组蛋白去乙酰化酶6介导血清饥饿条件下LC3B-Ⅱ的去乙酰化作用

自噬是哺乳动物细胞内控制错误折叠蛋白和受损细胞器降解的重要机制,营养、氨基酸以及细胞因子的缺乏均能诱导自噬.在自噬的信号通路中,一些自噬蛋白已被证明受到乙酰化修饰的调控,进而影响其催化活性的发挥.但是没有研究证明微管结合蛋白1轻链3(LC3)是否受到乙酰化调控.该研究证明了在血清饥饿诱导的自噬过程中,LC3B-Ⅱ的乙酰化程度大幅降低.HDAC6特异性抑制剂tubacin处理细胞后,LC3B-Ⅱ的乙酰化修饰程度随之升高.同时,血清饥饿条件下,抑制HDAC6的催化活性降低了自噬通路的降解能力.该研究结果表明在血清饥饿诱导的自噬过程中,LC3B-Ⅱ发生去乙酰化,其去乙酰化调控蛋白可能是HDAC6,抑制HDAC6的催化活性会减少自噬途径蛋白的降解.HDAC6介导的LC3乙酰化修饰为自噬降解和自噬蛋白调控的研究提供了新思路.

酰化作用刺激蛋白的研究进展

酰化作用刺激蛋白是脂肪细胞合成和分泌的一种小分子量碱性蛋白质，由补体C3a脱去羧基末端的精氨酸里而生成，能刺激脂肪细胞合成三酰甘油。本文就其生物学特性、合成与分泌的调节以及病理生理学意义等作一介绍。

Sir2家族去乙酰化作用和糖尿病关系研究进展

沉默信息调节因子（silent information regulator,Sir2）起初是Klar等在酵母转录基因研究中发现的一个影响酵母交配能力的Mar1基因[1],随后研究确定其参与交配型基因、端粒区和rDNA沉默、rDNA重组的抑制及DNA损失的修复。

乙酰化作用在自噬调控中的功能和分子机制

自噬是指细胞消化自身蛋白质或细胞内结构（细胞器）的一种自食现象。自噬作为一种进化上非常古老和保守的代谢途径．参与降解、消除和消化受损、变性、衰老和失去功能的细胞器和变性蛋白质等生物大分子．为细胞的生存和修复提供必需的能量。

醇类的乙酰化作用

很多醇在氯化硅存在下用醋酐进行乙酰化作用，所有反应在完全非均相条件下，在室温下进行。

苯并噁唑-2-硫酮和苯并噻唑-2-硫酮的酰化作用和烷氧基羰基化作用

根据酰化剂的种类和组分，苯并噁唑-2-硫酮和苯并噻唑-2-硫酮用醋酐和酰基氯进行酰化作用生成N-酰基和／或S-酰基衍生物。苯并噁唑-2-硫酮用芳烷基氯碳酸酯进行烷氧基羰基化作用主要生成N-烷氧基羰基衍生物。而苯并噻唑-2-硫酮用芳烷基氯碳酸酯进行烷氧基羰基化作用，仅仅生成S-烷氧基羰基衍生物。在醇存在下，N-酰基衍生物光解生成苯并噁唑-2-硫酮或苯并噻唑-2-硫酮和酯。

沉默信息调节因子2介导蛋白质去乙酰化与卵母细胞衰老

女性卵巢衰老远比机体其他器官衰老要早。随着人类生育年龄的推迟,卵巢衰老导致的不孕症所占比重越来越大。卵巢衰老是以卵母细胞的数量和质量下降为特征的一个自然生理过程。近年研究发现,沉默信息调节因子2(silence information regulator 2,SIRT2)介导非组蛋白和组蛋白去乙酰化,参与了卵母细胞衰老过程。哺乳动物卵泡中与年龄相关的SIRT2水平降低易致减数分裂缺陷,从而产生低质量的卵母细胞,影响妊娠结局。卵巢衰老是高龄不孕女性不可避免的自然生理过程,尽管目前辅助生殖技术为高龄不孕女性带来了福音,但低质量的卵母细胞也会影响辅助生殖技术的结局。综述SIRT2的定位、SIRT2与卵母细胞减数分裂的关系以及SIRT2在其中的主要作用,进一步介绍SIRT2介导间隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)、组蛋白H4第16位赖氨酸(H4K16)、α-微管蛋白(α-tubulin)、BUBR1和叉头框蛋白O3a(forkhead box O3a,FOXO3a)等蛋白质去乙酰化参与减数分裂过程所涉及的相关信号通路,为防治卵母细胞衰老提供新的思路。

大黄素调控组蛋白乙酰化促进HpG2肝癌细胞焦亡及凋亡的发生

目的 研究天然产物大黄素是否能够影响HpG2肝癌细胞中组蛋白乙酰化水平,进而加速肝癌细胞焦亡和凋亡,为肝癌的治疗提供新的靶点。方法 CCK-8法检测不同浓度大黄素对Hp G2细胞活力的影响;生物信息学分析TCGA数据库中肝癌患者组蛋白乙酰化相关基因表达情况,验证候选基因赖氨酸乙酰基转移酶2A(KAT2A)与细胞凋亡通路的相关性;实时荧光定量PCR(q PCR)检测Hep G2细胞与L02细胞KAT2A m RNA水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大黄素对Hp G2细胞中组蛋白乙酰转移酶(HAT)、组蛋白去乙酰转移酶(HDAC)、白细胞介素(IL)-1β、IL-18的影响;流式细胞术检测大黄素对肝癌细胞凋亡的影响;Western blot检测细胞凋亡、细胞焦亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2-相关X蛋白质(Bax)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶1(Caspase-1)、Gasdermin家族成员D N端(GSDMD-N)及KAT2A的表达情况。结果 大黄素能降低Hp G2细胞活性,半抑制浓度(IC_(50))95%置信区间为58.12~66.52μmol/L。与正常肝组织相比,组蛋白乙酰化相关基因m RNA水平在肝癌组织中表达增高,且KAT2A变化倍数最大[log_2(Fold Change)=2.010,P<0.01];在肝癌组织中,KAT2A m RNA的表达与细胞凋亡通路呈负相关(r_s=-0.230,P<0.01)。与L02细胞相比,KAT2A m RNA在Hep G2中表达升高(P<0.05);与对照组相比,大黄素干预组HAT和HDAC的表达水平下降,IL-18、IL-1β表达水平水平增高,细胞凋亡率升高,KAT2A、BAX的表达降低,Bcl-2、NLRP3、GSDMD-N及Caspase-1表达水平升高(P<0.05)。结论 大黄素可抑制肝癌细胞活力,加速细胞凋亡和焦亡,其机制可能与调控KAT2A表达相关。

高三酰甘油血症患者调脂治疗前后酰化作用刺激蛋白和瘦素水平的变化

目的 :探讨高三酰甘油 (TG)血症患者调脂治疗前后酰化作用刺激蛋白 (ASP)和瘦素 (leptin)水平的变化及其意义。方法 :选取单纯高TG血症患者 38例 ,其中男 16例 ,女 2 2例 ,服用吉非贝齐 ,每次 0 .6 g ,每天 2次 ,服用 1个月 ,观察其治疗前后血脂、ASP及leptin水平的变化。ASP的检测采用三明治Elisa法 ,leptin采用放免药盒测定 ,血脂全套采用药盒测定。结果 :治疗前 ,男、女组之间ASP水平差异无显著意义〔(5 1.2 6± 19.5 3)∶(5 3.9± 2 6 .72 )mmol/L ,P >0 .0 5〕 ,但男性leptin水平显著低于女性患者〔(17.4 3± 6 .5 2 )∶(2 3.4 1± 8.35 ) μg/L ,P <0 .0 5〕。采用吉非贝齐治疗 1个月后 ,血TG、载脂蛋白B及男、女性ASP水平〔(39.5 0± 18.34)、(4 0 .5 4±2 3.4 0 )mmol/L〕明显下降 (均P <0 .0 1) ,HDL C明显升高 (P <0 .0 0 1) ,但男、女性leptin水平变化不显著〔分别为 (14 .34± 6 .12 )、(2 1.76± 5 .86 ) μg/L ,均 P >0 .0 5〕。而无论治疗前后 ,ASP水平与TG水平呈正性相关。结论 :ASP水平受血TG水平的影响 ,ASP与leptin水平之间不存在相增相减的关系 ,ASP对血TG水平起着重要的调控作用 ,leptin对血TG的影响可能更为复杂。

结核分枝杆菌乙酰转移酶fadA3对宿主蛋白乙酰化修饰及其体内存活影响的研究

目的:探讨结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)乙酰转移酶fadA3对宿主蛋白乙酰化修饰、基因表达和MTB在体内存活的影响。方法:从首都医科大学附属北京胸科医院/北京市结核病胸部肿瘤研究所分子生物学实验室选取MTB标准株(H37Rv),利用CRISPR-cas系统辅助的非同源性末端接合技术(CRISPR-NHEJ)构建H37Rv-fadA3基因敲除株(ΔfadA3),利用微孔板法分别检测H37Rv和ΔfadA3在7H9液体培养基中的吸光度值(A值)和细菌活性,绘制生长曲线图和最低抑菌浓度表。运用免疫印迹和转录组学测序分析H37Rv和ΔfadA3感染巨噬细胞(巨噬细胞系THP-1分化得到)后蛋白质乙酰化修饰变化及基因表达的差异情况;采用菌落计数和苏木精-伊红染色法分析H37Rv和ΔfadA3在C57BL/6J小鼠肺组织和巨噬细胞中的存活及病理变化。结果:fadA3经敲除1116 bp片段后成功获得ΔfadA3敲除株。H37Rv和ΔfadA3在培养第3、6、9和12天的A 600值(分别为0.245±0.005和0.232±0.013、0.403±0.122和0.385±0.009、0.444±0.010和0.442±0.005、0.675±0.027和0.662±0.026)差异均无统计学意义(t值分别为1.623、2.351、0.178、0.848,P值均>0.05);二者对异烟肼、乙胺丁醇、链霉素、左氧氟沙星、PA-824、利奈唑胺、氯法齐明、利福平、贝达喹啉、德拉马尼等一线/二线抗结核药物的90%最低抑菌浓度相同(分别为0.006、2.000、0.313、0.156、0.250、0.625、1.250、0.003、0.125、0.320μg/ml)。H37Rv感染巨噬细胞中全蛋白乙酰化修饰灰度值(243.100±7.125)与未感染组(204.800±9.348)和ΔfadA3感染组(154.500±14.890)的差异均有统计学意义(t=5.294,P=0.013;t=9.350,P=0.003)。与H37Rv相比,ΔfadA3感染上调的差异基因有94个,下调有7个。同时,在巨噬细胞模型(72 h)和小鼠肺组织中(28 d),H37Rv感染后的菌落形成单位计数[分别为(41.000±4.583)×10^(4)和log 10(5.531±0.203)]与ΔfadA3感染[(18.670±1.155)×10^(4)和log 10(4.541±0.276)]的差异均有统计学意义(t=8.815,P=0.001;t=6.466,P<0.001);ΔfadA3感染小鼠肺组织病理炎症性浸润较H37Rv感染小鼠明显减弱。结论:抗结核药物对ΔfadA3敲除株与H37Rv的杀菌效果一致。fadA3可显著调控宿主蛋白乙酰化修饰和基因表达,可能是维持H37Rv在巨噬细胞胞内和小鼠肺组织中存活,并导致肺组织炎症性浸润的重要毒力因子。这些发现将为靶向fadA3和宿主蛋白乙酰化的宿主导向治疗提供理论数据。

气态下四唑与恶二唑的转化:N-酰化作用中间产物的隔离与描述

5取代四唑环在气相下与质谱化学电离源等离子体二次反应所产生的酰基离子作用 ,在产物离子中有被认为是重排的 2 ,5双取代 1,3,4恶二唑存在。用在凝相下反应获得的 2 ,5双取代 1,3,4恶二唑衍生物谱图与5取代四唑衍生物和酰基等离子体反应产生的恶二唑衍生物谱图相比较来证实它的结构。在这个转变过程中有一个在凝相下不能被隔离的酰化了的四唑中间体参与 ,在重排之后 ,氮 (N)丢失 ,形成恶二唑衍生物。在现有条件下 ,我们能够在第一自由场区隔离中间产物离子并利用碰撞诱导分裂

O-乙酰化作用的趋同性

C群脑膜炎奈瑟菌是一种人类病原菌它在世界范围内已引发多例脑膜炎和脓肿疾患。这种特殊的血清型病菌被外层的a-2，9-连接的多聚唾液酸碳水化合物所保护，而多聚唾液酸进而又为O-乙酰化作用所修饰．这种乙酰化作用被OatC酶所催化。OatC酶与其他酶在顺序上没有相似性．所以本文作者就启动了此项研究对重组体OatC进行纯化．对它进行详尽的特征鉴定。

乙酰化竹材的制备及其热塑性研究(英文)

利用三氯乙酸作为预处理剂,超声波作用后以乙酸-乙酸酐作酰化剂对竹材进行乙酰化改性,并总结出竹材的乙酰化最佳反应条件。利用FT-IR、DSC、SEM等对乙酰化竹材的微观结构和热塑性进行了研究和表征,并对三氯乙酸活化竹材的机理进行了讨论。此外,乙酰化竹材在温度为130℃,热压压力为10MPa时可以单独热压成片,显示出良好的热塑性。为改性竹材在新材料领域的应用提供了理论依据。图7参7。

长链脂肪族双酰基己二酰二肼衍生物的合成及其金属减活作用

合成了 4种己二酰二肼的长链脂肪族双酰基衍生物 :N ,N′ 二戊酰基己二酰二肼 ,N ,N′ 二庚酰基己二酰二肼 ,N ,N′ 二辛酰基己二酰二肼和N ,N′ 二月桂酰基己二酰二肼。条件实验表明 :当己二酰二肼用量为 8 8g(0 0 5mol) ,酰氯 0 12 5mol,Na2 CO3 5 3g(0 0 5mol) ,CCl4 40mL ,反应时间 3h ,酰化物最高产率可达 86 4%。热烘箱老化实验表明它们都具有显著的金属减活作用 :在 15 0℃条件下 ,相应试样的耐老化时间分别为 436h、489h、5 16h和 2 5 5h ,均高于我国电缆行业标准要求的 16

组蛋白乙酰化修饰在基因表达调控中的作用机制

表观遗传学是指DNA序列变化以外的可遗传的基因表达改变,这种影响基因转录活性而不涉及DNA序列改变的基因表达调控方式称为表观转录调控,组蛋白乙酰化修饰是基因表观转录调控的重要机制。组蛋白翻译后修饰所引起的染色质结构重塑在真核生物基因表达调控中发挥着重要的作用。组蛋白乙酰化主要由组蛋白乙酰化酶(histone acetylases,HATs)和组蛋白去乙酰化酶(Histone deacetylases,HDACs)催化完成,HATs通过在组蛋白赖氨酸残基乙酰化,激活基因转录,而HDACs使组蛋白去乙酰化,抑制基因转录。组蛋白乙酰化和去乙酰化与基因的表达调控密切相关,HATs和HDACs之间的动态平衡控制着染色质的结构和基因的表达,组蛋白乙酰化状态的失衡与肿瘤发生密切相关。最近有研究发现,肿瘤细胞的组蛋白大部分呈低乙酰化状态。组蛋白乙酰化修饰对基因表达调控及其在肿瘤发生发展中的作用具有重要意义。因此,基于细胞内组蛋白乙酰化调控机制设计开发抗肿瘤药物成为研究热点。组蛋白去乙酰化酶抑制剂可以增强细胞内组蛋白乙酰化状态,从而改变肿瘤的生物学特性,而且去乙酰化酶抑制剂作用靶点是整个基因组而不是单个基因,所以去乙酰化酶抑制剂在肿瘤治疗中具有较好的应用前景。

组蛋白乙酰化修饰在骨髓间充质干细胞向平滑肌细胞分化中的作用

目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)在平滑肌微环境中发生分化后平滑肌标志性基因乙酰化水平的变化,以及组蛋白乙酰化修饰在干细胞分化中的作用及机制。方法体外培养BMSCs和膀胱平滑肌细胞(BSMCs),选择同批次的第3代BMSCs,将与BSMCs共培养3d的BMSCs作为实验组,未经共培养的BMSCs作为对照组,采用RT-PCR检测两组BMSCs中平滑肌α肌动蛋白(α-SMA)、钙调节蛋白(calponin)、平滑肌肌球蛋白重链(SM-MHC)的表达丰度。采用条件为80%、20次、0.5 s、8个循环的超声破碎实验组及对照组BMSCs的DNA,以H3K9抗体结合特定乙酰化位点,采用免疫共沉淀技术(ChIP)沉淀BMSCs组蛋白乙酰化位点基因,接头PCR扩增所获基因,Real-time PCR检测所获基因中3种目的基因(α-SMA、Calponin、SM-MHC)的表达水平。结果 RT-PCR检测结果显示,实验组BMSCs中的平滑肌标志性基因(α-SMA、Calponin、SM-MHC)的mRNA表达水平较对照组明显增高[分别为0.176±0.003 vs. 0.070±0.002,0.079±0.002vs.0.051±0.003,0.091±0.004vs.0.034±0.001],差异均有统计学意义(P<0.01)。分光光度计检测ChIP后获得的DNA,结果表明H3K9乙酰化抗体沉淀所获DNA浓度高于Ig G抗体,且实验组高于对照组(P<0.05)。RealtimePCR分析BMSCs分化前后目的基因组蛋白H3K9乙酰化水平,结果显示,BMSCs分化后,实验组的平滑肌标志性基因α-SMA、calponin、SM-MHC的mRNA转录水平明显高于对照组[分别为9.26±5.03 vs. 1.01±0.05,2.33±0.65 vs.0.99±0.05,2.63±0.37vs.1.00±0.03],差异均有统计学意义(P>0.05)。结论在平滑肌微环境中,BSMCs特定位点H3K9乙酰化程度的增加可促进BMSCs向BSMCs的分化。

外周血CD4^+T细胞组蛋白乙酰化在狼疮性肾炎中的作用

目的研究狼疮性肾炎(LN)患者外周血CD4+T细胞组蛋白乙酰化水平,探究其在LN发病中的作用。方法 18例LN患者均来自该科病房,全部患者都达到美国风湿学会1997年推荐的系统性红斑狼疮(SLE)的分类诊断标准。满足以下条件为活动性的LN,蛋白尿大于0.5g/d,或活动性尿沉渣改变(血尿红细胞超过5个/Hp,或脓尿白细胞大于5个/Hp,或细胞管型大于1个/Hp),血肌酐升高大于1.2mg/L,排除感染、肾结石和其他原因引起的。非活动的LN:蛋白尿小于0.5g/L,非活动性的尿沉渣。将LN患者分为两组:非活动性(I组)8例、活动性的LN组(A组)10例,对照组(N组)8例。分别采集LN患者和N组的外周血50mL,密度梯度离心法(Ficoll法)分离出外周血中的单个核细胞,采用免疫磁珠技术分选出CD4+T细胞,并提取组蛋白,采用组蛋白H3/H4乙酰化检测试剂盒检测组蛋白H3/H4的乙酰化水平,分析组蛋白H3/H4乙酰化水平及与疾病的关系。结果 (1)与N组相比,A和I组LN患者外周血CD4+T细胞的组蛋白H3、H4均呈低乙酰化状态(P<0.01);(2)A组的组蛋白H4的乙酰化水平低于I组(P<0.01),而组蛋白H3乙酰化水平两组间差异无统计学意义(P>0.05)。(3)组蛋白H4的乙酰化水平与24h尿蛋白排泄量呈负相关(r=-0.661,P<0.05)。结论在LN患者中的CD4+T细胞组蛋白H3和组蛋白H4均呈低乙酰化状态可能参与了LN的发病,CD4+T细胞组蛋白H4的乙酰化水平可能与LN的活动性有关。

蛋白质乙酰化对HBV复制的影响

目的探讨宿主细胞蛋白质乙酰化修饰对HBV复制的影响。方法采用去乙酰化酶抑制剂制滴菌素A(TSA)和尼克酰胺(NAM)刺激HBV复制细胞模型Hep G2.2.15和Hep AD38,并检测细胞内的HBV复制指标。采用Western Blot检测广谱乙酰化蛋白和乙酰化组蛋白H3的表达水平。结果 TSA和NAM刺激细胞会引起细胞内蛋白质的乙酰化水平升高,且乙酰化修饰水平增高呈时间和浓度依赖的变化趋势。两种细胞受TSA和NAM刺激的影响,培养上清中的HBs Ag水平降低,而HBV DNA水平升高,且呈时间和浓度依赖关系,而两种细胞培养上清中的HBe Ag和细胞内核心颗粒DNA的表达水平变化趋势不明显。结论宿主蛋白质的乙酰化可能参与和影响了细胞内HBV的复制过程,进一步深入分析和鉴定影响HBV胞内复制的宿主乙酰化蛋白质将有助于加深对HBV复制调控的认识,为开发特异性抗病毒策略提供新思路。

多囊卵巢综合征中翻译后修饰的研究进展

多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是常见的女性内分泌紊乱性疾病之一,其具体发病机制尚不明确,可能受到表观遗传和环境等多种因素的影响。近年来,PCOS的患病率持续增加,导致患者的生活质量出现不同程度地下降,因此积极探索新的治疗方案十分必要。蛋白质翻译后修饰(post-translational modification,PTM)是调节蛋白质功能的重要方式,研究发现磷酸化修饰与PCOS胰岛素抵抗密切相关,乙酰化修饰的研究多聚焦于PCOS卵母细胞质量方面,而甲基化修饰则与PCOS脂质代谢异常密不可分。探索PTM在PCOS发生、发展中的作用可能有助于为疾病的靶向治疗提供新思路。