安君宁对吗啡依赖大鼠脑内酪胺酸羟化酶和胶质原纤维酸性蛋白表达的影响

目的 观察安君宁对吗啡依赖大鼠腹侧被盖区（VTA）内酪胺酸羟化酶（TH）和胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）表达的影响.方法 选择体质量在180～220g雄性SD大鼠30只为研究对象,动物随机分为5组（每组动物6只）,即单用生理盐水正常对照组（Normal组）、其余四组大鼠则先制成吗啡成瘾模型：以5mg/kg/次开始,每天增加5mg,一直增加到第10天50mg·kg^-1·次^-1,每天腹腔注射吗啡2次.第11天开始自然戒断,四组成瘾大鼠随机分成吗啡成瘾后戒断并安君宁治疗12d组（P12E）、吗啡成瘾后戒断并淀粉治疗12d组（P12EC）,吗啡成瘾后戒断并安君宁治疗30d组（P30E）、吗啡成瘾后戒断并淀粉治疗30d组（P30EC）.安君宁和淀粉均为每天灌胃2次,安君宁剂量为3 g·kg^-1·次^-1,对照组喂等量淀粉.用ABC法测VTA的TH与GFAP的免疫组织化学反应;测定阳性神经元的平均光密度（OD）值.结果 5组大鼠（Normal、P12EC、P12E、P30EC、P30E组）VTA中TH免疫反应的强度分别为（0.1888±0.045）、（0.4471±0.063）、（0.1834±0.039）、（0.3224±0.044）、（0.1788±0.042）,VTA中GFAP免疫反应的强度分别为（0.1538±0.045）、（0.2768±0.056）、（0.1808±0.036）、（0.2512±0.051）、（0.1427±0.034）.吗啡成瘾大鼠VTA中TH和GFAP免疫反应的强度持续高于淀粉组（P＜0.05）,安君宁治疗12d或30d能显著性降低VTA中TH、GFAP免疫反应强度（P＜0.05）,逐渐接近淀粉对照组.结论 吗啡成瘾能导致大鼠VTA内的一些可塑性的损伤,而安君宁能促进这些损伤的修复,提示其可用于阿片类成瘾的治疗.

酪胺酸-色胺酸缩聚二肽分子内电子转移速率常数的从头算研究

用量子化学从头算方法对色氨酸 酪氨酸缩聚二肽体系进行电子转移动力学参数的计算。用UHF/ 6 3 1G 方法分别优化给体 ,受体和桥体的几何构型 ,用线性反应坐标构造了给体和受体分子间电子转移的双势阱 ,得到两透热势能面在Rc 约为 0处交叉 ,表明气相反应为无能垒过程。采用两态变分法 ,获得了色氨酰酪氨酸及酪氨酰色氨酸体系的分子内电子转移矩阵元VBA分别为 7.1 0J·mol-1和 5 .5 1J·mol-1。采用Marcus双球模型估算了反应的溶剂重组能。

基于ZnO纳米线的酪胺酸霉生物传感器研究

用简单的气相传输法制备了尺度均匀的ZnO纳米线,它具有高等电点、优良的生物兼容性、良好的电子传输特性等优点。基于这些优良特性,酪胺酸霉被稳定的固定于这种纳米材料的表面,进而构建了用于苯酚类物质探测的生物传感器。电化学测试表明这种生物传感器具有高灵敏度、快速响应等优点,可用于环境监测、人体健康等领域。

酪胺酸激酶抑制剂诱发的间质性肺炎的CT特点

目的熟悉酪胺酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)导致的急性间质性肺炎的CT表现,有利于及时、有效地进行预防、干预和治疗。方法回顾性分析6例经EGFR-TKI治疗非小细胞肺癌而导致的急性间质性肺炎患者的CT表现和相关高危因素。结果 6例EGFR-TKI导致的急性间质性肺炎CT表现为两肺新增的磨玻璃样改变,大部分对称分布,部分可见到胸膜下线增厚;部分见蜂窝状及网格状改变。结论 CT能较好地观察EGFR-TKI诱发的急性间质性肺炎的发生和发展,及时停药并激素治疗,能有效缓解和阻止间质性肺炎的发展。

脑缺血后抑郁模型大鼠下丘脑酪氨酸羟化酶的表达及中药干预作用

目的:观察脑缺血后抑郁模型大鼠下丘脑酪胺酸羟化酶(TH)表达及益肾调气方药的干预作用。方法:建立卒中后抑郁大鼠模型基础上,采用免疫组化ABC法观察脑缺血后抑郁大鼠脑内TH的表达及益肾调气方药的干预作用。结果:模型大鼠下丘脑TH阳性细胞的面密度及光密度较正常降低(P<0.05;P<0.01);对照组和治疗组TH阳性细胞面密度和光密度均较模型增加(P<0.05;P<0.01)。结论:卒中后抑郁模型大鼠存在脑内单胺递质合成催化酶-TH功能的下降,与脑内单胺递质含量下降有关,益肾调气方药可通过促进TH的单胺递质合成功能达到治疗作用。

酪氨酸激酶靶向的肿瘤生物学治疗进展

蛋白酪氨酸激酶系统在肿瘤的发生、发展和转移中起着重要的作用,针对其的各种肿瘤治疗药物如相关受体的单克隆抗体以及小分子酪氨酸激酶抑制剂在近几年中进展迅速。本文分别就以上两个方面做一综述。

酪胺制备的改进方法

选抒以酪胺酸为原料的热解脱羧路线,改变反应条件,采用减压蒸留法提纯,反应产率提高到92.5％

纳米纤维固相萃取检测血浆中3-硝基酪氨酸

建立了血浆中3-硝基酪氨酸的检测方法。乙腈沉淀血浆蛋白,上清液经氮气吹干后用荧光剂4-氟-7-硝基-2,1,3-苯并氧杂恶二唑(NBD-F)衍生,纳米纤维固相萃取柱净化后,以0.05 M磷酸二氢钾—甲醇(体积比35:65,pH 3.0)为流动相,在Ex=470 nm,Em=530 nm条件下测定峰响应值。该方法具有较高的灵敏度和准确度,能够用于测定血浆中3-硝基酪氨酸的含量。

高脂食物诱导的肥胖小鼠不同脑区即刻早期蛋白和酪氨酸羟化酶的变化

目的:在高脂食物诱导肥胖的小鼠中检测多巴胺神经元的表达。方法:10只雄性小鼠饲喂高脂膳食作为高脂食物组(HFD),10只雄性小鼠饲喂10%脂肪膳食作为对照组(NCD)。实验第10周,小鼠禁食12 h后称重,尾静脉取血测定基础血糖水平;实验11周进行葡萄糖耐受(GTT)测试和胰岛素抵抗实验(ITT);实验12周,动物禁食4 h后处死,测定血清胰岛素和瘦素(leptin)浓度,免疫组织化学法检测即刻早期蛋白(c-Fos-ir)和酪氨酸羟化酶(TH-ir)的表达。结果:饲喂12周高脂食物后,HFD组体重明显增加。GTT测试显示HFD组在15 min和30min血糖浓度均明显高于NCD组(P<0.05)。ITT测试显示HFD组在15 min和30 min血糖浓度均显著高于NCD组(P<0.05)。同时,禁食后,HFD组的胰岛素浓度和leptin浓度显著高于NCD组(P<0.01)。免疫组化结果表明HFD组在伏隔核、下丘脑室旁核、腹侧背盖区和黑质的c-Fos-ir细胞数均明显多于NCD组(P<0.01),且腹侧被盖区和黑质的TH-ir和共表达TH/Fos-ir细胞也显著多于NCD组(P<0.01)。而且HFD组VTA区和SN区TH-ir的细胞数与HFD组小鼠的终体重呈正相关(P<0.05)。结论:长期饲喂高脂食物导致的肥胖与奖赏系统多巴胺神经元的可塑性有关。

可卡因对后代多巴胺能神经系统的长时影响:剂量依赖性与年龄依赖性研究

目的 通过建立妊娠中晚期暴露于可卡因的小鼠动物模型 ,探讨可卡因对后代多巴胺能神经系统 (dopaminergicnervoussystem ,DAS)的发育是否具有长时程影响 ,同时探讨这种影响是否具有剂量依赖性和年龄依赖性。方法 称量不同剂量可卡因处理组与对照组的后代仔鼠在青春前期、青春期和成年期的体重和脑重 ;运用高效液相色谱结合电化学检测器 (HPLC EC)的技术检测各组各时期后代仔鼠脑内多巴胺 (dopamime,DA)及其代谢产物 3 ,4 双羟苯乙酸 (3 ,4 di hydroxyphenylaceticacid ,DOPAC)、高香草酸 (4 hydroxy 3 menthoxyphenylaceticacid ,HVA)含量差异 ;通过免疫组织化学结合图像分析方法观察黑质区 (substantianigra,SN)酪胺酸羟化酶 (tyrosinehydroxylase,TH)的分布与含量。 结果 在妊娠期中晚期皮下注射中等剂量可卡因的仔鼠在青春前期和青春期生长发育延迟 ,脑内DA及其代谢产物的含量比对照组明显增高 ,SN区TH相对含量增多 ,这些改变在成年期恢复正常 ;低剂量组的仔鼠各项检测指标在各时期与对照组相比无统计学意义 ;高剂量组的妊娠母鼠流产率为 80 % ,新生仔鼠 1 0d内死亡。结论 妊娠期暴露于可卡因对后代DAS的发育和功能具有长时程影响 。

囊泡单胺转运体在帕金森病小鼠脑组织中的分布特征

目的:探讨囊泡单胺转运体(VMAT2)在帕金森病(PD)小鼠模型脑组织中的分布特征与帕金森病的关系。方法:使用利血平、MPTP及联合利血平和MPTP分别造成C57BL小鼠的PD模型,应用免疫组织化学方法观察VMAT2和TH在黑质致密部、纹状体、腹侧被盖和蓝斑分布的变化。结果:免疫组织化学分析显示,帕金森病小鼠较对照组小鼠VMAT2和酪胺酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)阳性神经元细胞数目在黑质致密部明显减少,腹侧被盖和蓝斑中的阳性神经元细胞数无明显变化;VMAT2和TH在纹状体区域阳性神经元纤维明显减少;同时发现在正常对照组中VMAT2在黑质致密部中的分布既少于腹侧被盖也少于蓝斑。结论:这种对多巴胺神经元具有保护作用的VMAT2在黑质致密部中的分布少于腹侧被盖和蓝斑,黑质致密部保护作用薄弱是帕金森病黑质选择性受损的重要原因。

囊泡单胺转运体在人胚胎脑组织中的分布特征及其与帕金森病的关系

目的探讨囊泡单胺转运体(VMAT2)在人胚胎脑组织中的分布特征及其与帕金森病(PD)的关系。方法分别收集不同胎龄自然流产的新鲜胎儿脑组织,应用免疫组织化学方法和Western blot观察VMAT2和酪胺酸羟化酶(TH)在胎脑黑质致密部、腹侧被盖部和蓝斑分布的变化。结果免疫组织化学及Western blot显示,VMAT2在胎脑黑质致密部中的分布既少于腹侧被盖也少与蓝斑(均P<0.05)。结论胎脑VMAT2在黑质致密部中的分布少于腹侧被盖和蓝斑,黑质致密部保护作用薄弱可能是PD黑质多巴胺能神经元选择性受损的重要原因之一。

囊泡单胺转运体在脑组织中的分布特征与帕金森病相关性的研究

目的探讨囊泡单胺转运体(VMAT2)在脑组织中的分布特征与帕金森病(PD)的关系。方法使用利血平、神经毒素1-甲基-4-苯基-四氢吡啶(MPTP)及联合利血平和MPTP分别造成C57BL小鼠的PD模型和分别收集不同胎龄自然流产的新鲜胎儿,应用免疫组织化学方法和Western blot观察VMAT2和酪胺酸羟化酶(TH)在黑质致密部、腹侧被盖和蓝斑分布的变化。结果免疫组织化学分析及Western blot显示,PD小鼠较对照组小鼠VMAT2和TH阳性神经元细胞数目在黑质致密部明显减少,腹侧被盖和蓝斑中的阳性神经元细胞数无明显变化;同时发现在小鼠正常对照组和人胎脑中VMAT2在黑质致密部中的分布既少于腹侧被盖也少于蓝斑。结论这种对多巴胺神经元具有保护作用的VMAT2在黑质致密部中的分布少于腹侧被盖和蓝斑,黑质致密部保护作用薄弱是PD黑质选择性受损的重要原因。

妊娠中晚期暴露于可卡因对后代多巴胺能神经系统发育的长时程影响

为了研究妊娠中晚期暴露于可卡因对后代多巴胺能神经系统的发育是否具有长时程影响 ,本研究建立和运用子宫内接触可卡因的小鼠动物模型 ,运用高效液相色谱结合电化学检测器 ( HPLC-EC)技术检测脑内多巴胺及其代谢产物 3,4-双羟苯乙酸和高香草酸的含量 ;采用免疫组织化学结合图象分析方法观察脑内酪氨酸羟化酶的分布与相对含量。结果表明 ,HPL E-EC检测提示妊娠期暴露于可卡因的仔鼠脑内多巴胺及其代谢产物的含量在青春前期和青春期较对照组明显升高 ;免疫组织化学方法发现妊娠期暴露于可卡因的仔鼠在青春前期与青春期脑内酪氨酸羟化酶在黑质和中脑腹侧被盖区的分布和相对含量与对照组比较有显著性差异。上述变化在成年期基本恢复正常。结论 :妊娠期暴露于可卡因对后代多巴胺能神经系统的发育具有长时程影响 。

ONOO^-活性氧的荧光光谱分析进展

系统介绍了ONOO-活性氧的化学性质,并对其参与的主要化学反应进行了分类和总结.同时,比较了近年来用于ONOO-检测的方法,并重点论述了荧光光谱分析方法尤其是酶催化动力学荧光分析法在检测ONOO-活性氧方面的优势和最新的研究进展.

低强度超声波对辐射后血管内皮细胞影响的体外研究

[目的]探索低强度超声波对辐射后血管内皮细胞增殖功能和酪胺酸激酶膜受体(KDR)表达的作用。[方法]体外培养的第3代血管内皮细胞以5×10~4/孔的浓度接种于6孔板内,分别接受0、3、6、9Gy4个剂量^(60)γ射线的辐射,实验组接受低强度超声波仪的干预(功率:0.8W/cm^2,频率:1.6mHz);对照组低强度超声波仪的功率设为0;检测细胞的增殖和KDR的表达。[结果]剂量为0、3、6Gy时,第8天的细胞记数(×10~4/孔)实验组分别为:22.07±1.83、21.67±1.45、12.76±0.74,对照组分别为:20.08±0.49、8.44±1.48、4.76±0.13,实验组的细胞数明显增多(P<0.05);同时细胞融合时间也明显缩短;辐射剂量为0、3Gy时,实验组KDR表达分别呈阳性和弱阳性,较对照组KDR表达均有所增强。[结论]低强度超声波对辐射后血管内皮细胞的增殖功能和KDR的表达均有提高作用。

轴突生长导向因子简介

轴突的生长连接是神经发育生长的基础。在新生或发育中的神经系统中,可形成浓度梯度从而引导轴突生长的分子已发现的主要有如下几类:导素(Netrins)、信号素(Sem aphorins)、Eph相关受体酪胺酸激酶配体(L igands of Eph-related receptor tyrosine k inases)和Slit蛋白等。生长锥通过其表面受体感应浓度的梯度变化并据此改变神经元细胞的生长方向。本文总结了一些轴突生长导向因子的作用及相关理论。

钙黏蛋白表达与表皮生长因子受体分子靶向治疗敏感/耐药的相关性

目的探讨钙黏蛋白表达与表皮生长因子受体(EGFR)分子靶向治疗敏感或耐药的相关性。方法乳腺癌细胞(MCF-7和MDA-MB-231)、膀胱癌细胞株(T24)、子宫颈鳞癌细胞(SiHa)、大细胞肺癌细胞株(H460)、肝癌细胞株(SK-HEP-1和MHCC97-H)以及单核细胞白血病(THP-1)等8种细胞分别用表皮生长因子受体酪胺酸激酶抑制药(EGFR-TKI)PD153035和吉非替尼处理48 h,采用噻唑蓝(MTT)法检测其敏感或耐药性,计算各细胞的半数抑制浓度(IC50),并与各细胞钙黏蛋白水平比较,观察相关性。结果随着PD153035和吉非替尼浓度的升高,MCF-7、MDA-MB-231、T24及SiHa细胞生存率明显下降,表现为敏感,钙黏蛋白表达阳性;H460、SK-HEP-1、MHCC97-H及THP-1细胞生存率未见明显下降,表现为耐药,钙黏蛋白表达阴性。结论 EGFR-TKI对上皮性肿瘤细胞的生存率与钙黏蛋白的表达水平存在相关性;钙黏蛋白可能在调节EGFR分子靶向治疗的敏感性方面起重要作用;钙黏蛋白作为标志物为临床筛选合适的患者进行EGFR-TKI分子靶向治疗提供了重要线索。

茶多酚联合易瑞沙抗移植性人肺腺癌效应研究

目的观察茶多酚联合表皮生长因子受体酪胺酸激酶抑制剂(易瑞沙)对人肺腺癌生长抑制作用,为进一步深入研究茶多酚抗肿瘤血管生成机制提供依据。方法人源可移植性肺腺癌(A549)细胞系经传代培养后,以BALB/c-nu祼鼠进行肿瘤移植,并以茶多酚、表皮生长因子受体酪胺酸激酶抑制剂及其联合用药进行干预性治疗,通过观察抑瘤率评价单用及联合用药对A549移植瘤生长抑制作用。结果茶多酚、表皮生长因子受体酪胺酸激酶抑制剂及联合用药的抑瘤率分别为33%、34.1%和57.1%。与模型组相比,有统计学意义(P<0.01);联合用药与单用药比较,具有统计学意义(P<0.05)。结论茶多酚、表皮生长因子受体酪胺酸激酶抑制剂对A549生长有明显抑制作用,两者联合使用抑瘤效果更好。

干扰表皮生长因子受体表达对脑出血后星形胶质细胞活化的影响及其机制

目的观察干扰表皮生长因子受体(EGFR)表达对脑出血后星形胶质细胞活化的影响。方法注射Ⅶ型胶原酶制备脑出血模型大鼠,同时设置假手术组作为对照。术后7 d,行神经功能评分判断造模成功与否。取脑出血模型大鼠和假手术大鼠,行SP免疫组化法检测脑组织EGFR和神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达。分离新生大鼠皮层星形胶质细胞,体外培养。观察干扰EGFR表达对细胞的影响,实验分4组:(1)对照组:不处理;(2)重组大鼠睫状神经营养因子(CNTF)组:加入20μg/L CNTF;(3)阴性组:加入20μg/L CNTF,并转染EGFR siRNA阴性对照;(4)EGFR组:加入20μg/L CNTF,并转染EGFR siRNA。采用实时荧光定量PCR和蛋白印迹法检测各组细胞EGFR、GFAP、磷酸化酪胺酸激酶JAK1(p-JAK1)、磷酸化信号传导与转录激活因子3(p-STAT3)的表达。结果脑出血模型大鼠造模成功率89.5%(17/19)。脑出血模型大鼠脑组织EGFR和GFAP表达显著高于假手术组(P<0.05)。EGFR组EGFR mRNA和蛋白相对表达量显著低于对照组、CNTF组和阴性组(P<0.05)。CNTF组和阴性组GFAP mRNA和蛋白相对表达量显著高于对照组和EGFR组(P<0.05),而对照组和EGFR组比较无显著差异(P>0.05)。CNTF组和阴性组p-JAK1和p-STAT3蛋白相对表达量显著高于对照组和EGFR组(P<0.05),而对照组和EGFR组比较无显著差异(P>0.05)。结论脑出血大鼠EGFR和GFAP表达升高,星形胶质细胞活化。干扰EGFR表达可抑制大鼠星形胶质细胞活化,其机制可能与阻滞JAK1和STAT3磷酸化有关。