PD）的发病机理及天麻防治PD的作用机制。方法采用6-羟基多巴胺（6-OHDA）大鼠模型，通过免疫组化技术观察天麻对PD大鼠黑质酪氮酸羟化酶阳性（TH^＋）神经元及Caspase-3阳性（Caspase-3^＋）神经元表达水平的影响。结果PD大鼠脑组织黑质致密部（SNpc）及腹侧被盖区（VTA）TH^＋神经元表达水平组间比较差异有统计学意义（F值分别为13．29、5．04，P〈0．01）。与正常组大鼠脑组织SNpc和VTA区TH^＋神经元表达水平[（32．13±4．84），（30．23±3．21）]比较，模型组大鼠TH^＋神经元表达水平[（18．89±3．73）和（24．20±6．35）]明显下降（P〈0．01）；经天麻和美多巴治疗后TH^＋神经元丢失减少，天麻小剂量组TH^＋神经元表达水平分别为（26．24±3．06）和（26．31±6．1），中剂量组分别为（22．44±3．81）和（26．91±6．28）；大剂量绀分别为（20．95±4．71）和（27．3±7．1）；美多巴组分别为（27．89±4．56）和（25．974±5．14）；其中，天麻小剂量组和美多巴组SNpc区TH^＋神经元表达水平和模型组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。PD大鼠脑组织SNpc及VTA区Caspase-3阳性细胞表达水平组间比较差异有统计学意义（F值分别为6．09、5．53，P〈0．01）。与正常组Caspase-3阳性细胞表达水平[（9．83±3．03），（7．04±1．76）]比较，模型组火鼠Caspase-3阳性细胞表达水平[（14．53±2．33）和（12．84±2．58）]明显升高（P〈0．01）；经天麻和美多巴治疗后Caspase-3阳性细胞表达水平下降，天麻小剂量组分别为（10．68±1．83）和（7．72±1．92），中剂量组分别为（11．29±2．8）和（10．38±3．79）；大剂量组分别为（11．89±2．97）和（11．37±1．86）；美多巴组分别为（9．99±3．3）和（10．69±3．11）；其中，美多巴组SNpc区和天麻小剂量组VTA区Caspase-3阳性细胞表达水平和模型组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。天麻和美多巴治疗各组TH^＋神经元表达与Caspase-3^＋神经元表达呈相反趋势。结论细胞凋亡可能是PD大鼠中腑多巴胺神经元丢失的主要方式。天麻可通过调节Caspase-3减少细胞凋亡，其中，小剂量天麻对治疗PD具有较好的作用。本研究结果提示天麻可不同程度地保护多巴胺神经元。

帕金森病模型大鼠中脑腹侧被盖区酪氨酸羟化酶免疫阳性神经元的改变

目的探讨帕金森病(PD)模型大鼠中脑腹侧被盖区(VTA)酪氨酸羟化酶(TH)免疫阳性神经元的改变。方法将6-羟基多巴胺(6-OHDA)分别注入实验组大鼠左侧黑质致密部和中脑被盖腹侧区以建立帕金森病模型,于术后4d、7d、14d、21d、28d腹腔注射阿扑吗啡(apomorphine,APO),观察并记录大鼠行为学变化情况,利用Nissl染色、酪氨酸羟化酶(TH)免疫细胞化学染色观察大鼠中脑腹侧被盖区神经组织及TH免疫阳性神经元的改变。结果APO诱发实验组PD大鼠均向健侧(右侧)旋转,旋转启动时间逐渐缩短,持续时间逐渐延长,旋转速度逐渐加快,至术后2周旋转行为趋于稳定;Nissl染色见实验组PD大鼠损毁侧(左侧)中脑VTA区神经元数目显著减少,尼氏体模糊,颗粒及密度均降低,伴有大量胶质细胞增生,术后2周、4周注射侧神经元数目较术后1周明显减少(P<0.05);实验组PD大鼠损毁侧(左侧)中脑VTA的TH阳性神经元明显减少,神经元胞体轮廓及突起不清晰,TH阳性纤维也明显减少,分布稀疏,术后2周、4周注射侧阳性神经元数目较术后1周明显减少(P<0.05)。结论PD大鼠损毁侧中脑VTA神经组织有明显破坏,TH阳性神经元显著减少,提示中脑腹侧被盖区TH免疫阳性神经元的改变参与了PD模型大鼠的病理学变化。

重组人改构体酸性成纤维细胞生长因子减少帕金森病大鼠黑质酪氨酸羟化酶免疫阳性神经元丢失

目的探讨重组人改构体酸性成纤维细胞生长因子(Mrh-aFGF)对帕金森病(PD)大鼠旋转行为和酪氨酸羟化酶(TH)免疫阳性神经元的影响。方法6-OHDA分别注入黑质和腹侧被盖区后建立PD大鼠模型,侧脑室内注射Mrh-aFGF,用阿扑吗啡诱导旋转行为,免疫细胞化学染色观察TH免疫阳性神经元和纤维,并进行定量分析。结果对照组均未引出旋转行为;PD组术后旋转启动时间缩短,持续时间延长,速度加快;生理盐水(NS)处理组旋转行为未见明显改善;Mrh-aFGF处理组旋转启动时间延长,持续时间缩短,速度减慢(P<0.01)。各组大鼠健侧黑质TH阳性神经元的数量维持在相近的水平。同组内健侧和损毁侧阳性神经元比较,对照组损毁侧无明显改变;PD组、NS处理组和Mrh-aFGF处理组损毁侧阳性神经元与健侧比较均明显减少(P<0.01)。其中PD组损毁侧黑质TH免疫阳性神经元数量随时间延长逐渐减少(P<0.01)。NS处理组损毁侧黑质TH免疫阳性神经元的变化与PD组相似;Mrh-aFGF处理组损毁侧黑质阳性神经元较PD组及NS处理组有明显改善,阳性神经元的数量明显增加(P<0.01)。结论Mrh-aFGF能减少PD大鼠黑质TH免疫阳性神经元的丢失,并改善其旋转行为。

心内神经节酪氨酸羟化酶mRNA阳性神经元的研究—原位杂交法

以原位杂交组织化学方法观察中华蟾蜍心内神经节细胞的递质性质 ,在 6只动物发现酪氨酸羟化酶 m RNA阳性神经细胞2 0 8个 ,散在分布于心内神经节。细胞多为卵圆形及圆形 ,以小及中型为主。

α-突触核蛋白过表达对黑质多巴胺能神经元酪氨酸羟化酶表达的影响

目的 研究α 突触核蛋白 (α synuclein ,α SYN)过表达对多巴胺能神经元酪氨酸羟化酶 (TH)表达的影响。 方法 在α SYN基因转染的MES 2 3 5大鼠黑质多巴胺能神经元细胞系 ,分别用免疫组织化学、免疫荧光、Westernblot等方法分析α SYN和TH的表达以及两者之间的关系。通过绘制生长曲线和MTT测试细胞氧化还原活性 ,观察α SYN基因转染细胞的生长和损伤情况。 结果 α SYN过表达明显抑制MES 2 3 5多巴胺能神经元的TH表达 ,但对该细胞的生长和增殖无明显影响 ,也不引起该细胞损伤。 结论 α

大鼠孤束核含酪氨酸羟化酶、神经降压素和胆囊收缩素样神经元向伏核的投射—HRP和免疫细胞化学双重标记法的研究

本文应用HRP顺、逆行追踪法结合免疫细胞化学双重标记法,对大鼠孤束核向伏核的投射进行了研究。主要结果如下:1.WGA-HRP注入孤束核尾侧段,在伏核后部的腹、内侧区,出现较密集的标记纤维、终末和标记细胞;将HRP注入伏核后部的腹、内侧区,在孤束核尾侧段(主要在连合核和内侧亚核)出现大量的顺、逆行标记,以同侧为主。2.HRP注射到伏核并结合免疫细胞化学反应,在孤束核尾侧段发现HRP-TH,HRP-NT、HRP-CCK双重标记细胞。HRP-TH的数目最多,其次是HRP-NT双标细胞,HRP-CCK双标细胞最少。

重组人改构体酸性成纤维细胞生长因子对帕金森病大鼠中脑腹侧被盖区酪氨酸羟化酶神经元的保护

目的：探讨重组人改构体酸性成纤维细胞生长因子（Mrh-aFGF）对帕金森病（PD）大鼠旋转行为和中脑腹侧被盖区酪氨酸羟化酶（TH）免疫阳性神经元的影响.方法：6-羟基多巴胺（6-OHDA）分别注入黑质和腹侧被盖区后建立PD大鼠模型,侧脑室内注射Mrh-aFGF,用阿扑吗啡诱导旋转行为,免疫组织化学显色观察TH免疫阳性神经元和纤维,并进行定量分析.结果：PD组术后旋转启动时间缩短,持续时间延长,速度加快;Mrh-aFGF处理组旋转行为有改善.各组大鼠组内健侧和损毁侧阳性神经元比较,对照组损毁侧无明显改变;PD组、NS处理组和Mrh-aFGF处理组损毁侧阳性神经元与健侧比较均减少.Mrh-aFGF处理组损毁侧中脑腹侧被盖区阳性神经元数量较PD组及对照组增加.结论：Mrh-aFGF能减少PD大鼠中脑腹侧被盖区TH免疫阳性神经元的丢失,并改善其旋转行为.

移植视网膜酪氨酸羟化酶免疫反应神经元的发育

将妊娠１４ｄＳＤ大鼠胚胎视网膜移植至新生大鼠之中脑，应用免疫细胞化学方法，观察了术后１０～３４ｄ的移植视网膜和正常视网膜的酪氨酸羟化酶免疫反应（Ｔｙｒｏｓｉｎｅｈｙｄｒｏｘｙｌａｓｅｉｍｍｕｎｏｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ，ＴＨ—ＩＲ）神经元的出现时间、定位分布及其发育过程。结果表明，移植视网膜生长正常，具有与同龄正常视网膜极为相似的结构，ＴＨ—ＩＲ神经元的形态和定位分布与正常视网膜相一致。术后１０ｄ（当于正常大鼠出生当日）的移植视网膜ＴＨ—ＩＲ神经元见于成神经细胞层，生后４ｄ见于节细胞层；６～８ｄ以后位于内核层和节细胞层；至１２ｄ，ＴＨ－ＩＲ阳性细胞数达到高峰，平均９～１０个／ｍｍ２，以后有所下降，逐渐接近正常。按细胞形态特点分为两型，Ⅰ型细胞胞体大，直径１１～２０μｍ，树突较多而粗；Ⅱ型细胞胞体小，直径５～１０μｍ，树突较少。它们的突起分支进入内网层并弥散分布，常见密集于第１亚层，有时见于第１和第３亚层。上述结果提示：移植视网膜和正常视网膜ＴＨ—ＩＲ神经元是无长突细胞，其发育过程与正常视网膜极为相似。这为研究移植视网膜神经元的发育规律，以及神经系统的可塑性和再生，提供有意义的资料。

大鼠红核酪氨酸羟化酶、生长抑素和亮啡吠能神经元至延髓外侧网状核的研究

用HRP逆行追踪和免疫细胞化学ABC法相结合研究了红核内酪氨酸羟化酶、生长抑素和亮啡呔免疫活性神经元至延髓外侧网状核的投射.结果表明,红核内HRP标记细胞为对侧性,主要分布于其尾侧2/3,同时,还可见酪氨酸羟化酶、生长抑素、亮啡呔单标细胞及HRP/酪氨酸羟化酶、HRP/生长抑素、HRP/亮啡呔双标细胞,其中HRP/酪氨酸羟化酶双标细胞约占HRP单标细胞25.2%,HRP/生长抑素双标细胞约占21.3%,HRP/亮啡呔双标细胞约占15.4%.红核参与镇痛和心血管活动的调节可能与上述神经递质有关.

大鼠延髓腹外侧区含酪氨酸羟化酶、神经降压素和胆囊收缩素样的神经元向伏核的投射—HRP和免疫细胞化学双重标记法研究

本文应用HRP逆行追踪法,结合免疫细胞化学双重标记法,对大鼠延髓尾侧l/3段腹外侧区向伏核的投射进行了研究。将HRP注射到伏核的腹侧部和内侧部,在双侧(以同侧为主)延髓腹外侧区内出现大量的标记细胞,结合免疫细胞化学反应后,在延髓腹外侧区内发现HRP-TH、HRP-NT以及HRP-CCK双标细胞。HRP-TH双标细胞最多,HRP-NT及HRP-ccK双标细胞很少。在孤束核与延髓腹外侧区之间的网状结构内,也发现有少量HRP-TH双标细胞。

大鼠蓝斑酪氨酸羟化酶样神经元至背海马投射观察

目的 :观察大鼠蓝斑至背海马投射纤维的递质性质。方法 :用辣根过氧化物酶 (HRP)逆行追踪法和免疫组织化学相结合的双重标记技术研究蓝斑TH样神经元至背海马投射。结果 :在双侧蓝斑内可见到HRP标记细胞、TH阳性反应细胞和TH HRP双标细胞 ,同侧明显多于对侧。结论 :背海马接受双侧蓝斑纤维的投射 。

含酪氨酸羟化酶的神经元在猴延髓内脏带内的分布及形态特点

为观察含酪氨酸羟化酶（ＴＨ）阳性神经元在猴延髓内脏带内的分布及形态特点，使用免疫组织化学方法对３只恒河猴的延髓中尾段进行了研究。结果证明，延髓中尾段的ＴＨ阳性神经元集中分布于从背内侧至腹外侧的弧形带状区——延髓内脏带内（ＭＶＺ）。该区可分为背内侧部、腹外侧部和中间部。在背内侧部，ＴＨ阳性结构主要分布于迷走神经背运动核、最后区、孤束核的连合亚核、胶状质亚核和内侧亚核。在腹外侧部，由尾侧向吻侧范围逐渐扩大，胞体由密集至稀疏。中间部又可分为外侧区和内侧区，细的ＴＨ阳性轴突沿外侧区之外侧缘行向腹外侧，外侧区内有梭形ＴＨ阳性细胞和纤维，它们有明显的背内腹外侧的方向性。ＴＨ阳性神经元大小、形态各异，并与分布的区域有关，背内侧以卵圆形为主，腹外侧部以多极神经元为主，中间部以梭形细胞为主。本文还就ＭＶＺ儿茶酚胺能神经元的作用进行了讨论。

同一心内神经元酪氨酸羟化酶、生长抑素的各自基因表达与贮存 原位杂交和/或免疫组织化学法光镜观察

目的 在转录与翻译水平同时证明 1 部分心内神经节的单一细胞内既出现酪氨酸羟化酶 (TH)的基因表达 ,又储存TH ;2 部分心内神经节的单一细胞内既出现生长抑素 (SS)的基因表达 ,又储存SS。 方法 在中华蟾蜍心房后壁腔静脉窦部位的冰冻切片 (30 μm)上 ,分两组以原位杂交、免疫组织化学及原位杂交 免疫组织化学结合双标方法分别进行心内神经节细胞的THmRNA、TH 免疫反应 (TH IR)及SSmRNA、SS 免疫反应 (SS IR)染色观察。 结果 在两组心内神经节切片分别发现下述标记细胞 :TH IR阳性神经元、THmRNA阳性神经元、THmRNA TH IR双阳性神经元 ;以及SS IR阳性神经元、SSmRNA阳性神经元、SSmRNA SS IR双阳性神经元。 结论 1 证明部分心内神经节的细胞内既出现TH的基因表达 ,同时又有TH ,可能是肾上腺素能的交感神经细胞 ;2 SS系心内神经节细胞的一种内源性神经递质。本研究为心内SS能神经结构参与心功能 (兴奋传导、心肌分泌及收缩 )的局部神经调节提供直接的化学神经解剖学证据。