衍生化-气相色谱-质谱法和酵母试剂盒法联合测定水中8种雌激素浓度

应用衍生化-气相色谱-质谱法和酵母试剂盒法,对不同性质水样中的β-雌二醇、雌酮、雌三醇、戊酸雌二醇、己烯雌酚、乙炔基雌二醇、双酚A和4-壬基酚等8种雌激素进行联合测定和效应比对。结果表明:两种方法联合测定可以同时检测雌激素的浓度和效应大小,更全面地体现水中雌激素的污染水平,使雌激素浓度与其效应相对应并相互验证,排除单一方法中可能出现的假阳性现象。

应用RAPD技术鉴定地霉的实验研究

目的探讨RAPD技术在快速鉴定地霉中应用。方法用E.Z.N.A.yeastDNAkit提取地霉菌基因组DNA,采用随机引物AP3(5'-TCGTAGCCAA-3')、ATG(5'-ATGGATCGGC-3')、RP2(5'-AAGGATCAGA-3')、OPA-10(5'-GTGATCGCAG-3')对临床上致病性白地霉、林生地霉皮损株和血液株的基因组DNA进行扩增,对各病原菌的DNA指纹的特征进行分析。结果成功提取了地霉的基因组DNA,其纯度和浓度均能满足PCR反应的要求。利用4种引物对基因组DNA进行扩增,不同种真菌的DNA显示不同的DNA带型,分离自不同感染部位的同种不同株真菌的DNA显示的主要DNA带型基本一致。结论采用E.Z.N.A.yeastDNAkit提取的地霉基因组DNA可以用于PCR反应。RAPD法鉴定地霉菌简单、快速、特异,可用于临床诊断。

改良Chelex-100快速提取白色念珠菌DNA作为PCR扩增模板方法

目的:旨在找到一种快速简便提取白色念珠菌DNA的方法。方法:用改良Chelex-100法和离心柱型酵母基因组DNA提取试剂盒分别提取白色念珠菌DNA,对提取结果进行了紫外分光光度比较及聚合酶链式反应的比较鉴定,且对两种方法提取的DNA保存1月、2月、4月后,经聚合酶链式反应比较稳定性有无差异。结果:用改良Chelex-100法提取的白色念珠菌基因组DNA纯度低于离心柱型酵母基因组DNA提取试剂盒法,差异有统计学意义(=0.000),而两种方法提取DNA的浓度差异无统计学意义(=0.241)。经聚合酶链式反应鉴定,两种方法均可得到明亮、清晰的特异性扩增条带,且DNA经过1月、2月、4月保存后聚合酶链式反应无差异。结论:改良Chelex-100可满足白色念珠菌PCR特异性扩增的需要,具有灵敏、快速、简便、经济的优点,适合白色念珠菌的普查性检出。