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降解氨基甲酸乙酯的酯酶挖掘及酶学性质表征
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作者 刘庆涛 朱司宝 +5 位作者 王天文 李闯 钱森和 张温清 程凡 田淑芳 《食品科学》 EI CAS 北大核心 2025年第2期99-107,共9页
本研究在NCBI数据库中挖掘出4个在pH 4.5及7.0条件下均具有氨基甲酸乙酯(ethyl carbamate,EC)降解能力的酯酶(ES1、ES5、ES8和ES9),实现它们在大肠杆菌中的可溶性表达,并对其进行纯化及酶学性质表征。结果表明,ES1、ES5、ES8和ES9最适... 本研究在NCBI数据库中挖掘出4个在pH 4.5及7.0条件下均具有氨基甲酸乙酯(ethyl carbamate,EC)降解能力的酯酶(ES1、ES5、ES8和ES9),实现它们在大肠杆菌中的可溶性表达,并对其进行纯化及酶学性质表征。结果表明,ES1、ES5、ES8和ES9最适温度分别为70、70、55℃及55℃,ES1、ES5、ES9最适pH值呈碱性,ES8呈中性;4种酶在温度高于45℃或pH值低于5.0条件下稳定性显著降低;4种酶的活性受到Fe^(3+)、Co^(2+)、Cu^(2+)的强烈抑制;4种酶在体积分数10%乙醇存在条件下,可分别保持50.48%、48.44%、42.60%及33.59%的酶活力。4种酶在质量分数为5%NaCl条件下,可分别保持24.09%、20.41%、16.11%及10.73%的酶活力。4种酶在pH 4.5条件下对EC的米氏常数(Km)值分别为210.7、213.8、256.2 mmol/L及127.2 mmol/L,催化常数(kcat)/米氏常数(Km)值分别为214.31、203.20、161.46 L/(mol·s)及257.43 L/(mol·s)。结构分析推测,ES9底物通道入口较窄,可能影响EC的进入,从而影响ES9对EC的最大反应速率;而ES9具有相对较高的EC亲和力,可能归因于ES9与EC之间较强的氢键作用力。本研究获得了具有良好乙醇耐受性及EC水解性能的酯酶,丰富了EC水解酶酶库,为未来控制低酒精度的传统发酵食品中EC含量提供了新方法。 展开更多
关键词 氨基甲酸乙酯 氨基甲酸乙酯水解酶 酯酶 传统发酵食品 食品安全
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不同强度运动干预2型糖尿病大鼠骨骼肌羧酸酯酶1及炎症因子的变化
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作者 胡淑娟 程平 +4 位作者 张啸 丁一庭 刘璇 蒲锐 汪献旺 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第2期269-278,共10页
背景:羧酸酯酶1及炎症因子在调节脂质代谢以及葡萄糖稳态方面起着至关重要的作用,然而有关不同强度运动干预对2型糖尿病大鼠骨骼肌羧酸酯酶1及炎症因子的影响尚待揭示。目的:探究不同强度运动干预对2型糖尿病大鼠骨骼肌羧酸酯酶1及炎症... 背景:羧酸酯酶1及炎症因子在调节脂质代谢以及葡萄糖稳态方面起着至关重要的作用,然而有关不同强度运动干预对2型糖尿病大鼠骨骼肌羧酸酯酶1及炎症因子的影响尚待揭示。目的:探究不同强度运动干预对2型糖尿病大鼠骨骼肌羧酸酯酶1及炎症因子的影响。方法:取32只8周龄雄性SD大鼠,适应性喂养1周后随机分为正常对照组(n=12)和造模组(n=20),造模组大鼠利用高脂膳食和一次性注射链脲佐菌素制备2型糖尿病模型,建模成功后随机分为糖尿病对照组(n=6)、中等强度运动组(n=6)和高强度间歇运动组(n=6),后2组适应性跑台运动5 d后分别进行对应强度的跑台运动,每天1次,每次50 min,每周训练5 d。连续运动6周后,检测大鼠血糖与血脂相关指标,苏木精-伊红染色观察骨骼肌组织形态学变化,qRT-PCR检测骨骼肌羧酸酯酶1与炎症因子的mRNA表达,Western-blotting及免疫荧光染色检测骨骼肌中羧酸酯酶1与炎症因子的蛋白表达。结果与结论:①与正常对照组相比,糖尿病对照组大鼠空腹血糖、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、胰岛素抵抗指数均升高(P<0.05),胰岛素活性降低(P<0.05),骨骼肌中的羧酸酯酶1、NEK7、白细胞介素18的mRNA与蛋白表达均升高(P<0.05)。②与糖尿病对照组相比,中等强度运动组和高强度间歇运动组大鼠空腹血糖、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、胰岛素抵抗指数均降低(P<0.05),胰岛素活性升高(P<0.05);中等强度运动组大鼠骨骼肌中的NEK7 mRNA表达降低(P<0.01),羧酸酯酶1、NEK7、白细胞介素18蛋白表达降低(P<0.05);高强度间歇运动组大鼠骨骼肌中的羧酸酯酶1、NEK7、NLRP3、白细胞介素18 mRNA表达降低(P<0.05),羧酸酯酶1、白细胞介素18蛋白表达降低(P<0.05)。③苏木精-伊红染色显示,相较于糖尿病对照组,中等强度运动组大鼠肌纤维间隙变小,内部空洞减少,细胞结构趋于完整;高强度间歇运动组大鼠肌细胞排列松散,组织形态不规则,肌纤维内部空洞较多。④结果表明,中等强度运动和高强度间歇运动均可降低2型糖尿病大鼠的血糖、血脂、胰岛素抵抗与骨骼肌羧酸酯酶1水平,中等强度运动可明显降低骨骼肌NEK7表达,高强度间歇运动可降低骨骼肌白细胞介素18表达,并且羧酸酯酶1与NEK7、白细胞介素18关系密切。 展开更多
关键词 中等强度有氧运动 高强度间歇运动 2型糖尿病 羧酸酯酶1 炎症因子
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胆碱酯酶及其抑制剂在心力衰竭中的作用研究进展
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作者 刘蕊 宋倩 刘永铭 《中国心血管病研究》 CAS 2024年第11期983-987,共5页
胆碱酯酶(ChE)是由肝脏合成的一种反映肝脏储备状态的关键酶,主要负责水解神经递质乙酰胆碱,并在体内的多种生理过程中发挥关键作用,尤其是在神经信号传导的过程中。近些年研究发现,胆碱酯酶抑制剂(ChEI)对神经系统疾病具有巨大的治疗... 胆碱酯酶(ChE)是由肝脏合成的一种反映肝脏储备状态的关键酶,主要负责水解神经递质乙酰胆碱,并在体内的多种生理过程中发挥关键作用,尤其是在神经信号传导的过程中。近些年研究发现,胆碱酯酶抑制剂(ChEI)对神经系统疾病具有巨大的治疗潜力。心力衰竭患者常合并痴呆症等神经系统疾病,因此,ChE及其抑制剂在心力衰竭中的临床研究受到广泛关注。本文综述了ChE及其抑制剂在心力衰竭中的作用机制,以及血清ChE水平在评估心力衰竭患者预后中的价值,探讨ChEI治疗心力衰竭的临床应用现状及研究方向,旨在为心力衰竭的预后评估和治疗方案提供新的思路。 展开更多
关键词 心力衰竭 胆碱酯酶 乙酰胆碱酯酶 丁酰胆碱酯酶 胆碱酯酶抑制剂
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不同Child-Pugh分级肝硬化患者血清TSP-1、球蛋白/胆碱酯酶的表达水平差异及其疾病预后危险因素分析 被引量:1
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作者 葛爽 魏娟 谷申森 《临床和实验医学杂志》 2024年第2期126-130,共5页
目的分析不同Child-Pugh分级肝硬化患者血清凝血酶敏感蛋白-1(TSP-1)、球蛋白/胆碱酯酶的表达水平差异及其疾病预后危险因素。方法回顾性选取2020年2月至2023年2月新疆医科大学第一附属医院收治的70例肝硬化患者作为主要研究对象,根据Ch... 目的分析不同Child-Pugh分级肝硬化患者血清凝血酶敏感蛋白-1(TSP-1)、球蛋白/胆碱酯酶的表达水平差异及其疾病预后危险因素。方法回顾性选取2020年2月至2023年2月新疆医科大学第一附属医院收治的70例肝硬化患者作为主要研究对象,根据Child-Pugh分级将其分为Child-Pugh A级组(n=20),Child-Pugh B级组(n=34),Child-Pugh C级组(n=16),另选取同期在本院进行体检的50名健康人群作为对照组。采用酶联免疫吸附试验法检测4组及肝硬化不同预后患者的血清TSP-1、球蛋白、胆碱酯酶、球蛋白/胆碱酯酶表达水平;采用双变量Spearman相关性检验血清TSP-1、球蛋白、胆碱酯酶、球蛋白/胆碱酯酶与肝硬化患者Child-Pugh分级和预后的相关性;建立多因素Logistic模型分析影响肝硬化患者预后的独立危险因素,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清TSP-1、球蛋白/胆碱酯酶对肝硬化预后的预测价值。结果与对照组比较,Child-Pugh A级组、Child-Pugh B级组、Child-Pugh C级组患者的血清TSP-1、球蛋白、球蛋白/胆碱酯酶表达水平较高,血清胆碱酯酶表达水平较低;与Child-Pugh A级组患者比较,Child-Pugh B级组、Child-Pugh C级组患者的血清TSP-1、球蛋白、球蛋白/胆碱酯酶表达水平较高,血清胆碱酯酶表达水平较低;与Child-Pugh B级组比较,Child-Pugh C级组患者的血清TSP-1、球蛋白、球蛋白/胆碱酯酶表达水平较高,血清胆碱酯酶表达水平较低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与预后良好组比较,预后不良组血清TSP-1、球蛋白、球蛋白/胆碱酯酶表达水平较高,血清胆碱酯酶表达水平较低,差异均有统计学意义(P<0.05)。肝硬化患者血清TSP-1、球蛋白/胆碱酯酶与Child-Pugh分级和预后均呈正相关(P<0.05)。多因素Logistic分析结果显示,Child-Pugh分级、TSP-1、球蛋白/胆碱酯酶均是影响肝硬化患者预后的独立危险因素(P<0.05)。血清TSP-1、球蛋白/胆碱酯酶与TSP-1+球蛋白/胆碱酯酶预测肝硬化患者预后的曲线下面积值分别为0.814、0.824、0.885。结论血清TSP-1、球蛋白/胆碱酯酶异常表达与肝硬化Child-Pugh分级及其预后均存在一定关联,可作为肝硬化患者的Child-Pugh分级及预后的辅助预测指标。 展开更多
关键词 肝硬化 CHILD-PUGH分级 凝血酶敏感蛋白-1 球蛋白/胆碱酯酶 预后 危险因素
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宏基因组来源高活性酯酶的鉴定及其酶学性质表征
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作者 张颖 董耀 +2 位作者 吕云斌 王绍琛 冯治洋 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期22-28,共7页
土壤中大量的非培养微生物是新酶发现的重要资源。该研究利用功能宏基因组学策略筛选获得高活性酯酶,并对其进行鉴定分析。采用三丁酸甘油酯平板法对土壤微生物宏基因组文库中具有酯酶活性的克隆进行筛选,获得高活性的阳性克隆,通过生... 土壤中大量的非培养微生物是新酶发现的重要资源。该研究利用功能宏基因组学策略筛选获得高活性酯酶,并对其进行鉴定分析。采用三丁酸甘油酯平板法对土壤微生物宏基因组文库中具有酯酶活性的克隆进行筛选,获得高活性的阳性克隆,通过生物信息学分析和生化实验对酯酶的酶学性质进行研究表征。获得一个比活力高达(3 957±3) U/mg的酯酶AesZF899,该酯酶为不含信号肽的酯酶第四家族胞内酯酶,蛋白大小34 kDa,与来自Afipia sp.P52-10中未表征的α/β水解酶(GenBank登录号为WP_034470467.1)一致性达76.43%。AesZF899的最佳底物为对硝基苯乙酸酯,酶反应的最适pH值和最适温度分别是9.0和40℃。AesZF899在30℃温育8 h后仍可保持初始活性,在35、40℃分别温育7和4 h后仍可保持50%的活性,在反应温度大于80℃后酶活性丧失。终浓度10 mmol/L的Fe3+可以增强酶活性,而终浓度10 mmol/L的Na+、Li+和Mg2+有较强的抑制作用。体积分数为1%二甲基亚砜可以增强酶活性,异戊醇也对酶活性有一定的促进作用。 展开更多
关键词 酯酶 HSL家族 宏基因组 异源表达 高活性
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红景天苷对类风湿关节炎患者血清脯氨酸羟化酶2及蛋白磷酸酯酶2A和丝裂原活化蛋白激酶表达水平的影响
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作者 李琴 朱光昭 +3 位作者 庄志毅 星媛 严婕 方璐 《中国医药》 2024年第7期1061-1065,共5页
目的分析红景天苷对类风湿关节炎(RA)患者血清脯氨酸羟化酶2(PHD2)及蛋白磷酸酯酶2A(PP2A)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)表达水平的影响。方法选取青海省中医院2022年12月至2023年7月收治的RA患者96例。采用随机数字表法分为对照组和观察... 目的分析红景天苷对类风湿关节炎(RA)患者血清脯氨酸羟化酶2(PHD2)及蛋白磷酸酯酶2A(PP2A)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)表达水平的影响。方法选取青海省中医院2022年12月至2023年7月收治的RA患者96例。采用随机数字表法分为对照组和观察组,各48例。对照组采用常规西医治疗,观察组在常规西医治疗的同时予以红景天苷治疗,2组均治疗3个月。比较治疗前后2组中医证候评分、临床症状与体征、实验室检查指标[包括红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸肽抗体(anti-CCP)]、临床疗效,健康状况评定量表(HAQ)与28个关节疾病活动度评估(DAS28)评分,血清PHD2、PP2A、MAPK水平与基因表达,不良反应。结果治疗后2组主症、次症评分均低于治疗前且观察组均低于对照组(均P<0.05)。治疗后观察组临床症状与体征均轻于对照组,ESR、CRP、RF和anti-CCP水平均低于对照组(均P<0.05)。观察组总有效率高于对照组[95.8%(46/48)比80.4%(37/46)](P=0.020)。治疗后观察组HAQ与DAS28评分均低于对照组[(5.0±1.0)分比(7.2±1.2)分、(3.1±0.5)分比(4.1±0.7)分](t=9.528、7.444,均P<0.001)。治疗后观察组PHD2、MAPK水平及基因表达均低于对照组,PP2A水平及基因表达均高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。2组不良反应发生率差异无统计学意义(P=0.528)。结论红景天苷治疗RA可增强临床效果、减轻患者症状、改善实验室指标且安全。推测与降低PHD2和MAPK表达、增加PP2A表达有关。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 红景天苷 脯氨酸羟化酶2 蛋白磷酸酯酶2A 丝裂原活化蛋白激酶
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酰基辅酶A硫酯酶11在肺鳞癌中的表达及其对细胞增殖、迁移和侵袭的影响
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作者 刘颖 赵文超 《河南医学研究》 CAS 2024年第24期4421-4425,共5页
目的 明确酰基辅酶A硫酯酶11(ACOT11)在肺鳞癌(LUSC)中的表达并探讨其对LUSC细胞生物学行为的影响。方法 采用实时荧光定量PCR和生物信息学分析ACOT11在LUSC癌组织和癌旁组织中的表达。采用Kaplan-Meier法观察ACOT11的表达对患者预后的... 目的 明确酰基辅酶A硫酯酶11(ACOT11)在肺鳞癌(LUSC)中的表达并探讨其对LUSC细胞生物学行为的影响。方法 采用实时荧光定量PCR和生物信息学分析ACOT11在LUSC癌组织和癌旁组织中的表达。采用Kaplan-Meier法观察ACOT11的表达对患者预后的影响。将人LUSC细胞NCI-H226分为OV-ACOT11组和OV-阴性对照组,采用CCK8和Transwell法检测各组细胞的增殖、迁移和侵袭。结果 ACOT11在癌组织中的表达高于癌旁组织(P<0.05);ACOT11的高表达与患者的不良预后相关(P<0.05);过表达ACOT11促进LUSC细胞的增殖、迁移和侵袭(P<0.05)。结论 ACOT11在LUSC癌组织中表达升高,促进了LUSC细胞的增殖、迁移和侵袭,加快了LUSC的发生发展。 展开更多
关键词 肺鳞癌 酰基辅酶A硫酯酶11 增殖 迁移 侵袭
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干燥方式对绿碎茶多酚提取物体外抗氧化和抗糖尿病及乙酰胆碱酯酶抑制活性的影响 被引量:3
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作者 张倜培 李青 +5 位作者 包鸿慧 沈正兴 石娟 唐前勇 程一方 周睿 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期77-84,共8页
研究不同干燥方式处理的绿碎茶多酚提取物体外抗氧化和抗糖尿病活性及对乙酰胆碱酯酶抑制作用。以绿碎茶为试验材料,采用蒸干结合真空干燥与真空冷冻干燥2种干燥工艺对绿碎茶乙酸乙酯萃取相进行干燥处理,比较研究了2种提取物的色泽,DPP... 研究不同干燥方式处理的绿碎茶多酚提取物体外抗氧化和抗糖尿病活性及对乙酰胆碱酯酶抑制作用。以绿碎茶为试验材料,采用蒸干结合真空干燥与真空冷冻干燥2种干燥工艺对绿碎茶乙酸乙酯萃取相进行干燥处理,比较研究了2种提取物的色泽,DPPH自由基、ABTS阳离子自由基、羟自由基(·OH)清除能力和铁离子还原能力以及α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶、乙酰胆碱酯酶的抑制能力和抗糖基化能力。结果表明,真空冷冻干燥绿碎茶多酚提取物(BGTE-FD)较蒸干结合真空干燥绿碎茶多酚提取物(BGTE-SVD)颜色相对偏黄,具有较强的DPPH自由基、ABTS阳离子自由基、·OH清除能力和铁离子还原能力,其IC_(50)值分别为2.64、5.17、247.01、27.73 mg/L。同时,BGTE-FD具有较高的α-淀粉酶、乙酰胆碱酯酶和α-葡萄糖苷酶抑制作用,IC_(50)值分别为85.84、416.45、4.38 mg/L,且其对α-葡萄糖苷酶的抑制能力显著强于阿卡波糖(IC_(50)值为929.59 mg/L)。此外,BGTE-FD和BGTE-SVD对晚期糖基化终产物抑制率分别高达65.28%和63.66%,略低于氨基胍(71.81%)。因此,真空冷冻干燥绿碎茶多酚提取物具有较强的体外抗氧化和抗糖尿病活性及一定的乙酰胆碱酯酶抑制能力,绿碎茶可作为降血糖和抗痴呆产品的潜在资源。 展开更多
关键词 绿碎茶 多酚提取物 抗氧化活性 抗糖尿病活性 乙酰胆碱酯酶抑制活性
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马醉木二萜成分及其乙酰胆碱酯酶抑制活性研究 被引量:1
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作者 李慧娟 全伟 +2 位作者 罗娥娥 秦徐杰 华燕 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期327-332,共6页
为研究马醉木叶中的二萜成分及其乙酰胆碱酯酶抑制活性,该研究根据薄层色谱显色特征,使用硅胶、MCI和半制备高效液相等色谱技术对其进行分离与纯化,并通过波谱数据(NMR和MS)分析且结合文献报道数据进行对比,鉴定了所得化合物的结构,同... 为研究马醉木叶中的二萜成分及其乙酰胆碱酯酶抑制活性,该研究根据薄层色谱显色特征,使用硅胶、MCI和半制备高效液相等色谱技术对其进行分离与纯化,并通过波谱数据(NMR和MS)分析且结合文献报道数据进行对比,鉴定了所得化合物的结构,同时采用Ellman法首次对其乙酰胆碱酯酶抑制活性进行评价。结果表明:从马醉木叶中分离并鉴定了8个二萜化合物,分别是pierisformoside F(1)、3-epi-grayanotoxinⅩⅧ(2)、3-epi-grayanotoxin B(3)、asebotoxin-X(4)、pierisformosin B(5)、asebotoxinⅢ(6)、rhodojaponinⅢ(7)和pierisformosin C(8)。其中,化合物1为首次从该植物中分离得到,化合物8表现出乙酰胆碱酯酶抑制活性。综上表明,马醉木中含有丰富的二萜成分和活性成分。该研究结果丰富了马醉木的化学成分多样性,为其后续综合开发和利用提供了一定的理论依据,也为寻求更多的活性成分提供了借鉴。 展开更多
关键词 杜鹃花科 马醉木 二萜 pierisformoside F 乙酰胆碱酯酶抑制活性
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嗜卷书虱和嗜虫书虱酯酶性质的比较研究 被引量:5
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作者 程伟霞 王进军 +2 位作者 王梓英 赵志模 丁伟 《农药学学报》 CAS CSCD 2002年第4期61-66,共6页
对嗜卷书虱 L iposcelis bostrychophila和嗜虫书虱 L . entomophila羧酸酯酶及乙酰胆碱酯酶(ACh E)的生物化学性质进行了初步研究。结果表明 :嗜虫书虱的羧酸酯酶活性明显高于嗜卷书虱 ,嗜卷书虱和嗜虫书虱羧酸酯酶对底物 α- NA的 Km... 对嗜卷书虱 L iposcelis bostrychophila和嗜虫书虱 L . entomophila羧酸酯酶及乙酰胆碱酯酶(ACh E)的生物化学性质进行了初步研究。结果表明 :嗜虫书虱的羧酸酯酶活性明显高于嗜卷书虱 ,嗜卷书虱和嗜虫书虱羧酸酯酶对底物 α- NA的 Km 值分别为 0 .6 6 5 7、0 .2 85 7mmol/L,Vmax值分别为 1.6 72 2和 2 .4 6 31mmol· (mg· 30 min) -1。嗜卷书虱和嗜虫书虱乙酰胆碱酯酶的活性差异不显著 ,嗜虫书虱略高于嗜卷书虱。通过聚丙烯酰胺凝胶电泳 ,检测出 8条嗜卷书虱、7条嗜虫书虱酯酶同工酶谱带 。 展开更多
关键词 羧酸酯酶 乙酰胆碱酯酶 同工酶 杀虫剂 嗜卷书虱 嗜虫书虱酯酶 性质 比较研究
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胆碱酯酶检测的临床研究进展 被引量:19
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作者 郭鹏翔 王季石 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期795-796,共2页
关键词 胆碱酯酶 乙酰胆碱酯酶 丁酰胆碱酯酶 乙酰胆碱
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德国小蠊羧酸酯酶、酸性磷酸酯酶和碱性磷酸酯酶的活力与抗药性的关系 被引量:19
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作者 林永丽 郝蕙玲 +1 位作者 孙锦程 曹敏 《海军医学杂志》 2001年第2期105-107,共3页
目的 :了解德国小蠊的羧酸酯酶 (β NACarE)、酸性磷酸酯酶 (ApE)和碱性磷酸酯酶 (BpE)与抗药性的关系。 方法 :采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和分光光度法。结果 :(1)Rp品系的 β NACarE活力明显高于S品系 ;(2 )Rp、Rc、Rz品系的ApE和BpE的... 目的 :了解德国小蠊的羧酸酯酶 (β NACarE)、酸性磷酸酯酶 (ApE)和碱性磷酸酯酶 (BpE)与抗药性的关系。 方法 :采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和分光光度法。结果 :(1)Rp品系的 β NACarE活力明显高于S品系 ;(2 )Rp、Rc、Rz品系的ApE和BpE的活力均明显高于S品系。 结论 :(1)德国小蠊对拟除虫菊酯和有机磷的抗性与羧酸酯酶的活力增强有关 ;(2 )酸性磷酸酯酶和碱性磷酸酯酶可能与拟除虫菊酯的抗性有关 ,而与有机磷的抗性无关 ,但此结论还有待进一步探讨。 展开更多
关键词 德国小蠊 抗性 羧酸酯酶 酸性磷酸酯酶 碱性磷酸酯酶
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大曲中产阿魏酸酯酶菌株的筛选及其特性分析 被引量:1
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作者 童文华 乔磊 +5 位作者 李佳伟 杨莹 黄志久 乔宗伟 黄丹 罗惠波 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第1期171-181,共11页
目的从浓香型白酒大曲中分离筛选出一株产阿魏酸酯酶的菌株。方法将大曲样品中筛选出的11株菌进行划线纯化培养,进一步挑选出产阿魏酸酯酶酶活较强的菌株并鉴定,分析其安全性及生物学特性,最后对发酵产酶条件进行优化。结果得到一株产... 目的从浓香型白酒大曲中分离筛选出一株产阿魏酸酯酶的菌株。方法将大曲样品中筛选出的11株菌进行划线纯化培养,进一步挑选出产阿魏酸酯酶酶活较强的菌株并鉴定,分析其安全性及生物学特性,最后对发酵产酶条件进行优化。结果得到一株产阿魏酸酯酶酶活较强的菌株为L-7,经鉴定为屎肠球菌(Enterococcus faecium)。经毒力基因检测、有害代谢产物实验结果均为阴性;生物学特性研究实验结果为:在16 h时生物量达到最大,耐最低pH为4,最高为11,NaCl质量分数为8%的条件下仍能生长,耐受最高的乙醇体积分数为13%;具有较好的安全性且有耐乙醇、耐盐、广泛的pH耐受性等优良性能。通过发酵产酶条件优化,该菌株产阿魏酸酯酶最佳发酵条件为:接种量为6%体积分数、培养温度32℃、转速160r/min、培养时间96 h;此时该菌株产阿魏酸酯酶的酶活为(44.68±0.05)U/L,较优化前提高了57.05%。结论本研究结果可为产阿魏酸酯酶的菌株筛选提供参考,且筛选所得屎肠球菌在提高浓香型白酒及其他发酵食品中阿魏酸含量及风味具有应用潜力。 展开更多
关键词 大曲 阿魏酸酯酶 屎肠球菌 安全性评价 耐受性
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嗜热毁丝霉果胶酯酶MtCE12-1的克隆表达及其酶学性质和应用研究
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作者 张曼玉 董嘉诚 +7 位作者 苟福凡 弓朝晖 刘倩 孙文良 孔臻 郝捷 王敏 田朝光 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期291-300,共10页
【目的】挖潜新型果胶酯酶的酶资源,在嗜热毁丝霉(Myceliophthora thermophila)中高水平表达烟草生物质诱导显著上调的同源果胶酯酶,对其进行酶学性质研究,并探究该果胶酯酶在协同降解烟草生物质过程中的作用。【方法】利用RTqPCR的方... 【目的】挖潜新型果胶酯酶的酶资源,在嗜热毁丝霉(Myceliophthora thermophila)中高水平表达烟草生物质诱导显著上调的同源果胶酯酶,对其进行酶学性质研究,并探究该果胶酯酶在协同降解烟草生物质过程中的作用。【方法】利用RTqPCR的方法分析嗜热毁丝霉在烟草生物质中果胶酯酶MtCE12-1的表达水平,通过2A肽介导的表达筛选系统,在嗜热毁丝霉菌株ATCC 42462中高表达果胶酯酶基因Mtce12-1,对高活性的阳性转化子进行产酶培养和蛋白纯化,表征了果胶酯酶MtCE12-1的酶学性质;以两种烟草生物质烟草压棒和烟草梗丝为底物,通过检测纤维素的剩余含量,分析了与纤维素酶的协同作用效果。【结果】与葡萄糖培养条件相比较,烟草生物质条件下果胶酯酶基因Mtce12-1的转录水平显著上调109-110倍,SDS-PAGE电泳分析、拷贝数和Western检测显示,重组蛋白MtCE12-1成功进行了表达和分泌,表达水平达到464.08 U/mL。该酶在75℃、pH 8.0时表现出最佳酶活力,在50-85℃和pH 7.0-9.0的范围内表现出较好的酶活力,具有良好的热稳定性。将100-300μg的MtCE12-1添加至降解体系后,烟草生物质中纤维素降解效率分别提高了18.5%-30.7%和14.6%-30.5%。【结论】用2A肽介导的表达系统在嗜热毁丝霉中可以高效表达和纯化制备目标蛋白,碱性果胶酯酶MtCE12-1不仅具有良好的温度稳定性,在烟草生物质降解过程中也具有突出的作用效果,为烟草工业生产应用提供了潜在的优质酶资源。 展开更多
关键词 嗜热毁丝霉 果胶酯酶 基因表达 酶学性质 烟草生物质
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三种基质测定血清胆碱酯酶活力的比较 被引量:1
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作者 谢萍 潘洪涛 刘国良 《中国实验诊断学》 2007年第4期490-491,共2页
关键词 血清胆碱酯酶活力 酶测定 中枢神经系统 胆碱酯类 基质 血液胆碱酯酶 真性胆碱酯酶 交感神经节
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谷氨酸棒状杆菌硫酯酶基因表达对脂肪酸合成的影响
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作者 王佳 刘瑾 +2 位作者 孙子羽 满都拉 陈忠军 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期82-86,共5页
旨在为进一步构建脂肪酸高产菌株奠定基础,通过异源和同源表达,研究了谷氨酸棒状杆菌ATCC13032中硫酯酶的基因(NCgl2365和NCgl0090)对脂肪酸合成的影响。结果表明:硫酯酶的过表达对大肠杆菌和谷氨酸棒状杆菌中脂肪酸的种类和含量都产生... 旨在为进一步构建脂肪酸高产菌株奠定基础,通过异源和同源表达,研究了谷氨酸棒状杆菌ATCC13032中硫酯酶的基因(NCgl2365和NCgl0090)对脂肪酸合成的影响。结果表明:硫酯酶的过表达对大肠杆菌和谷氨酸棒状杆菌中脂肪酸的种类和含量都产生了影响;基因NCgl2365在大肠杆菌中过表达后脂肪酸产量增加了37.86%,且促进了饱和脂肪酸C16∶0、C18∶0和不饱和脂肪酸C17∶1和C20∶3的生成,在谷氨酸棒状杆菌中同源表达后脂肪酸产量提高了33.43%,C17∶0相对含量增加了51.82%,而C6∶0、C8∶0、C12∶0、C17∶1、C18∶0、C18∶1和C18∶3的相对含量显著减少;基因NCgl0090在大肠杆菌中过表达后脂肪酸产量增加了58.15%,促进了饱和脂肪酸C14∶0、C16∶0、C18∶0和不饱和脂肪酸C17∶1的生成,而在谷氨酸棒状杆菌中同源表达后脂肪酸产量提高了59.12%,其中C16∶0相对含量增加了40.18%,促进了C10∶0、C14∶0、C14∶1、C15∶0、C16∶1、C18∶2、C20∶1和C21∶0 8种新脂肪酸的合成。综上,基因NCgl2365和NCgl0090对宿主菌体中的脂肪酸代谢产生了重要的作用。 展开更多
关键词 酯酶 异源表达 同源表达 脂肪酸
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沙棘叶提取物的体外抗氧化及乙酰胆碱酯酶抑制能力 被引量:5
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作者 黄瑜 张锡宇 +3 位作者 赵海桃 石统帅 邱隽蒙 符群 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第2期391-400,共10页
以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)清除能力、总还原力为指标,评估了沙棘叶提取物的体外抗氧化活性,考察其对乙酰胆碱酯酶的抑制能力。结果表明:5种不同乙醇体积分数的(40%、50%、60%、70%、80%)沙棘叶提取物均有较好的抗氧... 以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)清除能力、总还原力为指标,评估了沙棘叶提取物的体外抗氧化活性,考察其对乙酰胆碱酯酶的抑制能力。结果表明:5种不同乙醇体积分数的(40%、50%、60%、70%、80%)沙棘叶提取物均有较好的抗氧化活性及乙酰胆碱酯酶抑制能力。以体积分数为60%乙醇水溶液提取的沙棘叶提取物的DPPH·清除率、总还原力及乙酰胆碱酯酶抑制能力最强,分别为85.80%±1.39%,2.45±0.18,97.14%±0.81%,可作为抗氧化剂与乙酰胆碱酯酶抑制剂。该沙棘叶提取物对乙酰胆碱酯酶有较强的抑制能力,半数抑制浓度(IC50)为(1.086±0.144) g/L,对乙酰胆碱酯酶的抑制类型是竞争性大于非竞争性的混合可逆抑制。Auto Dock分子对接及剂效相关性分析表明,沙棘叶活性成分与乙酰胆碱酯酶具有一定的对接亲和力,沙棘叶提取物的抗氧化、酶抑制活性与功能成分之间均存在良好的正相关性(P<0.05),沙棘叶提取物中起主要抗氧化与酶抑制作用的成分为多酚类化合物。 展开更多
关键词 沙棘叶 活性成分 乙酰胆碱酯酶 体外抗氧化 分子对接 中药现代化技术
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微生物阿魏酸酯酶及其在食品中的应用研究进展
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作者 陈舒薇 王丹芸 +6 位作者 娄婷婷 吴子健 张宏宇 王素英 李炳娟 张得光 杨金山 《食品研究与开发》 CAS 2024年第2期202-211,共10页
阿魏酸酯酶(feruloyl esterases,FAEs)是羧酸酯酶的一个亚类,可特异性催化羟基肉桂酸和植物细胞壁多糖之间的酯键水解释放羟基肉桂酸,在食品行业中被广泛应用。该文对来源于微生物的FAEs的结构、分类、催化机理及分子改造等研究进展进... 阿魏酸酯酶(feruloyl esterases,FAEs)是羧酸酯酶的一个亚类,可特异性催化羟基肉桂酸和植物细胞壁多糖之间的酯键水解释放羟基肉桂酸,在食品行业中被广泛应用。该文对来源于微生物的FAEs的结构、分类、催化机理及分子改造等研究进展进行梳理,并对其在面团发酵、酒类酿造、膳食纤维补充剂、茶叶、食品添加剂中的应用及前景进行讨论和展望,以期为阿魏酸酯酶的应用提供参考。 展开更多
关键词 阿魏酸酯酶(FAEs) 羟基肉桂酸 晶体结构 催化机理 应用
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体外循环后胆碱酯酶水平与全身炎症反应综合征 和并发症的关系研究
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作者 魏廷举 赵俊杰 +3 位作者 徐大千 冯琛灿 刘安康 徐敬 《中国循证心血管医学杂志》 2024年第8期972-976,1003,共6页
目的探讨体外循环(CPB)后胆碱酯酶水平变化以及与全身炎症反应综合征(SIRS)的关系,进一步研究其对多器官功能障碍综合征(MODS)的预测价值。方法本研究对2021年2月至2022年12月期间于郑州大学第一附属医院计划接受CPB下心脏手术的患者进... 目的探讨体外循环(CPB)后胆碱酯酶水平变化以及与全身炎症反应综合征(SIRS)的关系,进一步研究其对多器官功能障碍综合征(MODS)的预测价值。方法本研究对2021年2月至2022年12月期间于郑州大学第一附属医院计划接受CPB下心脏手术的患者进行前瞻性分析。其中48例患者发生SIRS作为SIRS组,另外50例未发生SIRS作为对照组。数据收集时间:术前(H0),ICU入院后4 h(H4)、8 h(H8)、12 h(H12)、24 h(H24)和48 h(H48)。通过现场及时检测技术测量血清丁酰胆碱酯酶(BChE)活性,并用血红蛋白(Hb)校正。评估H24和H48时血清BChE活性与急性生理学和慢性健康评估Ⅱ(APACHEⅡ)评分之间的相关性。利用受试者操作特征(ROC)曲线分析BChE活性对CPB后SIRS患者MODS的预测效能。结果SIRS组患者预后更差,包括H24和H48时APACHE II和序贯器官衰竭(SOFA)评分均高于对照组(P<0.05),且ICU住院时间更长(P=0.030)。SIRS组和对照组在术后H12时血清BChE活性降至最低值,分别为1.16(0.73,1.47)×10^(3) U/g Hb和0.82(0.71,1.0)×10^(3) U/g Hb。且SIRS组血清BChE水平在H8-H48期间一直低于对照组(P<0.05)。经Spearman相关分析,SIRS患者H24时血清BChE含量与APACHEII评分之间存在负相关关系(r=-0.381,P=0.009)。SIRS组中19例患者进展至MODS,其中15例发生在ICU H24~H48期间。MODS组患者H8-H48期间血清BChE水平一直低于非MODS组(P<0.05)。最后,利用H8和H12血清BChE预测MODS风险,ROC曲线结果显示,当H8 BChE≤0.98×10^(3) U/g Hb或H12≤0.76×10^(3) U/g Hb时,MODS进展风险大大增加,曲线下面积分别为0.748和0.838。结论CPB后SIRS患者血清BChE活性显著降低,CPB术后早期BChE耗竭与SIRS严重程度和MODS进展风险具有密切关系。 展开更多
关键词 体外循环 胆碱酯酶 全身炎症反应综合征 多器官功能障碍综合征
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血清胆碱酯酶、肝素结合蛋白和微小RNA-127检测对重症肺部感染预后的预测价值
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作者 王金娜 李红梅 +2 位作者 张杰 赵荣 宋蓓 《陕西医学杂志》 CAS 2024年第12期1685-1688,共4页
目的:探讨血清胆碱酯酶(S-ChE)、肝素结合蛋白(HBP)和微小RNA-127(miR-127)水平检测对重症肺部感染患者预后的预测价值。方法:选择重症肺部感染患者112例为观察组,另选取同期体检健康者100例为正常组,比较两组血清S-ChE、HBP、miR-127... 目的:探讨血清胆碱酯酶(S-ChE)、肝素结合蛋白(HBP)和微小RNA-127(miR-127)水平检测对重症肺部感染患者预后的预测价值。方法:选择重症肺部感染患者112例为观察组,另选取同期体检健康者100例为正常组,比较两组血清S-ChE、HBP、miR-127水平。根据预后情况将观察组患者分病死组和存活组,比较两组一般资料及血清S-ChE、HBP、miR-127水平。分析预后影响因素,以及血清S-ChE、HBP、miR-127水平对预后的预测价值。结果:正常组血清S-ChE水平高于观察组,HBP、miR-127水平低于观察组(均P<0.05)。本研究中,病死41例(病死组),存活71例(存活组),病死组急性生理与慢性健康评分(APACHEⅡ)、多器官功能障碍综合征评分(MODS)及血清HBP、miR-127水平高于存活组,氧合指数及血清S-ChE水平低于存活组(均P<0.05)。低氧合指数、低S-ChE、高HBP、高miR-127、高APACHEⅡ评分、高MODS评分为预后独立危险因素(均P<0.05)。血清S-ChE、HBP、miR-127对预后均有一定的预测价值,三项联合预测价值更高(均P<0.05)。结论:重症肺部感染患者血清S-ChE水平降低,HBP和miR-127水平升高,对预后均有一定的预测价值,且三项联合的预测价值更高。 展开更多
关键词 重症肺部感染 胆碱酯酶 肝素结合蛋白 微小RNA-127 预后 预测价值
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