化学物质的Ah受体效应重组基因酵母检测法的优化

接有芳香烃受体 (AhR)基因和芳香烃受体核转位子蛋白 (ARNT)基因的酵母Saccharomycescerevisiae菌株是测定化学物质的Ah受体效应的方法之一 .本实验通过优化各个实验条件 ,发现用 0 2 %葡萄糖作前培养液培养菌 2 4h ,用 2 %半乳糖作化学物质暴露时的培养液 ,暴露在玻璃管时 ,暴露时间从原来的 1 8h缩短到 8h .并用已经优化的方法测定了六氯苯和五氯苯的Ah受体效应 ,得出六氯苯和五氯苯相对于TCDD的毒性等当量值 (TEF)分别为 0 0 1 86 2 9和 0 0 0 0 2 94 .

酿洒酵母检测系统的建立和应用

酿酒酵母(saccharomyces cerevisiae)又称啤酒酵母、面包酵母、酒精酵母,是一种真核微生物,属子囊孢子型真菌,繁殖速度快,营养要求低。广泛应用于遗传学和细胞生物学的研究及工业酿造中。

葡萄酒发酵工程中酵母对酒质的影响与检测

分析了不同酵母菌种在葡萄酒生产中的作用,重点评估了它们对酒的风味、香气和色泽的影响。实验通过对比不同酵母对葡萄酒感官特征的贡献,揭示了酵母多样性与葡萄酒品质之间的关联。文中还介绍了现代酵母检测技术,评价了这些方法在实际应用中的效率与准确性。结果表明,适宜的酵母选择对提升葡萄酒品质和市场竞争力具有关键作用。此项研究提供了一套科学的酵母调控方案,供酿酒行业参考,以便更好地匹配酒品的具体需求。

用于酵母菌检测的微波超材料传感器

在食品加工领域,监测酵母菌的含量对产品的产率和安全性有着极其重要的意义,常用的平板计数法等传统方法存在操作复杂、检测时间长、设备体积大等问题,因此有必要开发一种新型的酵母菌传感器以满足食品加工领域的复杂需求。提出了一种操作简单、非接触、低成本和小型化的微波超材料生物传感器,用于检测浓度范围为5×101~5×104 CFU/mL的酵母菌溶液。该微波传感器将微波超材料结构与叉指电容结构相结合,实现了设备的小型化,进一步增强了传感器表面的电场强度,提高了酵母菌检测的灵敏度。利用谐振频率和谐振幅值2个微波参数表征了不同浓度的酵母菌溶液,检测过程中谐振频率和谐振幅值的变化量分别为2.6 MHz和0.03 dB,实现了酵母菌溶液的传感。这项研究为食品加工领域酵母菌浓度的监测提供了新的方案,拓宽了微波生物传感的应用范围。

啤酒酵母呼吸缺陷型菌株的检测

在啤酒酿造中,酵母往往由于麦汁营养不良、长期缺氧、某些金属离子等因素影响,会发生自发性突变,产生呼吸缺陷型酵母,及时把握酵母发生突变的状况,以便采取必要的措施,保证发酵的正常进行并保证啤酒质量,在酵母管理工作中具有一定的意义,本文在于探讨呼吸缺陷型酵母的检测以及在生产实际中的应用.

使用Soleris仪器法定性检测发酵乳的霉菌酵母菌

霉菌酵母菌在自然界分布很广，种类繁多。由于其霉菌能形成极小的孢子，因而很容易通过空气及其他途径传播，有些霉菌被用于食品发酵工业的应用，但有些霉菌能产毒素，误食引起霉菌毒素性食物中毒。霉菌引起的食物中毒是真菌性食物中毒的典型代表，霉菌毒素是霉菌产生的有毒的次级代谢产物。目前发现能引起人畜中毒的霉菌毒素有150种以上。霉菌毒素具有强烈的致癌性；或能促进病原菌生长。因此，霉菌和酵母也可作为评价食品卫生质量的指标之一，以霉菌和酵母菌数判断食品的污染程度。目前已有一些同家对某些食品制定了霉菌和酵母数的限量标准。Soleris分析仪是计算机控制的模块化分析系统，能够快速准确的对乳品等各类食品进行微生物检测，检测瓶培养数小时可自动得出霉菌酵母的准确数量，并且可以随时放入或取出检测瓶，而不影响其他正在进行检测的样品，本方法用于快速筛选，超出霉菌酵母限量标准的样品应依照GB4789．15规定的方法进行验证。

纺织业女工外阴阴道假丝酵母感染的调查与分析

对纺织业女工外阴阴道假丝酵母感染的调查，为女性生殖健康提供依据。 1对象与方法 1．1对象以自愿形式抽取棉纺、麻纺、毛巾厂女1726人，平均年龄29．30岁。

常规微生物检测方法的初步比较

以常用的调味品原料及产品为样品,对3个内部和2个国家权威微生物实验室采用ISO和GB方法的检测结果进行了初步比较。结果表明:对于大肠菌群,两种方法的检测结果没有显著差异(MPN法:P=0.117;平板法:P=0.922);对于霉菌和酵母,ISO方法的检测结果明显高于GB方法(P=0.000)。

北方某水厂的类雌激素物质变化规律

对北方某水厂春季和夏季源水和各处理单元出水中类雌激素物质的变化规律进行了研究.将水样用固相萃取方法富集后,按不同极性洗脱,得到从非极性到极性的3个组分,分别对总提取物和各分级富集组分进行重组雌激素受体基因的酵母检测.结果表明:源水和各处理单元出水中能够检测到极低水平的类雌激素物质,其中源水中的类雌激素效应仅相当于5.4～11.0pg/L雌二醇当量,主要由非极性与弱极性的类雌激素物质引起;春季和夏季源水中的类雌激素效应相差不大;水厂传统的处理工艺对类雌激素物质的去除效果不明显;重组基因酵母检测技术结合水样的固相萃取、三步纯化分级前处理方法可以快速、有效地筛选和定量分析水样中未知类雌激素物质,并对水处理效果进行评价.

樟树长链脂肪酰基CoA合成酶基因9克隆与表达分析

该研究以樟树转录组数据为基础,筛选克隆了拟南芥AtLACS9同源候选基因CcLACS9,二者序列相似性为75%。相关软件预测CcLACS9享有植物LACS亚家族成员3个特征motifs,且N端含有定位质体信手肽。在Δlacs缺陷型酵母互补测试中,以油酸作为唯一外源脂肪酸、转化了CcLACS9的突变型酵母恢复正常生长,证明CcLACS9具有典型的脂肪酰基CoA合成酶的功能。为探究CcLACS9是否参与了樟树籽油生物合成,进一步研究了其组织表达模式和在种子发育过程中其表达量与籽油累积量之间的关系。实时荧光定量PCR分析显示CcLACS9基因在种仁与花中优势表达,种仁中相对表达量是根中的17.74倍。随机测定了30棵成年樟树成熟期种子千粒重、籽油含量和中链脂肪酸比例等指标。根据仁油含量将测试群体划为高、中、低三个不同品级,并在各品级中挑选3棵单株、逐月关联分析其仁油含量与CcLACS9相对表达量。结果表明:在种仁发育前期,仁油含量和CcLACS9表达量都持续上升且二者呈正相关性,8月份为CcLACS9表达量峰值期; 9月下旬后,仁油含量趋向稳定但CcLACS9表达量仍处于较高水平但呈现下降趋势,二者无明显相关性。LACS亚家族在植物进化中较为保守,同源基因在不同植物中具有相同或相似的功能。该研究结果暗示CcLACS9可能拥有AtLACS9相似的生物学功能,即在樟树种仁油酯合成和累积过程中起重要作用。

不同工艺出水中有机物的致突变性及类雌激素效应

取南方某市水源水和经5种不同饮用水处理工艺处理后的出水,采用XAD-2大孔树脂分别提取水样中的非挥发性有机物,对其进行Ames试验和重组酵母菌雌激素效应检测,比较了水源水及不同工艺出水中非挥发性有机物(NOCs)的致突变性和类雌激素效应。结果表明,各工艺对水源水中具有致突变性和类雌激素效应的有机物均有一定程度的去除作用,其中经预臭氧氧化—混凝、沉淀—砂滤—GAC过滤—次氯酸钠消毒工艺处理的出水,其NOCs的致突变性和类雌激素效应均较低。

用酵母双杂交系统检测菠菜叶绿体ATP合酶CF_1各亚基间的相互作用

将菠菜叶绿体ＡＴＰ合酶ＣＦ_１的５种亚基基因分别插入到质粒ｐＧＢＴ９和 ｐＧＡＤ４２４，双转化入酵母菌株，用酵母双杂交系统检测菠菜叶绿体ＣＦ_１各亚基间的相 互作用．结果显示ＣＦ_１的５种亚基中，ｒ与ε亚基有较强的相互作用； α与β α与ε， β与ε， β 与δ亚基间也有稳定的相互作用；ｒ民δ与ε亚基间有微弱的或短暂的相互作用；而α与 ｒ，α与δ，β与ｒ等亚基间在酵母双杂交系统中没有相互作用．这些结果有助于研究ＡＴＰ 合酶在催化过程中的结构变化和亚基间的相互关系．

口腔癌患者血清红细胞免疫调节因子活性的初步观察

本文采用酵母多糖检测法，分别检测了３５例口腔癌患者及２５例正常人血清红细胞免疫调节因子的活性。结果发现口腔癌患者血清中的红细胞免疫抑制因子（ＲＦＩＲ）活性上升，促进因子（ＲＦＥＲ）活性下降。提示由于口腔癌机体内存在的免疫抑制物质影响了红细胞免疫调节因子的活性，导致口腔癌患者红细胞免疫粘附活性（ＲＣＩＡ）下降。

某市动物性食品环境雌激素活性的调查与分析

目的对某市动物性食品雌激素活性进行研究,以综合评价食品中环境雌激素(EES)的污染状况。方法结合重组酵母雌激素筛检法(YES)及高效液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)进行分析。结果 YES结果表明,生物雌二醇(E2)当量浓度(EEQbio)为(6.11～25.45)ng/g。LC-MS/MS结果显示,所有样品均检测到17β-雌二醇(E2)和双酚A(BPA),大部分样品检测到乙炔基雌二醇(EE2),含量分别是(2.87～5.05)ng/g、(0.48～3.57)ng/g和(1.23～7.38)ng/g。样品的化学雌二醇当量(EEQchem)范围在(3.15～15.14)ng/g之间。两种方法测得的EEQ均值,有一定的相关性(R2=0.443)。结论所有样品均检测到了一定的雌激素活性,且生物实验与化学分析相结合,可以更有效的评价动物性食品环境雌激素的总体效应及污染现状。

樟树长链脂肪酰CoA合成酶1鉴定与功能初步分析

樟树(Cinnamomum camphora(L.)Presl.)籽油富含中链脂肪酸,但其生物合成机制尚未可知。长链脂肪酰基CoA合成酶(long chain fatty aycl-CoA synthetases,LACSs)亚家族在植物脂肪酸合成与分解代谢中具有重要作用。以樟树转录组数据为参考、本研究克隆并鉴定了一个LACS基因亚家族成员,序列比对显示其编码氨基酸序列与拟南芥At LACS1序列相似性高达65%,故将之命名为Cc LACS1。实时荧光定量PCR检测显示Cc LACS1基因在花与种仁中优势表达,叶、茎组织中次之。缺陷型酵母互补实验证明Cc LACS1具有脂酰CoA合成酶活性,可广泛地将外源C10~C18脂肪酸活化为脂酰CoA硫酯,但C18类脂肪酸是其偏好催化底物。上述结果暗示Cc LACS1可能与樟树籽油合成与累积相关。

小麦TaCIPK3与TaCBLs的互作分析

植物类钙调磷酸酶B蛋白CBLs(Calcineurin B-like proteins)和CBL互作蛋白激酶CIPKs(CBL-interacting protein kinases)在应答非生物逆境的钙信号系统中起着重要作用。为了研究小麦TaCIPK3的互作调控网络,以普通六倍体小麦(Triticum aestivum)品种矮抗58的叶片c DNA为模板,PCR扩增获得TaCIPK3的编码序列。TaCIPK3基因开放阅读框(ORF)长1348 bp,编码447个氨基酸。生物信息学分析显示TaCIPK3的N-端催化结构域含有CIPK家族蛋白的典型激活环,C-端调节域含有该家族高度保守的24个氨基酸NAF基序,具有丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶的结构特征。利用酵母双杂交体系对TaCIPK3与TaCBL1、TaCBL2、TaCBL3、TaCBL4、TaCBL6、TaCBL7、TaCBL9进行相互作用鉴定,发现分别转化有p GADT7-TaCIPK3×p GBKT7-Ta CBL1、p GADT7-TaCIPK3×p GBKT7-Ta-CBL2、p GADT7-TaCIPK3×p GBKT7-Ta CBL3和p GADT7-TaCIPK3×p GBKT7-Ta CBL4的二倍体酵母菌能够在二缺培养基SD/-Trp/-Leu平板上长出白色菌落,同时这些二倍体菌株在四缺培养基SD/-Leu/-Trp/-Ade/-His/X-α-Gal/Ab A上能够长出淡蓝色菌落,表明下游的4个报告基因ADE2、HIS3、MEL1和AUR1-C被激活,因此说明TaCIPK3与TaCBL1、TaCBL2、TaCBL3和TaCBL4之间存在互作。本研究结果对进一步研究TaCIPK3的生物学功能以及与TaCBLs的互作网络具有一定的参考作用。