酪氨酸-溴酸钾-硫酸-丙酮在三邻菲啰啉合铁(Ⅱ)催化下的B-Z振荡反应

研究了酪氨酸 溴酸钾 硫酸 丙酮在三邻菲啉合铁 (Ⅱ )催化下的化学振荡反应 ,对振荡的影响因素进行了研究和讨论 .运用正交实验法确立了振荡反应进行的浓度范围 ,得到一个 4 0多次振荡寿命为 6 0min的振荡波 .获得振荡的诱导期和周期与反应物浓度之间的变化趋势曲线 ,以及振荡反应在诱导期和振荡期的表观活化能分别为Ein=4 9.0kJ/mol和E =5 7.0kJ/mol.根据反应过程中的现象和实验数据 ,建立了振荡反应的模型和反应机理 ,确定 [Br-]是振荡反应自发进行的关键因素 .

新型4-羟基苯丙酮酸脱氢酶抑制剂尼替西农的合成研究进展

依据起始物料的不同介绍了以2-硝基-4-三氟甲基苯胺、2-硝基-4-三氟甲基苯甲酸为原料制备尼替西农的合成路线,其中,以2-硝基-4-三氟甲基苯甲酸经氯化反应与1,3-环己二酮缩合制备尼替西农较优,该路线具有反应条件温和、避免有毒有害试剂、适宜放大生产等优势,但三氯化铝废液回收处理是急需解决的一个问题。同时分析讨论了不同方法制备关键物料2-硝基-4-三氟甲基苯甲酸合成路线的优缺点。为开发更加高效、经济的尼替西农合成方法与杂质研究提供借鉴意义。

Hpd基因修饰制备高酪氨酸血症Ⅲ型巴马小型猪模型

目的利用CRISPR/Cas9技术敲除巴马小型猪4-羟基苯丙酮酸氧化酶(4-OH phenylpyruvate dioxygenase,4HPPD/HPD)制备高酪氨酸血症Ⅲ型巴马小型猪模型。方法分别从质粒pGL3-U6-gRNA-PGK-puromycin和pST1374-NLS-flag-linker-Cas9中通过PCR扩增sgRNA-Hpd和Cas9体外转录用模板,接着体外转录出Cas9 mRNA和sgRNA-Hpd,最后将Cas9 mRNA和sgRNA-Hpd共注射入巴马小型猪受精卵的胞质内,以制备Hpd基因敲除巴马小型猪。结果胞质内共注射后,共移植20枚受精卵至2只代孕母猪。获得子代Hpd基因敲除巴马小型猪共4只。结论本研究成功制备了高酪氨酸血症Ⅲ型巴马小型猪模型,将为研究酪氨酸代谢通路提供更好的模型。

表达人源HPD基因对酿酒酵母孢子壁二酪氨酸层正确组装的干扰

研究人类基因4-羟苯丙酮酸二加氧酶(4-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase,HPD)的表达对酿酒酵母( Saccharomyces cerevisiae )产孢过程及酵母孢子壁组装的影响。将 HPD 导入酿酒酵母中,比较人源化 HPD 酵母与野生型酵母的表型差异,分析 HPD 对酵母产孢及孢子壁的影响。与野生型酵母相比,人源化 HPD 酵母对产孢率无影响,但孢子自身荧光强度下降,乙醚敏感性增加,荧光增白剂(calcofluor white,CFW)染色荧光强度增强,该结果表明孢子壁出现缺陷,其二酪氨酸层组装过程中部分缺失。进一步研究发现,人源化 HPD 酵母产孢时,Hpd蛋白的催化产物尿黑酸(homogentisate,HGA)在产孢过程中会被氧化从而引起培养基颜色变化,且二酪氨酸复合物会大量泄漏至培养基中,最终导致二酪氨酸层不能正确组装。该研究结果为酿酒酵母二酪氨酸层的形成机制提供了新的认知。

肉豆蔻-8散通过JAK2/STAT3信号通路减轻缺氧/复氧心肌细胞的损伤

研究肉豆蔻-8散提取物对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其与酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)/信号转导子和激活子3(STAT3)信号通路的关系。使用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)建立H9c2细胞缺氧/复氧损伤模型;采用CCK-8法检测细胞活力;采用全自动生化分析仪检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CK)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)的含量;采用试剂盒法测定细胞中过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量;采用Hoechst染色法检测细胞凋亡程度;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组心肌细胞JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、Bcl-2、Bax的蛋白表达。Na2S2O4对H9c2细胞活力的半数抑制量为2mmol/L;与模型组比较,不同浓度肉豆蔻-8散提取物均能提高细胞活力;能显著降低细胞培养液中CK、LDH、AST的水平、能显著增加细胞中CAT、SOD、GSH-Px的水平;同时可显著增加p-JAK2、p-STAT3、Bcl-2的蛋白表达、显著减少Bax的蛋白表达,而AG490阻断剂组可减弱肉豆蔻-8散提取物的作用。肉豆蔻-8散通过JAK2/STAT3信号通路发挥对Na2S2O4诱导缺氧/复氧损伤心肌细胞的保护作用。

低分子量硫酸软骨素对MPTP致帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元的保护作用

目的:观察低分子量硫酸软骨素(CS)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)致帕金森病(PD)模型小鼠多巴胺能神经元的保护作用。方法:将C57BL/6小鼠随机分为对照组、MPTP损伤组以及低分子量CS低、高剂量组(100、400 mg/kg)。对照组和MPTP损伤组小鼠均灌胃等容生理盐水,各给药组小鼠均灌胃相应药物,每天1次,连续17 d。自给药后第11天开始,除对照组外,其余各组小鼠均于给药后腹腔注射MPTP溶液(20 mg/kg),每天1次,连续5 d,以复制PD模型。末次给药后,采用转棒式疲劳仪评价小鼠(每组10只)行为学的改变情况,采用免疫组织化学法和免疫荧光法检测小鼠(每组3只)中脑黑质中多巴胺神经元的损伤情况[酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞百分比、荧光强度百分比],采用高效液相色谱法检测小鼠(每组6只)脑纹状体中多巴胺的含量,采用化学比色法检测小鼠(每组6只)中脑黑质中氧化应激指标[超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)]水平。结果:与对照组比较,MPTP损伤组小鼠在转棒上的滞留时间显著缩短,中脑黑质中TH阳性细胞明显减少、荧光强度明显减弱,其阳性细胞百分比和荧光强度百分比,脑纹状体中多巴胺的含量以及中脑黑质中SOD、GSH-Px的活性均显著降低,MDA的含量显著升高(P<0.01)。与MPTP损伤组比较,低分子量CS各剂量组小鼠在转棒上的滞留时间显著延长,中脑黑质中TH阳性细胞明显增加、荧光强度明显增强,其阳性细胞百分比、荧光强度百分比以及脑纹状体中多巴胺的含量均显著升高,且高剂量组上述指标均显著长于或高于低剂量组(P<0.05或P<0.01);低分子量CS各剂量组小鼠中脑黑质中SOD、GSH-Px的活性均显著升高,低分子量CS高剂量组小鼠中脑黑质中MDA的含量显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:预防性给予低分子量CS可剂量依赖性地减轻MPTP致PD模型小鼠中脑黑质中多巴胺能神经元的损伤,增加其脑纹状体中多巴胺的分泌。这种作用可能与抑制脂质过氧化反应、提高组织的抗氧化能力相关。

硫酸镁联合拉贝洛尔对早发重度子痫前期患者的疗效及对血清sFlt-1、PLGF浓度和sFlt-1/PLGF比值的影响

目的探讨硫酸镁联合拉贝洛尔对早发重度子痫前期(ES-PE)患者的治疗效果及对血清可溶性fms样酪氨酸激酶-1(sFlt-1)、胎盘生长因子(PLGF)浓度和sFlt-1/PLGF比值的影响。方法抽取晋中市第一人民医院2018年8月至2021年6月收治的160例早发重度子痫前期(ES-PE)患者,按照随机抽签法分为观察组和对照组,每组80例。观察组给予硫酸镁联合拉贝洛尔片治疗,对照组给予硫酸镁治疗。比较两组治疗前后的血压、尿蛋白、尿量值,治疗前后血清sFlt-1和PLGF浓度及其比值,妊娠结局。结果观察组治疗后的收缩压、舒张压、24 h尿蛋白、24 h尿量优于对照组(P<0.05);观察组治疗后的sFlt-1、PLGF、sFlt-1/PLGF比值优于对照组(P<0.05);观察组中胎儿窘迫、胎盘早剥、产后出血、新生儿窒息的总发生率(17.5%,14/80)低于对照组(46.3%,37/80),P<0.05。结论硫酸镁联合拉贝洛尔可有效治疗ES-PE,升高血清sFlt-1浓度,降低血清PLGF浓度和sFlt-1/PLGF比值,降低不良妊娠结局的发生率。

磺草酮亚慢性暴露对大鼠糖代谢和酪氨酸代谢的影响

目的探讨磺草酮(一种三酮类除草剂)亚慢性暴露对大鼠糖代谢和酪氨酸代谢的影响。方法以不同剂量磺草酮(5、505、00 mg/(kg.d))混饲染毒90 d。分别测定第零天、306、0、90 d空腹血糖;实验结束后行糖耐量试验;并检测肝脏4-羟苯丙酮酸二加氧酶(HPPD)活力及血清酪氨酸、肾上腺素含量。结果染毒组大鼠各时间点空腹血糖,糖耐量及血清肾上腺素水平与对照组相比,其差异均无统计学意义;染毒组大鼠肝脏HPPD活力与对照组相比均明显下降(P<0.001);染毒组大鼠血清酪氨酸水平与对照组相比均明显升高(P<0.001),且酪氨酸水平有随染毒剂量增高而升高的趋势。结论磺草酮有效抑制大鼠肝脏HPPD活力,干扰大鼠酪氨酸代谢,诱发严重酪氨酸血症。尽管酪氨酸还是肾上腺素等儿茶酚胺类激素的前提物质,但在本实验中未发现大鼠肾上腺素发生显著性改变,同时也未见糖代谢异常。

磺草酮对大鼠酪氨酸代谢的影响及其角膜毒性

目的探讨磺草酮亚慢性暴露对大鼠酪氨酸代谢的影响及其角膜毒性。方法磺草酮(0.1、0.5、5、50和100 mg/kg·d)剂量灌胃染毒90 d。实验结束后分别测定大鼠肝脏酪氨酸氨基转移酶[tyrosine aminotransferase(TAT)]、4-羟苯丙酮酸二加氧酶[4-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase(HPPD)]、尿黑酸氧化酶[homogentisic acid oxidase(HGO)]活力及血浆和房水酪氨酸浓度,并制备角膜组织病理切片;在实验前及实验期间用裂隙灯显微镜观察大鼠角膜损伤情况。结果与对照组相比,各染毒组大鼠肝脏TAT活力均显著性升高(P<0.001)、HPPD活力均显著性降低(P<0.001)、HGO活力高剂量组(5、50和100 mg/kg·d)均显著性降低(P<0.001),各染毒组大鼠血浆和房水酪氨酸浓度均显著性升高(P<0.001);实验期间磺草酮引发高剂量染毒组大鼠角膜损伤,到90 d实验结束时染毒组(5、50和100 mg/kg·d)大鼠角膜损伤发生数分别为25.0%、75.0%(P<0.001)和62.5%(P<0.001);组织病理学结果显示磺草酮引发大鼠角膜炎。结论磺草酮能有效抑制大鼠肝脏HPPD活力,干扰正常酪氨酸代谢,并诱发大鼠酪氨酸血症,进而导致酪氨酸在房水中蓄积,并最终引发大鼠角膜损伤。