经α-半乳糖酰基鞘氨醇体外扩增Vα24自然杀伤T细胞的生物学特性

目的建立α-半乳糖酰基鞘氨醇(α-GalCer)诱导Vα24自然杀伤T(NKT)细胞体外扩增方法,评价其生物学特性。方法将26份脐带血或外周血标本分为3组:A1组(n=5):脐带血单个核细胞(MNC)在负载α-GalCer的脐带血前体细胞源性树突状细胞(DC)刺激下诱导扩增Vα24NKT细胞;A2组(n=5):外周血MNC在负载α-GalCer的外周血单核细胞来源DC(Mo-DC)刺激下诱导扩增Vα24NKT细胞;B组(n=16):在外周血MNC中直接添加α-GalCer,诱导扩增其中的Vα24NKT细胞。采用MTT法检测NKT细胞增殖能力、肿瘤细胞杀伤活性和混合淋巴细胞反应抑制能力,ELISA法测定IL-4和干扰素(IFN)-γ生成。结果A1、A2和B组NKT细胞扩增倍数分别为128(95～207)、250.5(179.6～790.6)和326(101～2136)倍,B组扩增效果明显优于A1组(P=0.038)。NKT细胞在佛波酯刺激下,3d刺激指数为1.80±0.41;脐血或外周血NKT细胞24h分泌IL-4/IFN-γ比值为0.30±0.13和0.28±0.18;能杀伤HL60、KG1a和Raji细胞,对K562细胞无效;NKT细胞及其培养上清均能抑制混合淋巴细胞反应。结论α-GalCer能在短期内大量扩增Vα24NKT细胞。扩增细胞能大量分泌IL-4和IFN-γ,杀伤肿瘤细胞系,并抑制T细胞同种免疫应答。

两个N－酰基神经鞘氨醇的分离和结构鉴定

从南海细枝竹节珊瑚Ｉｓｉｓｍｉｎｏｒｂｒａｃｈｌａｓｔａ及柔软肉芝软珊瑚Ｓａｒｃｏｐｈｙｔｏｎｍｏｌｌｅ中各分离得到一固体化合物Ⅰ与Ⅱ，经光谱数据分析及化学方法分析鉴定Ⅰ为一个含有三个双键的Ｎ－酰基神经鞘氨醇（首次是从柳珊瑚中分离得到的含多个不饱和键的Ｎ－酰基神经鞘氨醇）；Ⅱ为一个新的含有两个双键的Ｎ－酰基神经鞘氨醇。

四乙酰基植物鞘氨醇生物合成的研究进展

四乙酰基植物鞘氨醇(tetraacetyl phytosphingosine,TAPS)是一种性能卓越的天然护肤品原料,经去乙酰化后生成的植物鞘氨醇可作为前体合成保湿护肤品神经酰胺,因此广泛应用于护肤化妆品行业。非常规酵母威克汉姆西弗酵母(Wickerhamomyces ciferrii)是已知的唯一可天然分泌四乙酰基植物鞘氨醇的微生物,目前已成为四乙酰基植物鞘氨醇工业生产的宿主。本文介绍了四乙酰基植物鞘氨醇的发现、功能及其生物合成途径,综述了近年来利用单倍体筛选、诱变育种和代谢工程改造威克汉姆西弗酵母高产四乙酰基植物鞘氨醇的研究进展,并展望了实现四乙酰基植物鞘氨醇工业生产的未来发展方向。

中国软珊瑚化学成分的研究(二十)——软珊瑚中的神经酸胺

从中国南海采集的幼纯短指软珊瑚、螺旋短指软珊瑚中首次分离到一个新的神经酰胺Sinumeramide(1),利用波谱方法推导其结构;同时还通过臭氧化反应以及氘硼化反应在双键上引入氘原子后的质谱分析确定其双键的位置;应用核磁共振谱及构象分析确定1的赤型构型。此外,从短指软珊瑚(未定种)中首次分离得N-乙酰二氢鞘氨醇。

南海柳珊瑚Isis sp.中的一个新神经酰胺

从中国南沙华洋礁采集的柳珊瑚Isis sp.中分离到一个新的神经酰胺:Δ^(4,5)(E),Δ^(9,10)(Z)-鞘氨醇—正十五碳酸酰胺(lsisamide)。经IR、MS、~1H和(13)C NMR谱分析以及臭氧化反应和质谱分析等方法确定了它的化学结构。

毛细管区带电泳分离血清脂蛋白

目的建立毛细管区带电泳分离血清脂蛋白的方法。方法Beckman毛细管电泳仪分离NBD-酰基鞘氨醇预染的血清脂蛋白,激光诱导荧光检测。比较几种缓冲体系缓冲溶液浓度、pH和表面活性剂对分离结果的影响。结果pH10·015mmo1/L硼砂溶液中添加0·001%Brij35,可在8min内将脂蛋白分出3条区带。结论毛细管电泳方法稳定,重复性好,与常规方法有一定可比性,可作为临床分析血清脂蛋白的选择方法。

MDQ型毛细管电泳仪分离血清脂蛋白方法学建立与评价

目的建立毛细管区带电泳分离血清脂蛋白的方法。方法用75μm(i.d.)×60 cm(L)未涂层熔融硅毛细管,含0.001 g/d l B rij35 pH 10.0的硼砂溶液作电泳缓冲液,分离经NBD-酰基鞘氨醇预染的血清脂蛋白,激光诱导荧光(L IF)检测。结果10 m in内可将脂蛋白分成3条区带。结论毛细管区带电泳为血清脂蛋白分析提供了一种新的分析方法。该法简单、快速、重复性好。

Caveolin-1与中枢神经系统疾病

Caveolae是细胞膜上特定的50～100 nm的微区域，呈烧瓶状，主要由caveolin、胆固醇、鞘磷脂、鞘糖脂、酰基鞘氨醇和糖基磷脂酰肌醇（ glycosyl phosphatidyl inositol ， GPI）锚着蛋白组成，可单独或成串出现，形成一个不被去垢剂溶解的区域。 Palada于1953年首先在电镜下发现了caveolae结构，并将之命名为质膜小泡（ plasmalemmal vesicle ）。2年后， Yamada 报道了相似的结果，并将之命名为小窝蛋白（caveolae）［1］。 caveolae的主要作用是介导细胞的内化和胞吞转化。

神经生长因子低亲和力受体p75NGFR的研究进展

p75NGFR是一个跨膜蛋白,属于TNF受体超家族成员。NGF、BDNF、NT-3、NT-4/5都可以和p75NGFR结合。p75NGFR的表达可诱导神经细胞凋亡,其与相应的配基结合可激活鞘磷脂(SM)通路和转录因子NF-KB。有关p75NGFR的理论研究正得到越来越多的关注。

海绵Steletatenuis（Lindgren）的化学成分研究

报道从中国南海星骨海绵Ｓｔｅｌｅｔａｔｅｎｕｉｓ（Ｌｉｎｄｇｒｅｎ）中分离得到的两个次级代谢产物１和２．经光谱数据分析鉴定１为一种新的Ｎ－酰基神经鞘氨醇；

CZE法分离血清脂蛋白影响因素的探讨

目的探讨毛细管区带电泳分离血清脂蛋白的影响因素。方法血清脂蛋白经荧光染料NBD C6-酰基鞘氨醇预染,毛细管电泳分离,激光诱导荧光(LIF)检测。分析了几种缓冲体系中缓冲溶液浓度和pH及表面活性剂对分离结果的影响。结果缓冲溶液的浓度、pH和表面活性剂的应用都能改善分离结果。结论用含0.001 ml/dl Brij 35 pH10.0的硼砂溶液作电泳缓冲液,10 min内可将脂蛋白分成3条区带。

NKT细胞及其功能

近年来发现存在一类与传统的αβT细胞(CD4^+CD8^+)不同的T细胞,其αβTCR结构单一,既有T细胞抗原受体又有NK受体且显示T细胞与NK细胞两方面性质,因而称为NKT细胞。NKT细胞通过识别由非经典的MHCI类分子——CD1d分子递呈的糖脂类抗原(a-半乳糖酰基鞘氨醇,α-Gal-Cer)或寄生虫的糖磷脂酰肌醇(GPI),在Th1和Th2的细胞因子的产生及穿孔素介导的细胞毒作用中发挥了重要的作用。

高歇病的酶替代疗法

目前,酶替代疗法的有效利用使高歇病(Gaucher’s disease)患者的状况与10年前相比明显好转。大多数内脏高歇病的临床表现起因于巨噬细胞机能障碍,这是因葡萄糖脑苷脂酶(GCase)缺陷所致。巨噬细胞表面的甘露糖受体可选择性地靶向这些细胞的GCase。与甘露糖受体结合后,GCase可被巨噬细胞吸收,随后释放到溶酶体。

辅助性T细胞17/调节性T细胞失衡在大鼠自身免疫性肝炎模型中的研究

目的研究辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)失衡在Wistar大鼠急、慢性免疫性肝炎模型中的意义和作用。方法将30只雌性Wistar大鼠随机分为对照组(0.9%NaCl),实验组-1[α-半乳糖酰基鞘氨醇(α-galcer)40μg·kg^-1],实验组-2[刀豆蛋白A(ConA)12.5 mg·kg^-1]。给药7周后,检测肝功能生化指标;用苏木精-伊红(HE)染色法观察病理改变情况;用免疫组织化学方法检测叉头盒蛋白3(Foxp3)、维A酸相关孤儿核受体γt(RORγt)蛋白表达情况;用酶联免疫吸附实验法检测外周血白细胞介素(IL)-17 A、IL-6、IL^-10、转化生长因子-β1(TGF-β1)细胞因子的含量;用流式细胞分析术检测Th17和Treg频率变化,并计算Th17/Treg比值。结果对照组、实验组-1、实验组-2血清中谷丙转氨酶(GPT)分别为(48.44±27.00),(82.50±8.61)和(278.96±34.44)U·L^-1;谷草转氨酶(GOT)分别为(95.02±22.10),(186.08±72.36)和(293.64±27.26)U·L^-1;血清总胆红素(TBiL)分别为(0.86±0.42),(1.82±0.78)和(14.88±7.67)μmol·L^-1;白蛋白(ALB)分别为(34.64±1.90),(27.13±4.26)和(21.55±2.65)g·L^-1;IL^-17A分别为(39.84±21.04),(68.24±13.01)和(238.11±32.80)pg·mL^-1;IL-6分别为(69.23±14.24),(91.84±5.62)和(99.09±22.44)pg·mL^-1;IL^-10分别为(53.83±9.14),(81.67±15.26)和(99.38±25.98)pg·mL^-1;TGF-β1分别为(105.86±24.98),(161.86±29.89)和(219.73±59.68)pg·mL^-1;对照组、实验组-1、实验组-2外周血中Th17细胞频率分别为(1.33±0.20)%,(5.55±1.57)%和(3.06±0.56)%;Treg细胞频率分别为(2.53±0.42)%,(4.96±0.61)%和(12.05±1.00)%;Th17/Treg比率分别为0.52±0.31,1.12±0.30和0.25±0.04;对照组、实验组-1、实验组-2肝组织中Foxp3蛋白表达(IOD值)分别为(1.67±0.12),(1.36±0.11)和(1.99±0.14);对照组分别与实验组-1与实验组-2相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论Th17/Treg比值在急性免疫性肝炎模型中明显上升,在慢性自身免疫性肝炎模型中明显下降,Th17/Treg的失衡参与自身免疫性肝炎疾病的发生发展且与其免疫状态和病情进展密切相关。

毛叶合欢的化学成分

目的研究毛叶合欢Albizia mollis的化学成分。方法采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶色谱及RP C-18柱色谱进行分离纯化,并运用波谱方法对所分得化合物进行结构鉴定。结果从毛叶合欢中分得了13个化合物,经波谱解析分别鉴定为白桦酸(1)、桉脂素(2)、麦角甾醇过氧化物(3)、金合欢酸内酯(4)、桦木醇(5)、表儿茶素(6)、(-)-表阿夫儿茶精(7)、β-香树酯醇(8)、ergosta-7,22-dien-3β-O-β-glycopyranoside(9)、3-吲哚甲酸(10)、1-O-十八烷酸甘油酯(11)、正二十七烷醇(12)、1-O-β-D-葡萄糖苷-(2S,3R,4E,8E)-2-N-(2′-羟基-二十一碳酰基)-十八碳鞘氨醇-4,8-二烯(13)。结论所有化合物均为首次从该植物中分得。

首个用于法布里病治疗的药物上市

美国食品和药品监督管理局4月24日批准了道个用于治疗罕见代谢性疾病法布里病（酰基鞘氨醇已三糖苷酶缺乏症）的药物Fabrazyme。