酪蛋白激酶-2相互作用蛋白-1介导的自噬通路与骨质疏松症的关系探讨

骨质疏松症被认为是一种典型的增龄性疾病,其原因是骨重建受损,并伴有成骨细胞和破骨细胞数量和活性的失衡。自噬作为一种细胞生存途径,在成骨细胞或破骨细胞退变过程中起着重要作用。酪蛋白激酶-2相互作用蛋白-1(casein kinase 2 interacting protein-1,CKIP-1)可以通过磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路参与骨细胞自噬,被认为与骨质疏松症的发生具有重要的关系。本文阐述了自噬的概念及发生机制,介绍了自噬与骨质疏松症的关系,重点探讨了CKIP-1介导的自噬通路与骨质疏松症的关系。

酪蛋白激酶1基因在恶性黑色素瘤中的表达及临床意义

目的研究酪蛋白激酶-1(CK1)在恶性黑色素瘤细胞及组织中的表达并探讨其临床意义。方法采用qRT-PCR检测CK1 mRNA在恶性黑色素瘤细胞及正常黑色素细胞中的表达。Western blot检测CK1蛋白在恶性黑色素瘤细胞及正常黑色素细胞中的表达。应用免疫组织化学方法检测59例恶性黑色素瘤及30例色素痣标本中CK1的表达。结果恶性黑色素瘤细胞及组织中CK1基因表达明显高于在黑色素细胞及色素痣组织中的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CK1基因在恶性黑色素瘤细胞及组织中高表达揭示CK1可能与恶性黑色素瘤的发病机制相关。以CK1为靶点的抑制剂或反义基因治疗黑色素瘤可能会展示广阔的前景。

Ckip-1通过差异影响松质与皮质骨调节骨生物力学强度的研究

目的:研究酪蛋白激酶-2相互作用蛋白-1(CKIP-1)对小鼠股骨松质骨与皮质骨的骨量、胶原变化的影响,及其在调节股骨、下颌骨生物力学中的作用。方法:取3月龄Ckip-1基因敲除(KO)小鼠作为实验组,野生型(WT)小鼠作为对照组(同窝、雄性)(n=5)。分别对小鼠股骨松质与皮质骨进行影像学Micro CT扫描,组织学丽春红三色染色、 I型胶原免疫组化染色、天狼星红染色,及力学三点弯曲实验,定量分析,评估Ckip-1对松质与皮质骨量、胶原含量与比例、及生物力学强度的影响。结果:Ckip-1 KO小鼠,股骨松质骨:骨量提高,胶原含量增加,但比例不变,生物力学强度增强;股骨皮质骨:骨量、胶原含量、比例无显著影响,复合型下颌骨组织生物力学显著增强。结论:Ckip-1对松质骨各项性能指标影响较大,对皮质骨无显著影响,可负调控骨组织的生物力学强度。

双重靶向治疗恶性淋巴瘤新药——乌帕利斯(umbralisib)

双重靶向治疗恶性淋巴瘤新药乌帕利斯(umbralisib),是一种口服、磷酸肌醇-3-激酶δ(PI3Kδ)和酪蛋白激酶1-ε(CK1-ε)双效抑制药,由瑞士从事抗肿瘤药物临床前开发的Rhizen制药公司首先研制,2012年8月16日该公司与专注于开发治疗B细胞相关疾病创新疗法的美国肿瘤学治疗公司(TG therapeutics)签署全球授权协议,授予TG公司独家开发乌帕利斯用于治疗血液恶性肿瘤,开展临床试验研究,获得药政当局上市许可,并实现商业化。首先开发用于治疗复发性/难治性边缘区淋巴瘤(MZL)及滤泡性淋巴瘤(FL)成人患者,其后,再扩大适应证,用于治疗慢性淋巴细胞白血病(CLL)。2019年4月15日TG公司获得美国食品药品管理局(FDA)授予乌帕利斯罕用药指定,用于治疗MZL的孤儿药认定,包括淋巴结MZL、结外MZL和脾MZL3种亚型。2019年10月28日TG公司公布了一项代号为UNITY-NHL的2b期临床试验中期疗效结果,获得评估乌帕利斯单药治疗MZL或FL关键性试验的阳性结果。2020年1月16日,TG公司向FDA提交新药滚动上市申请(NDA),乌帕利斯将作为先前治疗MZL或FL患者的一种治疗方法。2020年8月13日,FDA接受该公司对乌拉利布新药应用申请,并授予孤儿药物的认定,2021年2月5日FDA加速批准乌帕利斯上市,商品名Ukoniq,是首个,也是唯一获批上市的每日口服1次的双重靶向治疗恶性淋巴瘤磷双激酶抑制药,作为既往接受过至少1种包含抗CD20单克隆抗体治疗的复发或难治性MZL成人患者和既往接受过≥3线全身治疗的复发或难治性FL成人患者治疗用药。该文对乌帕利斯片剂的非临床和临床药理毒理学、临床研究、不良反应、适应证、剂量与用法、用药注意事项及知识产权状态和国内外研究进展等进行介绍。

蛋白酶体激活因子REGγ的重组表达及其体外功能的初步探讨

目的蛋白酶体激活因子11S调节蛋白复合物γ亚单位(11S regulator complex gamma subunit,REGγ)的重组表达,初步探讨其与骨形成负调控分子酪蛋白激酶-2相互作用蛋白-1(caseinkinase-2interactingprotein-1,CK-IP-1)的相互作用。方法首先以质粒pCMV-Myc-REGγ为模板,通过聚合酶链反应(PCR)扩增出765bp的REGγcDNA片段,然后亚克隆到原核表达载体pGEX-4T-2并转化入大肠杆菌BL21经IPTG诱导表达,表达产物超声破碎后进行SDS-PAGE和Western印迹鉴定,进而通过GSTPull-down实验验证REGγ是否与CKIP-1存在相互作用。结果通过测序证实原核表达载体pGEX-4T-2-REGγ构建成功,进一步表达鉴定发现GST-REGγ蛋白主要以可溶性的形式存在于裂解上清中;GSTPull-down实验表明REGγ与CKIP-1存在明显的相互作用。结论REGγ与CKIP-1在体外存在相互作用,为进一步深入研究REGγ对CKIP-1的调控作用奠定了基础。