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题名抗菌肽SMAP-29在毕赤酵母中的表达
被引量:3
- 1
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作者
任耀军
薄新文
王新华
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机构
新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室
新疆师范大学资产处
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出处
《石河子大学学报(自然科学版)》
CAS
2008年第6期695-699,共5页
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基金
新疆兵团科技局基础研究项目(2006JC01)
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文摘
依据毕赤酵母密码子偏好性,设计合成抗菌肽SMAP-29成熟肽基因片段,克隆到表达载体pPIC3.5K上,SalI线性化后转化毕赤酵母GS115,418抗性筛选高拷贝克隆,再由酵母菌落PCR鉴定;阳性克隆用甲醇诱导表达,Tricine-SDS-PAGE分析,结果在诱导第2d的酵母裂解液中检测到与预期的SMAP-29分子量接近,约3.2kD的诱导表达带;Trizol法提取酵母总RNA,并通过RT-PCR扩增SMAP-29mRNA,发现表达期的酵母细胞中存在SMAP-29mRNA,而对照没有检出,表明SMAP-29在毕赤酵母中存在表达。
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关键词
SMAP-29
毕赤酵母
真核表达
酵母菌落pcr
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Keywords
SMAP-29
Pichia pastoris
eukaryotic expression
yeast colony pcr
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分类号
S852.64
[农业科学—基础兽医学]
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题名林麝白介素-2在毕赤酵母中的表达
被引量:2
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作者
赖彬
徐柳
岳碧松
邹方东
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机构
四川大学生命科学院生物资源与生态环境教育部重点实验室
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出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第1期36-41,共6页
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基金
国家科技部(项目编号:2003CCA0300)项目资助
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文摘
克隆林麝(Moschus.berezovskii)白介素-2(interleukin-2,IL-2)到酵母表达载体pPIC9K,SalⅠ酶切后转化毕赤酵母GS115,G418抗性筛选高拷贝克隆,再由酵母菌落PCR鉴定;阳性克隆用甲醇诱导表达,SDS-PAGE分析,结果在诱导至第6d的酵母上清浓缩液中,检测到与预测林麝IL-2分子量相接近的,分子量约为18Ku的诱导表达带;TRIzol提取表达期间的酵母总RNA,并通过RT-PCR扩增IL-2mRNA,发现表达期的重组酵母细胞中存在IL-2mRNA,而对照没有检出,表明林麝IL-2存在低水平的表达。
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关键词
林麝IL-2
毕赤酵母
真核表达
酵母菌落pcr
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Keywords
moschus berezovskii IL-2
picha pastoris
eukaryotic expression
yeast colony pcr
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分类号
S852.4
[农业科学—基础兽医学]
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