海红果酒酵母筛选及其发酵工艺的响应面法优化

选取8种活性干酵母对海红果酒进行了发酵实验,以残糖和酒精度为考量参数,筛选出适于海红果酒酿造的最优菌株。在单因素实验的基础上,选取发酵温度、接种量、发酵时间为影响因子,以残糖为响应值,应用中心组合Box-Behnken实验设计构建二次回归方程的数学模型,进行了响应面分析。结果表明,Z2酵母是海红果酒酿造的最优菌株,优化后的海红果酒发酵工艺条件为:发酵温度为23℃;接种量为0.25g/L;发酵时间为35d,在此条件下,发酵所得的海红果酒残糖量为5g/L,且果香浓郁,酒体丰满。

桑椹酒酵母筛选及酿造工艺优化

以桑椹为原料,比较1#,2#,3#3种活性干酵母的发酵性能,并对发酵中重要工艺参数进行研究。结果表明:2#菌种的产酒精、产香性能及发酵速度都优于1#,3#菌种,而且在18～20℃下采用接种量0.7g/L,SO260mg/L发酵,所得酒风味佳,色泽好。

白酒丢糟及秸秆降解液的主要糖分分析及产酒精酵母筛选

实验通过纸上层析法对由丢糟和秸秆在特定降解工艺下降解出的糖化液进行主要糖分组成的分析,最后在现有的酒酵母中筛选出适合在糖化液中生长并发酵酒精的酵母。实验结果表明,糖化液中的主要糖分组成为葡萄糖和木糖,且从色谱上分析,2种糖的组成接近1∶1。所筛选的酒酵母中,LR3.JS1虽生长较慢,但单位产酒能力强,产酒率可达50%左右;而LR3.E12在糖化液中生长迅速,但产酒率低,在30%左右。且2株酵母在特定接种量范围内,产酒量差别不大。综合考虑,使用LR3.JS1来发酵生产酒精,由于发酵液中的葡萄糖和木糖各占总糖的一半,且LR3.JS1只能利用糖化液中的葡萄糖进行酒精发酵,不能利用木糖,因此蒸酒后的残留液可进一步提取木糖。

管式发酵器在啤酒酵母筛选中的应用

定期地对酵母进行筛选是啤酒厂一项重要的工作。管式发酵器是检测酵母菌珠酿造特性的理想设备,应用管式发酵器对菌种进行筛选测定与生产较接近,可以科学、准确地分离到优良的啤酒酵母菌株。一、管式发酵器简介管式发酵器由管体长2.0米、容积为4升、加有保温层的不锈钢管和配套的恒温循环仪两部分组成。

甘肃河西走廊葡萄酒产区高产β-葡萄糖苷酶酵母菌株筛选

以甘肃河西走廊葡萄酒产区成熟葡萄浆果自然发酵过程中分离得到的115株酵母菌株为出发菌株,采用对硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷为底物的平板初筛,摇瓶复筛,对高产β-葡萄糖苷酶酵母菌株进行WL营养培养基和赖氨酸培养基初步分类以及26S r DNA D1/D2区序列分析。结果表明:6株酵母β-葡萄糖苷酶活性与商业酵母ICV-D254酶活性相似,酶活力可达(51.40±4.74)m U/m L,其中菌株QLFE、MQFEH-1、MQFSC-3、MQFEH-2和MQFSM-3为酿酒酵母属,菌株QLFE-4为梅奇酵母属,与分子鉴定结果一致。

枇杷果酒的酵母菌株筛选及工艺优化

对 4个不同酵母菌株在 1 7℃、2 5℃下采用 1次和 2次加糖工艺发酵酿造枇杷果酒 ,研究了各菌株的发酵速率和产酒能力 ,并对枇杷果酒质量进行感官综合模糊评判。试验表明 ,以 2 #菌株在 2 5℃左右下 ,采用 2次加糖发酵工艺 ,酿制出的果酒质量最好。低温 ( 1 7℃ )发酵 ,以选择1 45 0 #菌株为宜 ,其发酵速率快 ,发酵能力强 ,酿制出的果酒质量较好。

香蕉菠萝复合果酒酵母的筛选

利用香蕉、菠萝为原料,采用白梨酵母、水蜜桃酵母、高活性干酵母、葡萄酵母、黄酒酵母在一定条件下进行发酵,根据酵母的生长曲线、酒精发酵特性及感官评分进行分析。结果表明,白梨酵母的发酵产酒能力强,发酵7d酒精度达到12.1%vol,在果酒发酵生产中具有较大的可塑性和研究价值。

筛选啤酒酵母的标准培养基研究

通过以大生产麦汁成分的含量作为参考,如氨基酸的种类、含量,各种可发酵性糖的种类、含量,以及通过查阅大量文献资料了解酵母培养所需的一些必需组分,以此为基础,研制标准培养基的配料单,并结合与大生产麦汁做发酵性能测试,测试指标包括降糖速度、风味组分、还原双乙酰等指标,最终确定合理的配方;并验证其发酵性能的稳定与重复性;试验结果表明,配制培养基与大生产麦汁的各项发酵性能与指标接近,而且具有较好的重复与稳定性。可以用于酵母筛选,从而确定筛选优良酵母菌种的客观性。

酵母强化大曲接种量优化及其生产应用

为提高泥坑浓香型白酒中高温大曲综合生产性能,该研究从中高温大曲中分离筛选菌株,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TCC)初筛,发酵实验复筛,获得发酵性能良好的酵母菌,并以Z综合得分为响应值,通过单因素试验及响应面试验对筛选菌株接种量进行优化,并将其用于强化大曲生产。结果表明,共分离纯化出8株菌株,其中,3株产酒性能良好的菌株Y1、Y2、Y3,其最佳接种量分别为7.0×10^(8)CFU/mL、3.0×10^(8)CFU/mL、1.5×10^(8)CFU/mL,在此优化复配条件下,主成分Z综合得分为513,所生产的强化大曲发酵力、糖化力和液化力分别为3.46 g/(g·72 h)、994 mg/(g·h)、1.12 g/(g·h),比优化前提高了424%、6.7%和5.7%。

新疆野生葡萄酒酵母的筛选

葡萄酒营养丰富,长期饮用可强身健体.在我国倡导和发展葡萄酒生产是一件既可增进人民身体健康,提高国民消费水个。

广谱碳源产油酵母菌的筛选及培养基优化

以葡萄糖、木糖和阿拉伯糖及三者混合糖为碳源,对8株酵母菌的菌体油脂积累能力进行初步测定,并对PR61菌株产油条件进行优化.实验发现:当以D-葡萄糖为唯一碳源时,所有菌株油脂含量都超过20%(质量分数,以下同);利用D-木糖发酵时,有6株菌株油脂含量超过了20%;利用L-阿拉伯糖发酵时,各菌株油脂含量均较葡萄糖和木糖低;上述菌株利用混合糖(m(D-葡萄糖)∶m(D-木糖)∶m(L-阿拉伯糖)=40∶20∶8)发酵时,有5株菌株油脂含量超过30%,且部分菌株利用混合糖的能力超过了葡萄糖.研究表明:菌株PR61利用各种碳源时的生物量和油脂产量均较高.采用U10(108)均匀设计对其产油条件进行优化,结果如下(g/L):碳源(m(D-葡萄糖)∶m(D-木糖)=2∶1)质量浓度130,硫酸氨质量浓度2,酵母粉质量浓度1,七水硫酸镁质量浓度0.1,磷酸二氢钾质量浓度2,碳氮比131.在上述条件下菌株PR61的油脂产量可达4.336 g/L.

酵母双杂交系统筛选与水稻条纹病毒Pc2互作的寄主蛋白基因片段

水稻条纹病毒编码的Pc2蛋白在病毒侵染及宿主症状发生中起作用。研究其与寄主间的分子互作有助于揭示病毒侵染与致病的分子机制。分别将编码Pc2N端（Pc2-N）与Pc2C端（Pc2-C）的基因片段克隆到酵母双杂交诱饵载体pGBKT7上．并构建水稻叶片cDNA文库．然后分别用Pc2-N和Pc2-C为诱饵筛选文库寻找与其互作的寄主因子。结果表明．诱饵载体中插入的Pc2-N和Pc2-C编码框和氨基酸序列均正确。Pc2-N对酵母菌株AHl09无毒性和自主激活能力，但Pc2-C对酵母具有细胞毒性。文库滴度为4x107CFU／mL．且大多数插入片段在500～2000bp之间。利用Pc2-N为诱饵筛选水稻cDNA文库．获得有8个候选阳性克隆。经序列测定和BLAST分析结果表明．这些克隆共编码5种蛋白．主要为胁迫相关蛋白与光系统相关蛋白。

酵母双杂交筛选白细胞中新基因NS3TP6结合蛋白基因

目的:用酵母双杂交技术筛选白细胞中与丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白3(NS3)反式调节靶基因编码产物NS3TP6 蛋白结合蛋白的基因. 方法:用多聚酶链反应(PCR)法扩增HCV NS3TP6蛋白基因,连接入酵母表达载体pGBKT-7中构建诱饵质粒,转化酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人白细胞文库质粒的酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基上进行双重筛选阳性菌落,增菌后提取质粒,转化入大肠杆菌,提取质粒并测序,进行生物信息学分析. 结果:成功克隆出HCV NS3TP6蛋白基因并在酵母细胞中表达,配合后选出在四缺(SD/-Trp-Leu-Ade-His)培养基和铺有X-α-半乳糖(X-α-gal)的四缺培养基上均能生长并变成蓝色的真阳性菌落共7个,其中3个人类白细胞CD14抗原,1个人类免疫球蛋白入轻链,3个人类推定蛋白基因(AC124014,AC097504,AC023785). 结论:成功克隆出NS3TP6蛋白的结合蛋白,为进一步研究HCV的作用提供了新线索.

重组酵母筛选法评估黑种草中酚性化合物的雌激素活性

毛茛科植物黑种草(Nigella damascena)为生长于欧洲温带草原的常见草本植物。其种子芳香,与家黑种草(N. sativa)相同,在地中海以东国家被广泛用作面包和奶酪中的调味剂,民间用于调经。主要成分有生物碱、萜类和一些常见黄酮类化合物。据报道从黑种草种子极性溶剂提取物中分离出一些简单的酚性化合物。本次采用含有人雌激素受体的体外酵母雌激素筛选法(YES),检测了黑种草种子提取物及其酚性成分的雌激素活性。

酵母双杂交文库筛选及hTRIP15与Y盒结合蛋白-1相互作用的探讨

为探讨甲状腺素受体相互作用蛋白(hTRIP15)是否与其他核蛋白发生相互作用,以hTRIP15作为诱饵,用酵母双杂交技术筛选人肝cDNA文库,在高严格度选择培养基(SD-Trp-Leu-Ade-His)上长出的克隆773个,再经β-gal表达和PCR等技术进一步缩小范围,经Blastn搜寻最终显示2个重复克隆编码一种共调节辅因子——Y盒结合蛋白-1(YB-1).将插入序列与全长YB-1比较发现进入ORF内230bp,插入序列编码82aa,该蛋白称为YB-1-p,经蛋白体外翻译及GST-pulldown试验证实YB-1-p与hTRIP15发生相互作用.提示hTRIP15可通过与YB-1相互作用,参与调控MHCII及TSH受体等甲状腺细胞重要基因表达.

新疆哈萨克族奶酪中潜在益生酵母菌的筛选

前期,从新疆哈萨克族奶酪中分离到127株酵母菌,选取其中生长状况良好18株菌进行潜在益生酵母菌筛选试验。在不同胆盐质量浓度、不同p H值、模拟人体胃液及温度的条件下进行培养,并以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌为指示菌,观察其抑制有害菌的能力,同时对菌株的表面疏水性及自动聚集能力也进行测定,系统的分析了菌株的益生特性。最终,在18株酵母菌中得到4株菌(Y1、H1、Y36-6、L4)在以上条件下有较好的存活率,为潜在益生酵母菌。并对这4株酵母菌进行生理生化试验及26S r DNA序列测定,将结果同NCBI数据库中提供的酵母菌序列进行比对,以DNA Star软件进行相似性分析,得到H1菌株属于马克斯克鲁维酵母菌属(Kluyveromyces)相似度为99%,Y1菌株属于酿酒酵母属(Saccharomycete)相似度为99%,Y36-6和L4属于毕赤酵母属(Pichia kudriavzevii)相似度99%。

啤酒酵母筛选评价方法的建立与应用

啤酒酵母的质量直接关系到成品啤酒的质量。大生产中，由于啤酒酵母不断移接或只是在实验室简易保藏，容易导致形态变异、发酵缓慢、死亡率高、双乙酞还原慢、凝聚性差、酵母自溶等现象，严重影响啤酒质量。因此，我司每年定期开展优良酵母的筛选工作，以确保酵母的品种质量。

用重组酵母筛选模型评价黑种草中酚类成分的雌激素样活性

黑种草 Nigella damascena L.种子的主要成分为生物碱、萜类和黄酮类。作者采用重组酵母雌激素实验法研究了该植物种子的多种提取物及酚类成分的雌激素样活性。试药为该植物种子的甲醇、氯仿-甲醇和水提取物及3种酚类成分2,4-二羟基苯乙酸(1)、3,4-二羟基-β-苯乙醇(2)和2,4-二羟基苯乙酸甲酯(3),17β-雌二醇作阳性对照。

筛选啤酒酵母的标准培养基研究

本文以大生产麦汁成分的含量作为参考,通过查阅文献资料了解酵母培养所需的组分,以此为基础,研制标准培养基的配料单.结合与大生产麦汁做发酵性能测试,测试指标包括降糖速度、风味组分、还原双乙酰等指标,最终确定合理的配方并验证其发酵性能的稳定与重复性.试验结果表明,配制培养基与大生产麦汁的各项发酵性能接近,具有较好的重复与稳定性.可以用于酵母筛选,从而确定筛选优良酵母菌种的客观性.

酵母双杂交法筛选组织蛋白酶B相互作用蛋白质

组织蛋白酶B是肿瘤侵袭和转移密切相关的一种蛋白酶,研究其作用网络对于开发基于组织蛋白酶B的抗肿瘤药物非常重要。采用酵母双杂交技术构建相关文库,以人组织蛋白酶B作为诱饵蛋白质,寻找其在肿瘤细胞中的直接相互作用蛋白质。在84个初始阳性克隆中,共有15个能通过3个报告基因的检测。BLAST分析发现,在GenBank数据库中可以匹配7个基因,编码7种已知的蛋白质:BCL2-associated athanogene 6 (BAG6), filaminA,alpha(FLNA),ras homolog family member G (RHOG),metallothionein 2A (MT2A), ZXD family zinc finger C(ZXDC),DEP domain containing 7(DEPDC7),A kinase(PRKA) interacting protein 1(AKIP1)。