干燥方式对绿碎茶多酚提取物体外抗氧化和抗糖尿病及乙酰胆碱酯酶抑制活性的影响

研究不同干燥方式处理的绿碎茶多酚提取物体外抗氧化和抗糖尿病活性及对乙酰胆碱酯酶抑制作用。以绿碎茶为试验材料,采用蒸干结合真空干燥与真空冷冻干燥2种干燥工艺对绿碎茶乙酸乙酯萃取相进行干燥处理,比较研究了2种提取物的色泽,DPPH自由基、ABTS阳离子自由基、羟自由基(·OH)清除能力和铁离子还原能力以及α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶、乙酰胆碱酯酶的抑制能力和抗糖基化能力。结果表明,真空冷冻干燥绿碎茶多酚提取物(BGTE-FD)较蒸干结合真空干燥绿碎茶多酚提取物(BGTE-SVD)颜色相对偏黄,具有较强的DPPH自由基、ABTS阳离子自由基、·OH清除能力和铁离子还原能力,其IC_(50)值分别为2.64、5.17、247.01、27.73 mg/L。同时,BGTE-FD具有较高的α-淀粉酶、乙酰胆碱酯酶和α-葡萄糖苷酶抑制作用,IC_(50)值分别为85.84、416.45、4.38 mg/L,且其对α-葡萄糖苷酶的抑制能力显著强于阿卡波糖(IC_(50)值为929.59 mg/L)。此外,BGTE-FD和BGTE-SVD对晚期糖基化终产物抑制率分别高达65.28%和63.66%,略低于氨基胍(71.81%)。因此,真空冷冻干燥绿碎茶多酚提取物具有较强的体外抗氧化和抗糖尿病活性及一定的乙酰胆碱酯酶抑制能力,绿碎茶可作为降血糖和抗痴呆产品的潜在资源。

马醉木二萜成分及其乙酰胆碱酯酶抑制活性研究

为研究马醉木叶中的二萜成分及其乙酰胆碱酯酶抑制活性,该研究根据薄层色谱显色特征,使用硅胶、MCI和半制备高效液相等色谱技术对其进行分离与纯化,并通过波谱数据(NMR和MS)分析且结合文献报道数据进行对比,鉴定了所得化合物的结构,同时采用Ellman法首次对其乙酰胆碱酯酶抑制活性进行评价。结果表明:从马醉木叶中分离并鉴定了8个二萜化合物,分别是pierisformoside F(1)、3-epi-grayanotoxinⅩⅧ(2)、3-epi-grayanotoxin B(3)、asebotoxin-X(4)、pierisformosin B(5)、asebotoxinⅢ(6)、rhodojaponinⅢ(7)和pierisformosin C(8)。其中,化合物1为首次从该植物中分离得到,化合物8表现出乙酰胆碱酯酶抑制活性。综上表明,马醉木中含有丰富的二萜成分和活性成分。该研究结果丰富了马醉木的化学成分多样性,为其后续综合开发和利用提供了一定的理论依据,也为寻求更多的活性成分提供了借鉴。

果胶甲酯酶抑制剂的异源表达及其在果酒降甲醇中的应用

该文从猕猴桃中克隆出果胶甲酯酶抑制剂(Pectin Methylesterase Inhibitor,PMEI)基因,经EcoRI/XbaI双酶切后连接到表达载体pPICzαA上,电转化到毕赤酵母GS115筛选出阳性菌株GS115/pPICzαA-PMEI,并将重组酵母表达的PMEI浓缩纯化后应用于果酒发酵。研究结果表明:重组毕赤酵母表达菌株GS115/pPICzαA-PMEI成功构建,PMEI的发酵表达量为35.38 mg/L。将PMEI应用到果酒发酵中,桔子酒甲醇降低47.54%,含量由189.75 mg/L降低到99.55 mg/L;苹果酒甲醇降低21.52%,含量由118.15 mg/L降低到91.20 mg/L;葡萄酒甲醇变化不显著,含量均低于20.00 mg/L,表明PMEI对果胶丰富且内源性果胶酶强的桔子具有明显的降甲醇效果。桔子酒发酵工艺优化的PMEI最低抑制质量浓度8.84 mg/L,最适温度18℃,此时桔子酒中的甲醇降低66.40%到89.10 mg/L。这为低甲醇果酒的发酵提供了新的技术路线。

元宝草中一个新的间苯三酚及其乙酰胆碱酯酶抑制活性研究

目的研究元宝草化学成分及其乙酰胆碱酯酶抑制活性。方法元宝草二氯甲烷部位采用硅胶柱色谱、Sephedex LH-20、MCI和半制备HPLC等进行化分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用Ellman法测定其乙酰胆碱酯酶抑制活性。结果从中分离得到8个化合物,分别鉴定为元宝草素A(1)、hyperbeanin A(2)、hyperpatulol I(3)、hyperhenone I(4)、hypercohone G(5)、hyperbeanol G(6)、hyperlagarin A(7)、hyperascyrone D(8)。化合物抑制乙酰胆碱酯酶IC 50值均在1.16~5.15μmol/L之间。结论化合物1为间苯三酚类新化合物。所有化合物均具有一定程度的乙酰胆碱酯酶抑制活性,是阿尔茨海默病治疗药物的潜在活性先导化合物。

海洋天然产物Anithiactins C类似物的合成及胆碱酯酶抑制活性研究

设计并合成了3个海洋天然产物Anithiactins C类似物,利用核磁共振、X-单晶衍射技术以及红外光谱确认了化合物结构。单晶衍射结果表明,化合物2-(4-(苄氧基)苯基)-N,N-二丙基噻唑-4-甲酰胺属于三斜晶系,P-1空间群,化合物2-(4-(苄氧基)苯基)-N-环己基噻唑-4-甲酰胺属于单斜晶系,P21/c空间群。利用Ellman法检测了化合物的胆碱酯酶抑制活性,在此系列化合物中,化合物2-(4-(苄氧基)苯基)-N-环己基噻唑-4-甲酰胺表现出较好的乙酰胆碱酯酶抑制活性,IC50值为(53.99±0.13)μmol/L。分子对接结果表明该化合物同时作用于乙酰胆碱酯酶的远端阴离子结合位点和催化位点,可以作为双位点作用的乙酰胆碱抑制剂进一步开发。

喹啉-三嗪衍生物的设计合成及体外丁酰胆碱酯酶抑制活性

以2-(氯甲基)喹啉的盐酸盐为原料,经氧化,亲核取代反应得到结构新颖的喹啉-三嗪衍生物(5a-5f).运用IR、^(1)H NMR、^(13)C NMR和HRMS等表征手段确证所有化合物结构与设计一致.采用Ellman方法对目标化合物进行体外抑制丁酰胆碱酯酶活性测试,结果显示:所有化合物在80μmol/L下抑制率超过50%,其中化合物5e[IC_(50)=(1.71±0.04)μmol/L]活性最佳,强于阳性对照物多奈哌齐[IC_(50)=(12.69±0.07)μmol/L].进一步对5e与BuChE分子对接研究发现,结构中喹啉环和硫原子与酶活性位点残基Ser198、His438、Trp82和Thr120可通过氢键作用.因此,化合物5e是本研究中筛选出活性最好的结构,为阿尔茨海默病(AD)研究提供了新的结构方向.

乙酰胆碱酯酶抑制剂的研究进展

胆碱能假说为阿尔茨海默病的治疗提供了初步可行的方法,在增强胆碱能传递的不同治疗方法中,抑制乙酰胆碱酯酶(AChE)是目前改善本病胆碱能缺陷与症状的最成功的方法。本文综述了乙酰胆碱酯酶抑制剂(AChEI)的研究进展,分别介绍了用于药物治疗的乙酰胆碱酯酶抑制剂,以及一些尚在实验阶段的新型乙酰胆碱酯酶抑制剂。

新型胆碱酯酶抑制剂对AD大鼠空间记忆及海马结构胆碱能纤维的影响

目的探讨新型胆碱酯酶抑制剂(NAI)及水迷宫训练对AD大鼠海马结构胆碱能纤维的影响。方法用36只Wistar♂大鼠制作AD动物模型,随机分成3组:NAI组、石杉碱甲组(Hup组)、单纯损伤组(SO组)。水迷宫训练后,采用组织化学方法测定海马结构胆碱能纤维密度。结果①定位航行实验中,NAI组逃避潜伏期较SO组显著缩短(P<0.01)。②空间探索实验中,NAI组跨越各象限平台相应位置次数占总次数百分率较SO组明显增高(P<0.01)。③组化结果显示:NAI组海马结构胆碱能纤维密度较SO组明显增加(P<0.05)。尽管NAI组胆碱能纤维密度高于Hup组,但无统计学意义。结论经NAI治疗及水迷宫行为训练后的AD大鼠,海马结构内胆碱能纤维密度明显增加,提示NAI及水迷宫训练联合作用可促进AD大鼠海马结构胆碱能纤维重建。

杨梅素及其类似物抗氧化与乙酰胆碱酯酶抑制活性研究

目的:探讨杨梅素、杨梅苷及二氢杨梅素的抗氧化和乙酰胆碱酯酶抑制活性。方法:采用DPPH自由基清除和乙酰胆碱酯酶抑制高通量筛选模型进行研究。结果:杨梅素、杨梅苷和二氢杨梅素清除DPPH自由基的IC50值分别为18.34、28.89、10.70μg/mL,三种化合物的抗氧化活性均强于阳性药芦丁(IC50=31.32μg/mL),其中二氢杨梅素还强于VC(IC50=14.69μg/mL);在质量浓度为0.25mg/mL时,杨梅素、杨梅苷和二氢杨梅素对乙酰胆碱酯酶的抑制率分别为:30.66%±4.05%、38.48%±1.98%、78.81%±2.23%,其中二氢杨梅素对乙酰胆碱酯酶抑制作用较显著,其IC50值为1546±47.05μmol/L。结论:杨梅素、杨梅苷、二氢杨梅素均具有显著的DPPH自由基清除能力,本文首次报道二氢杨梅素具有较好的乙酰胆碱酯酶抑制活性,值得进一步深入研究。

胆碱酯酶抑制剂对化学性糖尿病影响的实验研究

目的探讨胆碱酯酶抑制剂对化学性糖尿病的影响。方法用胆碱酯酶抑制剂溴化斯的明对四氧嘧啶所致糖尿病家兔进行治疗观察。结果仅给予溴化斯的明治疗后,血清胆碱酯酶活性、空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(GHB)显著下降,而血清胰岛素(insulin)水平明显升高。结论血清胆碱酯酶抑制剂可以促进胰岛素的分泌,降低空腹血糖和糖化血红蛋白。

胆碱酯酶抑制剂对重症肌无力电生理学检查结果的影响

目的探讨胆碱酯酶抑制剂对重症肌无力(myasthenis gravis,MG)电生理学检查结果有无影响。方法对53例MG肌注新斯的明1.5 mg,每例均在注射前后依次进行临床绝对评分、右侧伸指总肌的单纤维肌电图(single fiber electromyography,SFEMG)和左侧桡神经低频重复电刺激(repetitive nerve stimulation,RNS)检查,比较用药前后各项指标的变化。结果发现用药前后SFEMG中平均颤抖(jitter)、异常电位对和阻滞电位对的比例均无统计学差异(P>0.05);与此同时用药后RNS波幅递减的幅度和临床绝对评分均较用药前显著降低(P均为0.000)。结论胆碱酯酶抑制剂对MG的SFEMG的各项指标均无明显影响,而能显著改善RNS结果和临床症状的评分。

胆碱酯酶抑制剂类神经性毒剂诱导的犬循环衰竭救治前后血流动力学及血液内血管活性物质的变化

目的 :在胆碱酯酶抑制剂中毒诱发犬循环衰竭的模型上 ,研究循环衰竭前后及N受体拮抗剂美加明与M受体拮抗剂阿托品救治后 ,动物血流动力学及血液中血管活性物质的变化规律。方法 :健康成年雄性杂种犬 ,体重 1 2～ 1 6kg。随机分为 4组 :对照组、美加明组、阿托品组、阿托品和美加明 (剂量比 1 0∶1 )联用组。肌肉注射敌敌畏诱发循环衰竭模型 ,观察染毒前、循环衰竭时、救治 1 5、60min等时点平均动脉压 (MAP)、心室内压最大上升速率 (+dp dtmax)、心室内压最大下降速率 (-dp dtmax)、心肌纤维缩短速度 (Vpm)等血流动力学指标的变化及血液中一氧化氮 (NO)、内皮素 (ET)、6 酮 前列腺素F1α(6 Keto PGF1α)等血管活性物质的变化。结果 :与染毒前相比 ,犬循环衰竭时 ,MAP以及反映心脏收缩功能的指标 (+dp dtmax、Vpm)和反映心脏舒张功能的指标 (-dp dtmax)均显著下降 (P <0 .0 1 ) ,此时NO、ET和 6 Keto PGF1α 等血管活性物质则显著升高(P <0 .0 1 ) ;美加明与阿托品合用治疗 1 5min时上述血流动力学指标及血管活性物质即显著好转 ,60min时基本恢复正常 ,疗效均明显好于单用阿托品、美加明组。结论 :血浆NO、ET、6 Keto PGF1α 等血管活性物质的升高水平与胆碱酯酶抑制剂类神经性毒剂诱导的犬循环衰竭程度?

宾赛克嗪拮抗M和N胆碱受体的特征及其抗胆碱酯酶抑制剂的毒性效应

目的评价宾赛克嗪(benthiactzine)对胆碱受体功能拮抗作用及其对有机磷农药中毒的抗毒效应,并与阿托品比较。方法①以烟碱诱发小鼠惊厥,离体豚鼠回肠收缩为评价中枢和外周神经元N受体功能的指标;以槟榔碱诱发小鼠震颤为评价中枢M受体功能的指标;以槟榔碱和毛果芸香碱诱发小鼠流涎,乙酰胆碱和氧化震颤素诱发回肠收缩为评价外周M受体功能的指标;并在烟碱和毛果芸香碱联用诱发混合性震颤模型上,研究药物的药理学特点。②在DDVP染毒小鼠模型上研究药物的抗毒效应(PR值)。结果①宾赛克嗪抗槟榔碱致小鼠中枢性震颤的ED50±L95为(0.31±0.06)mg.kg-1,中枢抗M作用比阿托品(1.33±0.17)mg.kg-1强3.3倍。②宾赛克嗪抗槟榔碱和毛果芸香碱诱发小鼠流涎的ED50±L95分别为(0.38±0.09)mg.kg-1和(5.57±1.30)mg.kg-1,而阿托品分别为(0.17±0.03)mg.kg-1和(0.46±0.18)mg.kg-1,宾赛克嗪的外周抗M作用弱于阿托品。③宾赛克嗪抗烟碱诱发惊厥的ED50±L95为(2.87±0.76)mg.kg-1,具有较强的中枢抗N作用。④宾赛克嗪抗烟碱诱发回肠收缩的IC50±L95为(1.1±0.18)μmol.L-1,比阿托品(13.84±1.68)μmol.L-1强约13倍,说明宾赛克嗪具有外周神经元N受体拮抗作用。⑤宾赛克嗪抗毛果芸香碱和烟碱联用诱发小鼠震颤的ED50±L95为(2.64±0.35)mg.kg-1,比阿托品(4.95±0.65)mg.kg-1强约1倍。⑥宾赛克嗪和阿托品抗DDVP致死作用的ED50±L95分别为(2.87±0.40)mg.kg-1和(6.78±3.92)mg.kg-1;宾赛克嗪10 mg.kg-1可使小鼠抗DDVP中毒的PR值提高16.84倍,而阿托品仅能提高0.81倍。结论宾赛克嗪中枢抗M作用强于阿托品,外周抗M作用弱于阿托品,并具有中枢和外周神经元N受体拮抗作用;宾赛克嗪对敌敌畏中毒小鼠的抗毒效应明显强于阿托品。

新一代治疗阿尔茨海默病的胆碱酯酶抑制剂多奈哌齐

多奈哌齐是六氢哌啶衍生物 ,为可逆性乙酰胆碱酯酶抑制剂 ,对胆碱酯酶有极高的选择性。对轻 中度阿尔茨海默病患者的临床症状有较好的改善作用 ,临床试验尚未发现与其他药物有相互干扰作用。该药半衰期长 ,不良反应轻微 。

新型乙酰胆碱酯酶抑制剂对阿尔茨海默病大鼠行为记忆的作用

目的探讨新型乙酰胆碱酯酶抑制剂(novel AChE inhibitor,NAI)对阿尔茨海默病(AD)大鼠空间记忆行为的影响,为AD病人的临床治疗提供可信的行为学资料.方法实验选用48只3～5月龄Wistar雄性大鼠,随机分为4组(n=12):NAI组、石杉碱甲(Hup) 组、单纯损伤(SO)组,空白对照组,将前3组大鼠切断穹隆-海马伞制作AD动物模型,然后分别进行Morris水迷宫实验.结果定位航行实验中,NAI组寻找水下平台的逃避潜伏期较SO组显著缩短(P＜0.01).空间探索实验中,各象限游泳距离占总距离百分率和跨越各象限平台相应位置次数占总次数百分率,NAI组均较SO组明显增高 (P＜0.01).结论 AD大鼠经过NAI治疗及水迷宫行为训练后,可显著改善其对空间学习记忆的能力,提示NAI对AD大鼠具有一定的治疗作用.

胆碱酯酶抑制剂TAK-147对大鼠空间记忆的作用

目的 :评价一个新的胆碱酯酶抑制剂 TAK- 14 7对大鼠空间学习记忆的作用。方法 :用水迷宫来评价大鼠空间学习记忆 ,用开场实验方法来分析大鼠的自发活动能力。结果 :在学习过程中 ,腹腔内注射东莨菪碱 (0 .4mg/ kg)明显造成了大鼠空间学习记忆障碍 ,延长了其上台潜伏期。腹腔内注射 TAK- 14 7能剂量依赖性地改善东莨菪碱造成的学习障碍 ,在 0 .3和 1.0 mg/ kg的剂量具有显著性意义。在记忆再现过程中 ,由东莨菪碱 (1.5 mg/kg)造成的上台潜伏期延长也分别被 TAK- 14 7(0 .3mg/ kg和 1.0 mg/ kg)和他克林 (3.0 mg/ kg和 5 .0 mg/ kg)明显逆转 ,且 TAK- 14 7的作用强于他克林。在开场实验中 ,TAK- 14 7组与东莨菪碱组或生理盐水组比较 ,自发活动能力没有明显改变。结论 :TAK- 14 7作为一个新的胆碱酯酶抑制剂 ,能明显改善东莨菪碱造成的大鼠空间学习记忆障碍。

大果榕果实乙醇提取物抗氧化活性及对α-葡萄糖苷酶和乙酰胆碱酯酶抑制活性

研究大果榕果实的多酚含量及其抗氧化活性、α-葡萄糖苷酶和乙酰胆碱酯酶抑制活性,为其进一步开发利用奠定基础。以采自海南保亭七仙岭的大果榕果实为实验材料,用体积分数65%的乙醇提取大果榕果实多酚,采用Folin-酚法测定总酚含量。对获得的大果榕果实多酚进行1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(2,2’-azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate),ABTS)自由基、羟自由基(·OH)清除率以及α-葡萄糖苷酶抑制活性和乙酰胆碱酯酶抑制活性测定。结果表明:大果榕果实多酚含量较高,达1.92 mg/g(以干质量计),其对DPPH自由基、ABTS+·和·OH均具有显著的清除活性,且呈质量浓度依赖性,IC50值分别为141.25、91.20、45.71μg/m L;大果榕果实多酚对α-葡萄糖苷酶抑制活性强于阳性对照阿卡波糖,且呈现明显的质量浓度依赖性,IC50值为102.33μg/m L;同时大果榕果实多酚对乙酰胆碱酯酶也具有一定的抑制活性,IC50值为4.9 mg/m L。研究结果表明大果榕果实多酚具有良好的抗氧化性、α-葡萄糖苷酶抑制活性和一定的乙酰胆碱酯酶抑制活性。

胆碱酯酶抑制剂治疗老年认知功能障碍患者的效果及其安全性分析

目的观察胆碱酯酶抑制剂治疗老年认知功能障碍的临床效果和安全性。方法选取2015年1月—2016年1月陕西省安康市中心医院神经内科收治的老年认知功能障碍患者72例作为研究对象,按随机数字表法分为观察组36例和对照组36例。对照组给予富马喹硫平片,初始剂量50 mg/d,睡前服用,逐渐增至100~400 mg/d;观察组在对照组基础上联合应用盐酸多奈哌齐片,初始剂量2.5~5 mg/d,睡前口服,1周以后增加至10 mg/d。2组患者疗程均为8周。比较2组患者临床效果,分别于治疗前后采用简易精神状态量表（MMSE）、AD评估量表认知分量表（ADAS-cog）、日常生活功能量表（ADL）及认知功能障碍病理行为评定量表（BEHAVE-AD）对认知功能进行评定。抽血测定过氧脂质（LPO）、超氧化物歧化酶（SOD）水平,并记录2组患者不良反应。结果治疗后观察组总有效率为94.4%（34/36）,显著高于对照组的77.8%（28/30）,差异有统计学意义（χ^2=4.181,P=0.041）;与对照组比较,观察组MMSE评分、血清SOD水平明显提高,ADAS-cog、ADL、BEHAVE-AD评分及血清LPO水平显著降低,差异均有统计学意义（t=5.269、1.753、4.797、4.380、2.459、1.723,P=0.000、0.041、0.000、0.000、0.000、0.044）;2组患者治疗过程中均出现嗜睡、恶心、神经麻痹、肌张力增高、兴奋、便秘及肝功能异常等症状,各种不良反应发生率比较差异无统计学意义（χ^2=0.997、0.997、3.017、2.060、0.997、0.504、0.997,P=0.318、0.318、0.082、0.151、0.318、0.448、0.318）。结论胆碱酯酶抑制剂治疗老年认知功能障碍患者疗效确切,不良反应小,安全可靠,值得临床推广应用。

远志皂苷碱水解产物对乙酰胆碱酯酶抑制活性的研究

目的对远志皂苷碱水解产物及其主要化学成分的乙酰胆碱酯酶抑制活性进行研究。方法运用薄层色谱(TLC)-生物自显影和微孔高通量筛选技术,测定远志皂苷碱水解产物、细叶远志皂苷、黄花倒水连皂苷A、3,4,5-三甲氧基肉桂酸、对甲氧基肉桂酸和肉桂酸对乙酰胆碱酯酶的抑制活性。结果远志皂苷碱水解产物表现出明显的乙酰胆碱酯酶抑制作用;细叶远志皂苷和黄花倒水连皂苷A表现出一定的乙酰胆碱酯酶抑制作用,但是活性有限;3,4,5-三甲氧基肉桂酸、对甲氧基肉桂酸和肉桂酸没有表现出对乙酰胆碱酯酶的抑制作用。结论通过乙酰胆碱酯酶抑制实验,明确了远志皂苷碱水解产物的体外活性,为开发抗早老年性痴呆的药物提供了科学依据。