期刊文献+
共找到475篇文章
< 1 2 24 >
每页显示 20 50 100
甲基营养型酵母系统表达的重组人表皮生长因子的纯化及其性质 被引量:15
1
作者 黄秉仁 蔡良婉 +11 位作者 王欣 马雪梅 马晓骊 李旌军 李红卓 韦忠明 梁青 郑华军 唐琪浩 唐申秀 廖洪涛 向绪传 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期106-110,共5页
目的 获得可用于动物试验和临床试验的人表皮生长因子原料药。方法 化学合成的人表皮生长因子基因在甲基营养型酵母中表达并分泌到培养基中的人表皮生长因子蛋白经 Phenysepharose 6 Fast Flow( high sub)柱、 Q-sepharose High Perfo... 目的 获得可用于动物试验和临床试验的人表皮生长因子原料药。方法 化学合成的人表皮生长因子基因在甲基营养型酵母中表达并分泌到培养基中的人表皮生长因子蛋白经 Phenysepharose 6 Fast Flow( high sub)柱、 Q-sepharose High Performance柱、 Superdex 30柱纯化后进行生物学性质检测。结果 纯化后的蛋白产物纯度达 98%,是无热源、无内毒素、无甲基营养型酵母染色体 DNA污染的,有正确的分子量、等电点、氨基末端氨基酸顺序、肽图、紫外光谱、及生物活性性质的重组蛋白。结论 纯化蛋白符合动物试验和临床试验的要求,为制备多种人表皮生长因子制剂进行动物实验和临床试验打下了基础。 展开更多
关键词 重组人表皮生长因子 纯化 化学性质研究 生物活性 甲基营养型酵母系统
下载PDF
乙型肝炎病毒表面抗原preS2+S基因在Pichia Pastoris酵母系统的分泌表达 被引量:1
2
作者 徐丽宏 梁国栋 +5 位作者 付士红 宋宏 王大维 苏乃伦 夏国良 张智清 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期224-229,共6页
拟获得adw2亚型乙型肝炎(乙肝)病毒表面抗原preS2+S基因在PichiaPastoris酵母分泌型表达系统(pPIC9K)的高效表达。实验首先将adw2亚型乙肝病毒表面抗原preS2+S基因重组到分泌型酵母表达载体(pPIC9K)形成表达质粒,电转化酵母细胞KM71,G41... 拟获得adw2亚型乙型肝炎(乙肝)病毒表面抗原preS2+S基因在PichiaPastoris酵母分泌型表达系统(pPIC9K)的高效表达。实验首先将adw2亚型乙肝病毒表面抗原preS2+S基因重组到分泌型酵母表达载体(pPIC9K)形成表达质粒,电转化酵母细胞KM71,G418筛选多拷贝整合克隆,经甲醇诱导表达并用SDS-PAGE电泳及酶免疫法检测表达产物。经100个克隆筛选获得了表达量较高的表达菌株WC4。该菌株甲醇诱导后细胞上清10倍浓缩SDS-PAGE电泳检测显示,细胞上清中有特异蛋白条带,且第6天表达量最高,表达产物单体分子量为31kD左右。用美国雅培公司AUZYMEMONOCLONAL试剂盒估算表达量为2μg/100OD600细胞。上述结果表明,乙肝病毒表面抗原preS2+S基因在本系统中获得了分泌表达。同时检测了酵母细胞裂解液中特异蛋白质的表达,结果发现,自甲醇诱导后第一天即可检测到表达产物,而且除了第6天细胞外表达量高于细胞内外,其余各天的表达水平均表现为细胞内高于细胞外。以上结果提示,利用分泌型酵母表达系统表达乙肝病毒表面抗原在技术上可行,但表达产量偏低,一些蛋白滞留在细胞内未能分泌到培养基中。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 表面抗原pres2+S基因 酵母系统 分泌表达
下载PDF
酵母系统表达疾病相关蛋白的研究 被引量:10
3
作者 单文娟 张富春 刘忠渊 《地方病通报》 2003年第4期98-99,共2页
关键词 毕赤巴斯德酵母 酵母系统 真核表达 疾病相关蛋白
下载PDF
脯氨肽酶在S.cerevisiae酵母系统中的表达
4
作者 池木根 高莉莎 《中国药理学会通讯》 2000年第3期49-49,共1页
关键词 脯氨肽酶 二肽水解酶 酵母系统 表达质粒 基因工程药物
下载PDF
人工合成的黑曲霉NRRL3135菌株植酸酶基因在毕赤酵母系统中的高效表达 被引量:40
5
作者 贝锦龙 陈庄 +3 位作者 杨林 廖玲 王珣章 蒋宗勇 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期254-258,共5页
本文以黑曲霉 (Aspergillusniger)NRRL3135菌株植酸酶基因为对象 ,通过基因人工合成的方法去除了该基因的内含子与信号肽编码序列 ,换用在毕赤酵母 (Pichiapastoris)中使用频率较高的密码子以优化其表达。该人工合成植酸酶基因 (PhyA as... 本文以黑曲霉 (Aspergillusniger)NRRL3135菌株植酸酶基因为对象 ,通过基因人工合成的方法去除了该基因的内含子与信号肽编码序列 ,换用在毕赤酵母 (Pichiapastoris)中使用频率较高的密码子以优化其表达。该人工合成植酸酶基因 (PhyA as)以N端融合的方式正确插入到毕赤酵母表达载体pPICZαA。通过电击将重组表达载体整合入酵母染色体DNA中得到重组转化子。SDS PAGE结果与表达产物酶学性质研究表明植酸酶得到分泌表达 ,且与天然产物性质基本一致。筛选得若干株高产基因工程菌 ,其中SPAN Ⅲ菌株达到了在摇床培养条件下 ,每毫升发酵液产生 16 5 0 0 0u植酸酶的水平 。 展开更多
关键词 基因人工合成 植酸酶基因 phyA-as 毕赤酵母表达系统
下载PDF
G145R突变后乙型肝炎病毒表面抗原在酵母系统的表达及其免疫学特性分析 被引量:1
6
作者 徐丽宏 梁国栋 +5 位作者 付士红 曹玉玺 关坤萍 夏国良 吴士俊 张智清 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期253-258,共6页
为了研究乙型肝炎(乙肝)病毒表面抗原(HBsAg)发生G145R突变后的免疫学特性改变情况,首先利用Pichiapastoris酵母表达系统分泌表达G145R突变后的HBsAg的preS2+S(中蛋白),用重组表达产物免疫小鼠,酶联免疫吸附试验(ELISA)和Westernblot实... 为了研究乙型肝炎(乙肝)病毒表面抗原(HBsAg)发生G145R突变后的免疫学特性改变情况,首先利用Pichiapastoris酵母表达系统分泌表达G145R突变后的HBsAg的preS2+S(中蛋白),用重组表达产物免疫小鼠,酶联免疫吸附试验(ELISA)和Westernblot实验等研究其抗原性和免疫原性与野毒型HBsAg的异同。从150个阳性表达克隆中筛选出一株表达量最高的克隆株MC23,Westernblot检测显示,表达的HBsAg中蛋白单体主带分子量在34kD、37kD左右,表达量约为200μg/L。用不同的HBsAg检测试剂检测其抗原性发现,G145R突变后的HB-sAg,用绝大多数试剂都不能很好地检出,检出能力只有野毒型HBsAg的50%或更低,但用美国雅培公司的试剂检出能力可达野毒的98%。G145R突变后的HBsAg中蛋白免疫小鼠后,血清中可检测到1∶1600的特异性表面抗体,该抗体与G145R突变后的HBsAg“a”决定簇合成肽P2-145R也能发生交叉反应,反应滴度为1∶80。但该抗体和野毒型HBsAg蛋白以及野毒“a”决定簇合成肽P1-wt均不反应。上述结果表明,G145R突变后的HBsAg中蛋白在Pichiapastoris酵母系统得到了分泌表达,表达产物仍具有较好的免疫原性,但和野毒HBsAg相比,其抗原性和免疫原性发生了明显改变。 展开更多
关键词 PICHIA pastoris酵母表达系统 乙肝表面抗原 G145R突变 免疫学特性
下载PDF
常见酵母表达系统的菌株及其在猪用疫苗研制中的应用
7
作者 侯恩慧 陈秋勇 +5 位作者 邱镜莉 连春红 吴学敏 马玉芳 周伦江 王隆柏 《福建畜牧兽医》 2024年第3期28-32,共5页
近年来,猪类疫病病毒不断发生变异,给全球生猪养殖业造成了巨大的经济损失,疫苗作为最有效的防控手段,其基因工程疫苗研究工作备受关注。本文总结常见酿酒酵母、汉逊酵母和毕赤酵母表达系统菌株的优势及其在猪用疫苗研制中的应用,为今... 近年来,猪类疫病病毒不断发生变异,给全球生猪养殖业造成了巨大的经济损失,疫苗作为最有效的防控手段,其基因工程疫苗研究工作备受关注。本文总结常见酿酒酵母、汉逊酵母和毕赤酵母表达系统菌株的优势及其在猪用疫苗研制中的应用,为今后酵母表达系统在研制猪用疫苗方面提供理论参考。 展开更多
关键词 酵母 酵母载体系统 猪用疫苗
下载PDF
橡胶树膜系统酵母双杂交cDNA文库构建及HbSRPP7互作蛋白筛选 被引量:2
8
作者 聂智毅 康桂娟 +1 位作者 覃怀德 曾日中 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2023年第9期1735-1744,共10页
橡胶树橡胶粒子上的蛋白质在橡胶生物合成一系列反应过程中起着关键作用,它们直接决定着橡胶烃分子的数量和大小,影响天然橡胶的产量和质量。小橡胶粒子蛋白(small rubber particle protein,SRPP)是丰度仅次于橡胶延伸因子(rubber elong... 橡胶树橡胶粒子上的蛋白质在橡胶生物合成一系列反应过程中起着关键作用,它们直接决定着橡胶烃分子的数量和大小,影响天然橡胶的产量和质量。小橡胶粒子蛋白(small rubber particle protein,SRPP)是丰度仅次于橡胶延伸因子(rubber elongation factor,REF)的橡胶粒子蛋白组分,与橡胶粒子发育和橡胶生物合成密切相关。目前已知橡胶粒子上存在多种SRPP家族蛋白,但大部分成员的功能尚不清楚。SRPP可能通过与其他橡胶粒子蛋白相互作用发挥功能。为了筛选SRPP蛋白家族成员之一Hb SRPP7的互作蛋白,本研究利用位点特异性重组技术构建了原始库容为1.5×10^(7)CFU的均一化橡胶树胶乳膜蛋白酵母双杂交系统(membrane yeast two-hybrid system,MYTH)cDNA文库,该文库插入片段平均长度大于1500 bp,重组率约为100%。构建了用于MYTH系统筛选HbSRPP7互作蛋白的pBT3STE-SRPP7和pBT3SUC-SRPP7诱饵载体并确认其能在NMY32酵母菌株中正确表达,无自激活活性。使用pBT3STE-SRPP7诱饵质粒对胶乳MYTHcDNA文库进行筛选,获得21个HbSRPP7候选互作的蛋白,包括3个REF家族蛋白(HbREF1、HbREF3和HbREF8)、2个SRPP家族蛋白(HbSRPP1、HbSRPP2)、2个活性氧清除相关蛋白(thioredoxin H-type-like、L-ascorbate peroxidase 2)以及5个胁迫相关蛋白(high mobility group Bprotein 2-like、RPM1-interacting protein 4-like、stress-related protein-like、salt stress-induced hydrophobic peptide ESI3-like和F-box/kelch-repeat protein)。结果显示HbSRPP7除了可能通过与橡胶生物合成相关的橡胶粒子蛋白互作参与橡胶生物合成,也可能通过与生物和非生物逆境胁迫相关蛋白互作,响应橡胶树乳管生物和非生物逆境胁迫系统信号,参与橡胶粒子上的橡胶生物合成调控。该研究结果有助于了解SRPP家族蛋白的功能,为揭示橡胶粒子上参与橡胶生物合成的蛋白复合体组成,阐明橡胶生物合成及其调控的分子机制奠定基础。 展开更多
关键词 橡胶树 HbSRPP7 膜蛋白酵母双杂交系统 CDNA文库 互作蛋白
下载PDF
一个新的PMA诱导相关基因在Pichia pastoris酵母系统中的表达 被引量:1
9
作者 黄燕 吴超群 +6 位作者 和桂芬 刘建平 连福治 薛波 陈华 谢毅 毛裕民 《复旦学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期656-659,共4页
利用包含 40 96条各种人类基因的DNA芯片研究了代谢增强剂PMA(phorbolmyristateacetate)激活的人单核巨噬细胞HTP 1的早期应答基因 ,根据已有的旧基因信息 ,实验结果基本反映了人单核巨噬细胞早期应答基因的表达谱 .选取其中一条候选早... 利用包含 40 96条各种人类基因的DNA芯片研究了代谢增强剂PMA(phorbolmyristateacetate)激活的人单核巨噬细胞HTP 1的早期应答基因 ,根据已有的旧基因信息 ,实验结果基本反映了人单核巨噬细胞早期应答基因的表达谱 .选取其中一条候选早期应答基因为后续研究对象 ,并进行蛋白质的酵母表达 ,为下游的基因功能研究奠定一定的基础 . 展开更多
关键词 PMA刺激 基因芯片 基因表达 酵母系统 极早期应答基因
原文传递
E.tenella河北株EtMIC-2基因的克隆及毕赤酵母系统表达
10
作者 张召兴 李佩国 +4 位作者 李蕴玉 张香斋 贾青辉 张艳英 丁咚 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期939-942,共4页
为表达鸡柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)河北株EtMIC-2蛋白,本试验采用RT-PCR方法克隆出E.tenella河北株EtMIC-2基因,连接到毕赤酵母分泌表达载体pPIC9中,构建重组表达载体pPIC9-EtMIC-2。将其线化后转化到巴斯德毕赤酵母GS115中,甲醇诱导表... 为表达鸡柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)河北株EtMIC-2蛋白,本试验采用RT-PCR方法克隆出E.tenella河北株EtMIC-2基因,连接到毕赤酵母分泌表达载体pPIC9中,构建重组表达载体pPIC9-EtMIC-2。将其线化后转化到巴斯德毕赤酵母GS115中,甲醇诱导表达,饱和硫酸铵4℃沉淀浓缩后,用His选择镍-亲和层析柱纯化EtMIC-2蛋白。采用SDS-PAGE和Western blot方法验证其蛋白的表达。结果表明,构建的重组表达载体pPIC9-EtMIC-2在毕赤酵母菌中表达出相对分子质量约为45 000的目的蛋白,表达的EtMIC-2蛋白能被E.tenella阳性血清识别,具有良好的免疫反应原性。为进一步研究EtMIC-2蛋白功能及构建DNA疫苗奠定基础。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 EtMIC-2基因 毕赤酵母系统 Western blot
原文传递
新型佐剂蛋白TFPR1在毕赤酵母系统中的表达及鉴定 被引量:2
11
作者 宁秀哲 寇志华 +7 位作者 孙维来 朱青 杨裔 邱洪杰 郭晶晶 郭彦 于虹 周育森 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期294-299,共6页
目的:利用毕赤酵母系统表达一种基于蛇毒蛋白triflin的致病相关蛋白1( PR-1)功能区蛋白 TFPR1。方法从质粒 pUC57-TFPR1中 PCR 扩增目的基因,插入毕赤酵母表达载体pPICZαA,构建重组表达质粒pPICZαA-TFPR1,转染入巴斯德毕赤酵母野生... 目的:利用毕赤酵母系统表达一种基于蛇毒蛋白triflin的致病相关蛋白1( PR-1)功能区蛋白 TFPR1。方法从质粒 pUC57-TFPR1中 PCR 扩增目的基因,插入毕赤酵母表达载体pPICZαA,构建重组表达质粒pPICZαA-TFPR1,转染入巴斯德毕赤酵母野生型X33菌株,经甲醇诱导表达重组蛋白TFPR1,采用ELISA法筛选阳性菌株后,SDS-PAGE及Western blot对表达产物进行鉴定。结果重组表达质粒pPICZαA-TFPR1经双酶切和测序鉴定证明构建正确;重组蛋白以分泌形式表达,相对分子质量约16&#215;103。结论利用巴斯德毕赤酵母表达系统成功表达TFPR1蛋白,为进一步研究其功能和作为佐剂的应用提供参考资料。 展开更多
关键词 佐剂 致病相关蛋白 毕赤酵母系统 分泌表达 PATHOGENESIS related protein 1 (PR-1)
原文传递
酵母表达系统及其应用研究 被引量:9
12
作者 吴丽娟 蒋建新 +2 位作者 朱佩芳 王正国 康格非 《生命的化学》 CAS CSCD 2003年第1期46-49,共4页
酵母表达系统是研究真核蛋白质表达和分析的有力工具 ,拥有转录后加工修饰功能 ,适合于稳定表达有功能的外源蛋白质。与昆虫表达系统和哺乳动物表达系统相比 ,酵母表达系统操作简便 ,成本低廉 ,可大规模进行发酵 ,是最理想的重组真核蛋... 酵母表达系统是研究真核蛋白质表达和分析的有力工具 ,拥有转录后加工修饰功能 ,适合于稳定表达有功能的外源蛋白质。与昆虫表达系统和哺乳动物表达系统相比 ,酵母表达系统操作简便 ,成本低廉 ,可大规模进行发酵 ,是最理想的重组真核蛋白质生产制备用工具。介绍了酵母表达系统的特点、常用酵母表达系统 (载体和菌株 )、酵母表达的一般步骤。 展开更多
关键词 酵母表达系统 应用研究 基因工程 外源蛋白质
下载PDF
酵母表面展示系统研究进展 被引量:18
13
作者 郭波 谢佩蓉 +1 位作者 邹强 郑萍 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第1期19-22,共4页
酵母表面展示系统是继噬菌体展示技术创立后发展起来的真核展示系统 ,酵母的蛋白质折叠和分泌机制与哺乳动物细胞非常相似 ,对人的蛋白质表达和展示更具优越性 .酵母细胞颗粒大 ,可用流式细胞仪进行筛选和分离 .目前报道的两种酵母展示... 酵母表面展示系统是继噬菌体展示技术创立后发展起来的真核展示系统 ,酵母的蛋白质折叠和分泌机制与哺乳动物细胞非常相似 ,对人的蛋白质表达和展示更具优越性 .酵母细胞颗粒大 ,可用流式细胞仪进行筛选和分离 .目前报道的两种酵母展示系统分别以α或a凝集素作为融合骨架 .在蛋白质的定向进化、口服疫苗的研制等多方面均有报道 . 展开更多
关键词 酵母表面展示系统 酿酒酵母 定向进化 口服疫苗
下载PDF
巴斯德毕赤酵母表达系统及其高水平表达策略 被引量:17
14
作者 胡世界 罗素兰 +1 位作者 张吉贞 长孙东亭 《生物技术》 CAS CSCD 2007年第6期78-83,共6页
毕赤酵母表达系统是目前最为成功的外源蛋白表达系统之一,与现有的其它表达系统相比,巴斯德毕赤酵母在表达产物的加工、外分泌、翻译后修饰以及糖基化修饰等方面有明显的优势,现已广泛用于外源蛋白的表达。该文综述了其自身的优点,表达... 毕赤酵母表达系统是目前最为成功的外源蛋白表达系统之一,与现有的其它表达系统相比,巴斯德毕赤酵母在表达产物的加工、外分泌、翻译后修饰以及糖基化修饰等方面有明显的优势,现已广泛用于外源蛋白的表达。该文综述了其自身的优点,表达载体和宿主菌的特点,以及高水平表达外源基因的策略。 展开更多
关键词 巴斯德毕赤酵母 酵母表达系统 高水平表达 表达策略
下载PDF
酵母基因报道系统检测环境二恶英类似物的污染 被引量:7
15
作者 黄莉 王建华 +5 位作者 戴丽军 刘寒英 邱剑峰 文端成 冯媛瑜 李冰 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 2004年第4期493-496,共4页
利用一套酵母基因报道检测系统 ,建立和标化了对二恶英类标准样品测定的方法 ,证明此系统可检测ng级的二恶英及其类似物 ,具有简单、快速的的特点 .对广州市区工业和生活污水排放较为集中的水体进行的测定显示 ,二恶英及其类似物在部分... 利用一套酵母基因报道检测系统 ,建立和标化了对二恶英类标准样品测定的方法 ,证明此系统可检测ng级的二恶英及其类似物 ,具有简单、快速的的特点 .对广州市区工业和生活污水排放较为集中的水体进行的测定显示 ,二恶英及其类似物在部分地区超标 ,而各区经处理的自来水均无超标污染 .对小鼠急性毒性实验的血清样品的测定同样证明系统能够测定未浓缩处理的复杂样本 ,具有一定的应用价值 .图 4参 展开更多
关键词 二恶英 污染 酵母基因报道系统 检测
下载PDF
Neuritin毕赤酵母表达系统的构建及其对PC12细胞的影响 被引量:4
16
作者 张树军 赵臣 +4 位作者 狄建军 穆莎茉莉 仙玲玲 于娜 黄瑾 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期148-152,共5页
旨在构建Neuritin的毕赤酵母表达系统获得大量有活性的Neuritin蛋白,研究其神经生物学功能。PCR扩增编码neuritin基因cDNA序列,并纯化回收,通过酶切和连接插入穿梭载体pPIC9K中,转化大肠杆菌DH5α,neuritin-pPIC9k重组质粒经PCR与测序... 旨在构建Neuritin的毕赤酵母表达系统获得大量有活性的Neuritin蛋白,研究其神经生物学功能。PCR扩增编码neuritin基因cDNA序列,并纯化回收,通过酶切和连接插入穿梭载体pPIC9K中,转化大肠杆菌DH5α,neuritin-pPIC9k重组质粒经PCR与测序鉴定后,使用SalⅠ酶切使其线性化,电击转化酵母菌GS115,经筛选与鉴定,成功构建了Neuritin的毕赤酵母表达系统。结果表明,使用甲醇诱导其表达,SDS-PAGE和Western blot分析得到11 kD的Neuritin蛋白,纯化的Neuritin蛋白加入PC12细胞培养液中,能促进其突起的生长。 展开更多
关键词 NEURITIN PPIC9K 毕赤酵母表达系统 PC12细胞
下载PDF
应用酵母双杂交系统筛选新基因AngRem104相关蛋白 被引量:4
17
作者 张艳玲 张宏 +2 位作者 梁秀彬 侯平 王海燕 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期369-372,共4页
目的 :应用酵母双杂交系统筛选与新基因AngRem10 4相互作用的蛋白 ,为该基因的功能研究提供线索。方法 :构建AngRem10 4的真核表达载体AngRem10 4 pGBKT7/c myc,转化酵母菌AH10 9,Westernblot证实蛋白表达 ,进行毒性和自激活检验 ,与... 目的 :应用酵母双杂交系统筛选与新基因AngRem10 4相互作用的蛋白 ,为该基因的功能研究提供线索。方法 :构建AngRem10 4的真核表达载体AngRem10 4 pGBKT7/c myc,转化酵母菌AH10 9,Westernblot证实蛋白表达 ,进行毒性和自激活检验 ,与转化了成人肾脏cDNA文库的酵母菌Y187接合 ,筛选与AngRem10 4相互作用的蛋白。结果 :AngRem10 4蛋白能在酵母中正常表达 ,对酵母细胞无毒性 ,不存在自激活现象。筛选出的蛋白包括真核翻译延伸因子 1α1、糖皮质激素受体AF 1特异延伸因子、β2 微球蛋白、巴戴 -比德尔综合征 2蛋白及 4个与细胞代谢有关的蛋白。结论 :AngRem10 4可能影响细胞内某些转录因子活性和细胞代谢 ,并与某些免疫相关疾病和遗传病发病有关。酵母双杂交结果为AngRem10 展开更多
关键词 酵母双杂交系统 筛选 基因 AngRem104 蛋白
下载PDF
用于废水处理系统中目标酵母动态解析的绿色荧光蛋白基因质粒构建 被引量:3
18
作者 韩云 邢新会 +2 位作者 杨敏 刘敏胜 娄恺 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第1期40-44,共5页
绿色荧光蛋白 (greenfluorescentprotein ,GFP)可用于研究复合微生物体系中特定目标功能菌的特性及动态变化 ,本研究为确立用于解析酵母细胞在混合酵母废水处理系统中的动态特性的GFP技术体系奠定了基础 .将gfp基因克隆到酵母载体pACT U... 绿色荧光蛋白 (greenfluorescentprotein ,GFP)可用于研究复合微生物体系中特定目标功能菌的特性及动态变化 ,本研究为确立用于解析酵母细胞在混合酵母废水处理系统中的动态特性的GFP技术体系奠定了基础 .将gfp基因克隆到酵母载体pACT URA3中 ,再用构建的重组质粒转化宿主菌大肠杆菌 (EscherichiacoliJM10 9) ,扩增得到含gfp的重组质粒 ,荧光显微镜照片显示 gfp基因在大肠杆菌内得到了表达 ,但表达程度不高 ;电泳图谱及聚合酶链反应结果表明 ,含 gfp基因的质粒不是以游离的形式存在 ,而可能是以某种特殊的形式和细胞染色体发生了相互作用 . 展开更多
关键词 绿色荧光蛋白 酵母菌处理系统 污泥膨胀 聚合酶链反应
下载PDF
应用酵母双杂交系统筛选橡胶延长因子REF的互作蛋白 被引量:7
19
作者 曾日中 李先昆 +3 位作者 聂智毅 代龙军 黎瑜 段翠芳 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期400-406,共7页
利用酵母双杂交系统,以橡胶树(Hevea brasiliensis)橡胶延长因子基因REF的开放阅读框(ORF)构建无自激活性的诱饵表达载体pBD-GAL4-REF,并筛选以pAD-GAL4-2.1载体构建的橡胶树胶乳cDNA文库,对阳性克隆的cDNA插入片段进行测序及生物学功... 利用酵母双杂交系统,以橡胶树(Hevea brasiliensis)橡胶延长因子基因REF的开放阅读框(ORF)构建无自激活性的诱饵表达载体pBD-GAL4-REF,并筛选以pAD-GAL4-2.1载体构建的橡胶树胶乳cDNA文库,对阳性克隆的cDNA插入片段进行测序及生物学功能分析。通过酵母双杂交筛选,共获得5种可能与REF互作的候选蛋白质,它们分别为与诱饵蛋白REF高度同源的REF家族成员、小橡胶粒子蛋白(SRPP)、翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)、激发子响应蛋白和泛素耦联酶E2,这表明橡胶延长因子REF除了与自身高度同源蛋白质可能存在相互作用之外,还可能与TCTP和激发子响应蛋白等其它蛋白质发生相互作用。这些结果有助于揭示橡胶粒子的生物学功能。 展开更多
关键词 橡胶树 橡胶延长因子REF 橡胶生物合成 酵母双杂交系统
下载PDF
环境雌激素基因重组酵母测评系统的应用 被引量:3
20
作者 孙欣 贾凌志 +1 位作者 王福玉 梁增辉 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期233-233,共1页
关键词 雌激素 基因重组 酵母测评系统 内分泌干扰物
下载PDF
上一页 1 2 24 下一页 到第
使用帮助 返回顶部