动物源性食品中酰胺醇类药物残留检测研究进展

酰胺醇类药物半衰期较长,进入人体后难以通过自身代谢排出体外,过量的酰胺醇类药物残留会对人体器官造成严重的危害,因此中国制定了酰胺醇类药物最高残留限量标准,其中氯霉素在所有可食组织中均不得检出。文章综述了动物源性食品中常见的酰胺醇类药物残留检测方法,包括色谱法、质谱法、电化学法与电致化学发光法、免疫法、荧光法和表面增强拉曼光谱法等,分析了这些方法的优缺点,并对今后酰胺醇类药物残留检测的新技术进行了展望。

鸡肉和鸡蛋中4种酰胺醇类药物残留的液相色谱-三重四级杆串联质谱分析

本文建立了鸡肉、鸡蛋中4种酰胺醇类药物(氯霉素、氟苯尼考、甲砜霉素、氟苯尼考胺)残留的超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱(UPLC-MS/MS)快速分析方法。样品用80%的乙腈振荡提取,经过PRiME HLB固相萃取柱直接净化,于40℃下氮吹浓缩,最后用10%乙腈复溶。以0.01%甲酸水-0.01%甲酸乙腈溶液作为流动相进行梯度洗脱,采用多反应监测(MRM)模式进行测定,内标法定量。结果表明,4种酰胺醇类药物在0.5~20.0 ng/mL的浓度范围内呈现良好的线性关系,R2在0.9982~0.9988范围内。添加量为0.5、1.0、5.0μg/kg时,鸡肉中4种酰胺醇类药物回收率为89.6%~104.2%,鸡蛋中4种酰胺醇类药物回收率为85.9%~105.5%。通过回收率和精密度试验得出,该方法具有较好的准确度和重复性,4种酰胺醇类药物检出限为0.05~0.10μg/kg,定量限为0.2~0.5μg/kg。本法简便、灵敏、准确,适合大批量鸡肉、鸡蛋样品中4种酰胺醇类药物的检测。

基于液相色谱和液质联用法的动物源性食品中氟喹诺酮类与酰胺醇类药物残留检测研究进展

氟喹诺酮类和酰胺醇类药物是畜禽生产中常用的广谱高效抗生素,应用广泛,但药物残留超标现象频出。液相色谱与液质联用法是目前检测氟喹诺酮类和酰胺醇类药物残留的主要方法,当前国内标准规定的检测方法仅能在牛奶中同时检测这两类兽药残留,在其他基质中鲜有报道,因此亟需建立和优化氟喹诺酮类和酰胺醇类药物在不同基质中同时检测的方法。本文概述了液液萃取、固相萃取、QuEChERS方法和加速溶剂萃取等四种常用前处理技术,具体论述了纳米材料吸附剂这一研究热点的应用情况,并从色谱和色谱质谱联用法的角度,总结并论述了不同基质条件、仪器配置、液相条件对方法性能参数的影响,以期为动物源性食品中兽药残留的检测和监管提供参考。

动物源性食品中酰胺醇类兽药残留检测的样品前处理技术研究进展

本文阐述了近几年应用于动物性食品中酰胺醇类兽药残留的液液萃取、固相萃取、基质固相分散萃取、分子印迹法、加速溶剂萃取和QuEChERS技术,此外,还对新型的分散液液微萃取、磁性固相微萃取、亚临界水萃取和织物相吸附萃取等前处理技术的特点进行了综述,并对动物源性食品中酰胺醇类药物前处理技术在未来的发展方向做了进一步展望。

渝东北地区食品中典型酰胺醇类抗生素残留快速检测及风险评估

目的建立食品中典型酰胺醇类抗生素残留的快速检测方法并对该类药物在渝东北地区的残留污染风险进行评估。方法采用乙腈萃取食品基质中残留的酰胺醇类抗生素,QuEChERS法进行净化,超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)分析检测;同时应用层次分析法(analytic hierarchy process,AHP)对渝东北地区食品中酰胺醇类药物残留的污染风险进行评估。结果Qu ECh ERS-UPLC-MS/MS检测技术精确度高,氯霉素、氟苯尼考和甲砜霉素在0.15~50.00μg/kg浓度范围内的线性相关系数均大于0.999,在0.15~50.00μg/kg浓度水平范围内的回收率分别为85.2%~100.9%、76.7%~90.6%、85.3%~96.7%,精密度均小于15%,检出限为0.10μg/kg,定量限为0.15μg/kg。求解AHP模型可知,渝东北地区酰胺醇类药物残留的食品污染风险程度为:氟苯尼考>甲砜霉素>氯霉素。其中,氟苯尼考:畜副产品>鲜蛋>水产品>禽副产品>禽肉>畜肉;甲砜霉素:禽副产品>鲜蛋>禽肉;氯霉素:畜副产品>水产品>畜肉。结论QuEChERS-UPLC-MS/MS适用于对食品中酰胺醇类抗生素残留的定性定量检测,AHP评价法则可对可能引发的污染风险大小进行综合评估,相关检测方法和评价模型能为区域食品安全的风险管控提供支撑。

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中硝基呋喃类代谢物、三苯甲烷类、磺胺类、喹诺酮类和酰胺醇类药物残留

研究建立一种超高效液相色谱-串联质谱法快速准确测定水产品中硝基呋喃类代谢物、三苯甲烷类、磺胺类、喹诺酮类和酰胺醇类等5类36种药物残留的方法。样品在酸性条件下水解、超声波辅助衍生后经乙腈提取,提取液经氯化钠脱水盐析后氮吹至近干,残留物用乙腈水溶液复溶,用BEH C18色谱柱洗脱分离,采用超高效液相色谱-串联质谱法测定,基质匹配标准曲线内标法定量。结果显示,36种药物线性关系良好,相关系数均大于0.99,方法定量限为0.07~2.0μg/kg,在不同添加浓度水平下平均回收率为65.0%~120.0%,相对标准偏差为0.5%~12.0%;实际样品的检测结果与标准方法检测结果基本一致。该方法具有速度快、操作简单、定性定量结果准确性好、成本低等优点,适用于大批量水产品中5类药物残留的检测。

酰胺醇类抗生素的研究进展

酰氨醇类(Amphenicols)抗生素是一类广谱抗生素,对革兰阳性及阴性菌都有良好的抑制作用。该类抗生素不仅水溶性差,其毒性、耐药性也逐渐被发现。本文对该类抗生素的作用机制、耐药机制、构效关系、制剂研发、残留检测以及废水处理方面进行了综述,为今后的研究提供参考。

LC-MS/MS检测动物源性食品中12种激素类、硝基咪唑类和酰胺醇类药物残留

本研究建立了动物源性食品中12种激素类、硝基咪唑类和酰胺醇类药物残留量的液相色谱-串联质谱检测方法。结果表明,12种目标药物在0.2~100.0 ng·mL^(-1)呈现良好的线性关系,相关系数在0.995~0.999,定量限为0.1~1.0μg·kg^(-1),加标回收率和精密度均满足相关检测要求。本研究建立的方法可以准确、快捷地对12种激素类、硝基咪唑类和酰胺醇类药物的残留量进行检测。

山东省猪源肠球菌酰胺醇类药物耐药表型及耐药机制研究

目的调查山东省猪源肠球菌的分离情况,对酰胺醇类药物敏感性及相关耐药机制,探究引起肠球菌酰胺醇类耐药的可能机制。方法应用肠球菌选择培养基进行肠球菌分离,16SrDNA序列扩增进行肠球菌种属鉴定,从采集自山东省44份猪粪便样本中分离得到肠球菌,应用微量肉汤稀释对其进行酰胺醇类药物耐药性研究,并利用普通PCR方法对常见的9种可水平移动的酰胺醇类耐药基因进行检测。结果共分离得到34株肠球菌(分离率77.3%),发现分别有21株(61.8%)和25株(73.5%)的分离株对氯霉素和氟苯尼考耐药。耐药菌株中存在可水平传播的酰胺醇类耐药基因catA7(11株),catA8(2株),fexA(7株),fexB(5株),cfr(3株)。7株肠球菌同时存在两种不同的酰胺醇类耐药基因。结论本研究中猪源肠球菌分离率较高,对酰胺醇类药物有很高的耐药性,分离株中存在的可水平移动的酰胺醇类耐药基因可能参与了受试菌株对酰胺醇类药物的耐药性。提示应加强畜牧兽医临床酰胺醇类耐药肠球菌的监测、检测工作,为了解我国动物源肠球菌耐药性现状,防控耐药肠球菌的传播和流行提供基础数据。

改良的QuEChERS与HPLC-HESI/MS/MS同时测定中华鳖组织中氯硝柳胺和酰胺醇类药物及其代谢物的残留量

建立了中华鳖(Trionyx sinensis)组织(血浆、肌肉、裙边、肝脏和肾脏)中氯硝柳胺、氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺同时测定的高效液相色谱-加热电喷雾电离源串联质谱法(HPLC-HESI/MS/MS)。样品经改进的QuEChERS方法提取净化,以氨化乙腈为提取剂,十八烷基硅烷键合硅胶(C18)粉为净化剂,甲醇-水为流动相,流速为0.3 mL/min,以Waters Symmetry~ C_(18)(2.1 mm×100 mm,3.5μm)为色谱分离柱,采用正负离子分段扫描和多反应监测模式(MRM)检测。氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺采用内标标准曲线法定量,氯硝柳胺采用基质匹配标准曲线外标法定量。结果表明,在0.3~100μg/L范围内,5种待测物均呈良好的线性关系,相关系数(r2)均不小于0.998 7。在1~20μg/kg加标水平下,中华鳖空白血浆、肌肉、裙边、肝脏和肾脏的加标回收率为77.9%~105.3%(n=6),相对标准偏差为2.7%~10.5%(n=6),方法的检出限分别为0.5、0.1、0.5、0.5、0.5μg/kg,定量下限分别为1.0、0.3、1.0、1.0、1.0μg/kg。该方法操作简便、准确、灵敏度高,适用于中华鳖组织中氯硝柳胺、氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺残留量的同时测定。

基于分子印迹聚合物微球的在线固相萃取-液相色谱联用技术测定牛奶中酰胺醇类药物残留

以氟苯尼考为模板分子,甲基丙烯酸为功能单体,二甲基丙烯酸乙二醇酯为交联剂,偶氮二异丁腈为引发剂,用乳液-悬浮聚合法制备分子印迹聚合物微球。将制备的微球用于固相萃取,建立酰胺醇类抗生素的在线固相萃取-高效液相色谱检测方法,优化在线萃取条件及影响因素。在最佳条件下,分离检测了牛奶中的酰胺醇类药物,实现了有效地净化,其加标回收率为80.6%～96.7%,检出限为6.8～27.8 g/kg。

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中4种酰胺醇类抗生素残留

目的建立一种超高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中酰胺醇类抗生素氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及代谢物氟苯尼考胺残留的方法。方法水产样品经乙腈提取,正己烷除脂后,在Capcell Pak ADME(100 mm×2.1 mm,2.7μm)色谱柱上分离,采用多反应监测模式,以氯霉素-D5和氟苯尼考胺-D3为内标进行定量测定。结果氯霉素在0.5~25.0ng/mL范围内线性关系良好(r>0.999),甲砜霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺在5.0~250.0 ng/mL范围内线性关系良好(r>0.998)。方法检出限为0.1~1.0μg/kg,定量限为0.2~2.0μg/kg。当氯霉素添加水平为0.2、1.0和10.0μg/kg时,回收率为82.5%~104.0%,相对标准偏差在2.2%~11.8%之间;当甲砜霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺添加水平为2.0、10.0和100.0μg/kg时,回收率为80.9%~102.0%,相对标准偏差在0.8%~8.4%之间。结论该方法快速简单、准确、成本低,适用于水产品中4种酰胺醇类抗生素残留的检测。

外排泵抑制剂对海水养殖源弧菌酰胺醇类药物耐药性的影响

通过检测从海水养殖中分离的对氟苯尼考低敏感弧菌菌株中常见酰胺醇耐药基因的携带情况,来分析外排泵抑制剂对弧菌酰胺醇耐药性的影响,旨在研究主动外排机制在我国海水养殖源弧菌耐药中的作用。本研究从前期分离的海水养殖源弧菌中挑选出41株对氟苯尼考低敏感的菌株,运用琼脂稀释法测定了这些菌株对酰胺醇类药物(氯霉素和氟苯尼考)的敏感性;利用PCR方法检测了这些菌株的酰胺醇外排泵耐药基因和整合子的携带情况,包括外排泵基因floR、cmlA、pexA、fexA、fexB和optrA,以及Int1、SXT和ISCR1整合子相关基因;同时研究4种外排泵抑制剂对弧菌氯霉素、氟苯尼考最小抑菌浓度(MIC)的影响,利用琼脂稀释法检测41株弧菌分别加入甲基吡咯烷酮(N-methyl-2-pyrrolidone,NMP)、利血平(reserpine)、羰基氰氯苯腙(carbonyl cyanide m-chlorophenyl hydrazone,CCCP)和苯丙氨酸-精氨酸-β萘酰胺(Phe-Arg-β-naphthylamide,PAβN)4种外排泵抑制剂前后对氯霉素和氟苯尼考的MIC值的变化情况。副溶血弧菌(14株)、溶藻弧菌(17株)、哈维氏弧菌(8株)、创伤弧菌(2株)共41株氟苯尼考低敏感弧菌敏感度检测结果显示,氟苯尼考耐药菌株39株、氯霉素耐药菌株11株。41株氟苯尼考低敏感弧菌菌株中,酰胺醇类外排泵基因floR检出率为100%,而cmlA的检出率仅为17.1%,其他4个外排泵基因均未检出;整合子相关基因Int1、SXT和ISCR1的检出率分别为46.3%(19/41)、46.3%(19/41)和63.4%(26/41)。41株弧菌中,添加NMP、利血平、CCCP和PAβN后,分别有0株、2株、10株和2株弧菌为氯霉素外排阳性菌;分别有1株、1株、15株和3株弧菌为氟苯尼考外排阳性菌。研究表明,CCCP被验证可以作为有效治疗酰胺醇类药物耐药弧菌的外排泵抑制剂。

液相色谱-串联质谱法测定禽蛋和禽肉中酰胺醇类药物残留

禽蛋、禽肉中的抗生素药物残留超标会直接影响消费者健康。本文建立了禽蛋和禽肉中酰胺醇类药物包括氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及氟苯尼考胺的高效液相色谱-串联质谱分析方法。禽蛋和禽肉用乙腈提取后,正己烷除脂,PCX固相萃取小柱净化,液相色谱-串联质谱法测定,电喷雾离子源(ESI),多反应监测(MRM)模式检测,基质匹配氯霉素-D5内标法定量。结果表明,在0.25~50μg/L的系列浓度范围内均呈良好线性关系,相关系数均>0.999。样品中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及氟苯尼考胺的检测限为0.1μg/kg,定量限为0.2μg/kg,在0.2~1μg/kg的添加浓度范围内平均回收率为70%~100%,精密度<15%。该方法方便快捷、定性准确,适用于禽蛋和禽肉中的酰胺醇类药物残留检测。

同位素稀释高效液相色谱串联质谱法同时测定鸡蛋中酰胺醇类药物及其代谢物

本文建立了同时测定鸡蛋中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺的同位素稀释高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)分析方法。均质样品加入氯霉素-D5同位素内标后,用乙腈/乙酸乙酯(2/1,含2%氨水,v/v)提取,经分散固相萃取净化后,采用ZORBAXExtend-C18色谱柱(150mm×2.1mm,3.5μm)分离,分别在电喷雾正、负离子模式下以选择反应监测(SRM)方式检测。流动相为10mmol/L乙酸铵(含0.1%甲酸)-水-乙腈,梯度洗脱。结果表明,药物分别在0.1～10(氯霉素)、1～50(甲砜霉素、氟苯尼考、氟苯尼考胺)质量浓度范围内呈良好线性,相关系数不低于0.9985,氯霉素的检出限低于0.01μg/kg,其他3种目标物的检出限也均低于0.05μg/kg。鸡蛋中4种目标物的回收率为87%～107%,相对标准偏差均小于15%。

QuECHRS结合UPLC-MS/MS法测定水产品中酰胺醇类抗生素残留及基质效应

为获得一种快速测定水产品中酰胺醇类抗生素残留的方法,本研究建立了QuECHERS结合超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)测定氯霉素(CAP)、氟苯尼考(FF)和甲砜霉素(TAP)残留的方法,并对其基质效应进行了评价。结果表明,该方法下CAP、FF在0. 1～100. 0 ng/mL以及TAP在0. 5～100. 0 ng/mL质量浓度范围内线性关系良好,相关系数大于0. 999 8。CAP和FF检测限(LOD)和定量限(LOQ)分别为0. 10和0. 50μg/kg; TAP检测限(LOD)为0. 50μg/kg,定量限(LOQ) 1. 00μg/kg。3种酰胺醇类抗生素在1. 0、5. 0和10. 0μg/kg 3个添加水平下的平均回收率在(84. 5±4. 64)%～(106. 1±8. 69)%之间,日内精密度为3. 17%～9. 74%,日间精密度为2. 26%～7. 90%。同时在该检测方法下,评价了待测物浓度和基质浓度对基质效应的影响。结果发现,除CAP在1. 00～100. 00 ng/mL质量浓度范围内的基质效应可以忽略以外,随目标物浓度的降低,其基质效应值逐渐减小;随着样品基质浓度的增加,基质效应从基质增强变为基质抑制。因此,在检测水产品中酰胺醇类抗生素残留时均要考虑基质效应对检测结果的影响,建议采用基质标准曲线进行定量校准,以确保检测结果的准确性。该方法快速、准确、重复性好、环境友好且操作简单,可用于水产品中酰胺醇类抗生素残留量的测定。

河水中酰胺醇类抗生素的分析测定

建立了河水中3种酰胺醇类抗生素氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素的分析方法.利用HLB固相萃取柱进行水样的富集、净化,超高压液相色谱-串联质谱仪多反应监测离子模式进行定性、定量分析.工作曲线的线性范围为1～1 000μg/L,3种目标物的方法检测限为1 ng/L(S/N=10,1 000倍浓缩);加标浓度分别为5.0、20.0和100 ng/L时的回收率为52.1%～77.5%,相对标准偏差1.9%～8.5%(n=4).方法初步应用于福建省九龙江下游河水样品的分析.

带手性酰胺醇侧链的1,5-二氮环辛烷的合成

用手性α 氨基醇和氯乙酰氯作用得到的手性酰胺醇 (2a～ 2f)和 1,5 二氮环辛烷反应 ,合成了带手性侧臂的1,5 二氮环辛烷衍生物N ,N′ 二 [(S) /(R) N (1 羟甲基烃基 ) 乙酰胺 2 ] 1,5 二氮环辛烷 (1a～ 1f) .

畜产品中酰胺醇类药物测定方法的研究

通过分析氟苯尼考与氟苯尼考胺在畜产品中的残留规律,发现了物源性食品中酰胺醇类药物的检测方法有待进一步完善,不仅要检测原药,还要检测其代谢物。本方法实现了一次进样同时检测氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺。方法线性范围:0.5~100ng/m L;定量限为:0.2μg/kg。不同样品基质中酰胺醇的回收率为79.8%-103.6%,相对标准差(RSD)<6.46%。本方法操作简单,线性范围广,应用于畜产品的检测,结果满意。

新手性酰胺醇催化二乙基锌与苯甲醛的不对称加成反应

天然（＋）-樟脑经磺酸化、磺酰氯化和氧化得到（1S）-7，7-二甲基双环[2．2．1]庚烷-1-羧酸-2-酮．该化合物与二氯亚砜反应得到的酰氯再与由（L）-氨基酸制备的氨基醇反应得到8个新的手性酰胺醇．通过红外光谱、核磁共振谱和元素分析确定了酰胺醇的结构．这些酰胺醇可用于催化二乙基锌与苯甲醛的对映选择性加成反应，产物1-苯基-1-丙醇的化学产率和对映体过量值（e．e．值）分别为48．4％～81．5％和0～24．7％．