细菌酯酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳技术研究

本文应用纸片法筛选出5种动物病原菌的醋酶同工酶阳性株，并对3种强阳性株应用PAGE进行酶谱测定。同时对这些细菌酯酶同工酶样品的提取及测定条件进行了摸索。结果表明：不同细菌酯酶同工酶酶谱存在着显著差异。这为某些细菌种鉴定提供一种方法。

LDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析植物过氧化物酶同工酶

以高粱和甘蓝型油菜叶片为材料,用十二烷基磺酸锂不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳(LDS-PAGE)检测过氧化物酶同工酶的结果表明,LDS-PAGE的酶带条数比非变性不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳(nativePAGE)明显增加,分辨率大大提高,上样量少,胶片易保存;比复性电泳(G-PAGE)的步骤简单,电泳后无需除去LDS即可直接按常规活性染色方法染色。

利用半干技术进行水平板不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳的同工酶分析

采用滤纸条半干技术进行水平板不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)的同工酶分析,提高了电泳的分辨率,缩短了电泳时间(从10-12h缩短到4-5h),简化了操作,节省了试验药品费用.

二氟沙星光敏损伤溶菌酶的十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳研究

本文采用稳态光照的方法研究了二氟沙星药物对溶菌酶生物大分子的光敏损伤。研究发现,在315~375 nm波长的光照射下,二氟沙星药物能够光敏损伤溶菌酶类大分子物质。通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析光照产物发现,生物大分子的光敏损伤途径和损伤产物与二氟沙星药物的浓度、光照时间、光照气氛等条件密切相关。其他条件相同时,二氟沙星浓度越高,光照时间越长,光照对溶菌酶的损伤越严重;三种不同气氛(氮气、空气、氧气)条件下,氧气气氛对溶菌酶的损伤最严重。通过对不同气氛条件下损伤机理的研究发现,在氮气气氛条件下为Ⅰ型光敏损伤机制,在有氧气氛条件下是I型和Ⅱ型反应协同作用的结果,并以Ⅱ型反应为主。

马铃薯过氧化物同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳技术研究

为了完善同工酶标记鉴定马铃薯品种技术,对聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分离马铃薯过氧化物酶(POD)同工酶的技术进行了研究。结果表明:马铃薯植株不同部位材料的聚丙烯酰胺凝胶电泳同工酶胶片经染色后,芽和茎的同工酶酶谱清晰、分辨力高,并且不同品种马铃薯酶谱差异明显。总之,马铃薯过氧化物同工酶电泳技术可用于马铃薯品种真实性鉴定和纯度检验。

血清α-醋酸萘酯酶同工酶琼脂糖凝胶电泳法及临床应用

为简化α－醋酸萘酯酶同工酶检查技术，建立琼脂糖凝胶电泳法。１０ｇ／Ｌ琼脂糖－ＰＶＰ和ｐＨ７．４０．１ｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液，泳池ｐＨ８．６，μ＝０．０６巴比妥缓冲液，滤纸刺槽加样，电压１５０Ｖ，电流２ｍＡ／ｃｍ电泳４０ｍｉｎ，搭桥填充染色。染色液由α－醋酸萘酯ｐＨ６．２０．１ｍｏｌ／ＬＰＢ液和固蓝Ｂ盐组成，３７℃染色２０ｍｉｎ，醋酸漂洗比色。结果对照组（ｎ＝３０）α－ＡＮＥ同工酶谱带３～４条（Ｅ１、Ｅ１ａ、Ｅ２、Ｅ３）着色强度Ｅ３＞Ｅ１＞Ｅ１ａ＞Ｅ２，ｘＥ３占８８％，Ｅ１～Ｅ２１２％左右，相对电泳位置Ｅ１：ｐｒｅＡｌ／Ａｌ，Ｅ１ａ：Ａｌ／α１，Ｅ２：ｐｒｅ－α２，Ｅ３：α２／β，Ｒｆ分别为０．５４５、０．５２７、０．４３６、０．３６４。Ｅ３区组成复杂，用ＮＡＮＡ酶水解和ＷＧＡ亲加试验证明它富含ＳＡ和ＧｌｃＮＡＣ的一组不均一的糖蛋白。谱形异常的典型病例有Ⅰ型在症糖尿病和部分肝癌患者，它除有正常谱带外，前者多Ｅ４和Ｅ５，其色度比（％）Ｅ４０．１１４，Ｅ５０．１９８，相对电泳位置在β和β与Ｐｒｅ－γ之间，Ｒｆ＝０．２５４，０．１８２。肝癌病人谱带也多１～２条（Ｅ５和Ｅ６）位于Ａ／ｐｒｅ－γ和ｐｒｅ－γ，?

超薄平板微型聚丙烯酰胺凝胶的等电聚焦电泳方法——介绍一种高效、快速的生物同工酶分析方法

介绍了一种简易、高效、快速的生物同工酶分析方法——超薄平板微型聚丙烯酰胺凝胶的等电聚焦电泳方法。该方法与目前国内外市场销售的同种用途等电聚焦的产品 (如BIO- RAD公司的 model1 1 1 Mini IEF Cell)相比 ,具有以下优点 :实验操作灵活 ,用途更广 ;谱带清晰 ;每次可实验的样本量大 ;电泳所需时间短 ;实验费用低 ;适用于多种酶系统的同工酶和等位酶分析 ;凝胶干燥不需任何设备且能长期保存 ;样本用量少。

不同产地桔梗的聚丙烯酰胺凝胶电泳指纹图谱鉴别研究

目的建立不同产地桔梗药材的聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)指纹图谱鉴别方法。方法蛋白质(Pro)、过氧化物酶同工酶(POD)、酯酶同工酶(EST)PAGE指纹图谱分析。结果不同产地桔梗的Pro-PAGE图谱差异极小;POD-PAGE与EST-PAGE图谱在谱带分布及数量上均具有显著性差异,分别具有各自的鉴别谱带。结论POD-PAGE与EST-PAGE指纹图谱可作为鉴别不同产地桔梗的有效方法。

豇豆品种同工酶聚丙烯胺凝胶电泳凝胶浓度的筛选

用凝胶浓度分别是７．５％和６．０％的聚丙烯酰胺凝胶系统对１２个豇豆品种的酯酶（ＥＳＴ）、淀粉酶（ａ—ＡＭＹ）和过氧化氢酶（ＣＡＴ）同工酶作电泳分忻．将两种不同浓度凝胶系统的电泳图谱作对比，得出豇豆品种的淀粉酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳应选择低浓度凝胶系统（６．０％），酯酶同工酶、过氧化二酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳应选择高浓度凝胶系统（７．５％），才能得到较高质量的凝胶电泳图谱的结论．

利用聚丙烯酰胺凝胶平板电泳对杂交细胞酯酶同功酶的分析研究

酯酶同功酶可作为遗传及表达活性的生化指标。本文利用柴胡和石防风两种药用植物 ,经过原生质体融合及组织培养后取其再生融合细胞的愈伤组织 ,采用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳方法 ,进行酯酶同工酶电泳图谱分析 ,可以测得杂交细胞基因重组后是否有新的酯酶 (蛋白质 )表达与出现 。

聚丙烯酰胺凝胶电泳实验的“集成化”研究

聚丙烯酰胺凝胶电泳是生物类相关专业学生必须掌握的一项实验技术。该项实验技术可以分析蛋白质及各种同工酶。教学实验中往往只能涉及蛋白质电泳或者是某一种同工酶的分析。为使学生能全面地掌握聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,本实验教学示范中心开展了聚丙烯酰胺凝胶电泳实验的"集成化"研究与实践,并取得了满意的效果。

浙江五种白蚁的聚丙烯酰胺凝胶电泳分析

白蚁分类,一般以兵蚁和有翅繁殖蚁的形态为依据,而工蚁形态分类较少。应用酯酶同工酶酯谱来研究白蚁种间,同种的各品级之间关系,有一定理论和实际意义。

黄颡鱼雌、雄个体血清蛋白、酯酶同工酶及血红蛋白的电泳分析

采用聚丙烯酰胺梯度凝胶垂直板(PAGE)电泳,对黄颡鱼雌、雄个体血清蛋白、酯酶同工酶(EST同工酶)及血红蛋白(Hb)进行了分析。结果表明:黄颡鱼雌、雄个体的血清蛋白存在明显差异,表现在B1区雄性个体比雌性个体多1条MI带,B2区雌性个体比雄性个体多1条MA带,少2条MI带,B3区雄性个体比雌性个体多1条MA带。另外在B2区雌、雄个体间MA带和MI带排列次序也有差异。血清EST雌、雄个体也有明显的差异,雄性黄颡鱼血清EST的酶谱出现了3条酶带无中强带,而雌性黄颡鱼EST的酶谱出现了7条酶带,有4条中强带。雌、雄个体Hb只能分离出1条谱带,并且雌、雄之间基本没有差异。

食用菌菌种纯度的酯酶同工酶电泳测定

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对平菇、草菇、白灵菇和灰树花4种食用菌的部分菌株的酯酶同工酶进行了分 析,结果表明,4种菇的特征谱带分别为平菇有9条;草菇4条;白灵菇5条;灰树花4条,并确定了其各菇种种内亲缘 关系。

中华绒螯蟹不同组织LDH同工酶凝胶电泳分析

采用高pH不连续系统聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳,特异性组织化学染色对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)的血清、肌肉、鳃、心脏、肝胰腺、精巢和精子等组织的乳酸脱氢酶(LDH)同工酶酶谱进行了研究。同时,利用2种底物(乳酸钠和α-羟基丁酸钠)进行了特异性反应,并对其精子特异性乳酸脱氢酶进行了研究。结果表明:以乳酸钠为底物时,中华绒螯蟹的肌肉、鳃、血清和心脏有2条谱带,而精巢和精子有3条谱带,但在肝胰腺中未发现谱带;以α-羟基丁酸钠为底物时,只在血清、精巢和精子发现有1条谱带。从而说明,中华绒螯蟹乳酸脱氢酶同工酶存在组织特异性;精子存在特异性乳酸脱氢酶。

电泳法分析食用菌酯酶同工酶方法的优化

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对所试验食用菌菌株酯酶同工酶酶谱进行了分析,并确定了其菇种种内亲缘关系。结果表明,采用电泳法分析酯酶同工酶的方法是十分有意义的。

罗非鱼与鲢乳酸脱氢酶及酯酶同工酶的电泳研究

运用电泳技术研究鱼类同工酶国内外报道较多，但对我国引进的几种罗非鱼各种组织中的乳酸脱氢酶(LDH)同工酶和酯酶同工酶的电泳研究，国内还少见。本文采用了聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳，对两种罗非鱼和鲢的LDH同工酶及酯酶同工酶进行了电泳研究。

三种分析水稻F_1代幼苗生长过程中酯酶同工酶变化的电泳方法比较

利用聚酯胶片作为凝胶支持物的超薄等电聚焦电泳(UTLIEF)研究水稻F1种子萌发过程中的酯酶同工酶多态性变化的结果表明,UTLIEF相比非变性不连续聚丙烯酰胺电泳(native-PAGE)和常规等电聚焦电泳(IEF)得到的酯酶同工酶图谱更清晰,酶带数目和强弱的多态性变化更高,用pH2～9的两性电解质时等电聚焦的电泳效果较好。

沙棘油口服液对游泳小鼠肝脏酯酶同工酶电泳谱带影响的实验研究

建立灌服沙棘油口服液小鼠的力竭性游泳训练实验模型 ,采用聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳的方法分析了不同组别小鼠肝脏酯酶同工酶 .结果表明 ,组间的酶谱差异不大 ,三组对照组酶带数目为 1 5条 ,而相应的沙棘油口服液组为 1 6条 ,酶带强度(IN)和酶带强度变化率 (PIC)