前列腺抗原酶促化学发光免疫分析方法学的建立

应用鲁米诺-过氧化氢发光体系建立定量测定血清前列腺特异性抗原含量的酶促化学发光免疫分析方法。该方法测量范围为1.5～80μg/L,灵敏度为0.12μg/L,批内变异<5%,批间变异<15%。回收率为83.8%～118.7%,稀释实验测定值与稀释度呈线性相关,相关系数为0.999。本方法与免疫放射分析方法的相关方程y=1.07x+0.68,相关系数r=0.97。

游离前列腺特异性抗原酶促化学发光免疫分析方法学的建立

采用双抗体夹心法建立了定量测定血清游离前列腺特异性抗原含量的酶促化学发光免疫分析方法,其中,1株抗总前列腺特异性抗原的单克隆抗体作为包被抗体,另1株抗游离前列腺特异性抗原的单克隆抗体作为标记抗体。总测量范围为0.2^10 ng/mL,灵敏度为0.01 ng/mL,批内变异〈10%,批间变异〈20%。本方法与Monobind游离前列腺特异性抗原化学发光测定试剂盒比对的相关方程为y=0.72x-0.22,相关系数r=0.90。

促黄体生成激素酶促化学发光免疫分析方法的建立

采用双抗体夹心一步检测法和鲁米诺-过氧化氢发光体系建立了血清促黄体生成激素（LH）的酶促化学发光免疫分析方法。结果显示，本方法测量范围为1．5-200IU／L，灵敏度为0．08IU／L，批内变异系数〈9％，批间变异系数〈11％，回收率为96．3％～112．1％，稀释实验测定值与稀释度呈线性相关，相关系数r=0．995。与进口酶促化学发光免疫分析试剂盒测定的临床值进行比较，线性相关方程为y=0．967x＋0．0689，相关系数r=0．975，相关性良好。方法学鉴定结果符合免疫分析的基本要求。

CA125酶促化学发光免疫分析方法的建立

CA125是细胞表面的一种高分子糖蛋白。对卵巢癌患者血清中CA125浓度进行测量，结果显示80％的上皮癌患者血清中的CA125含量有所升高，而健康女性中CA125升高比例只有不到1％，所以利用CA125浓度值来判断卵巢癌的发生具有重要的临床意义。酶促化学发光免疫分析方法继承了酶联免疫分析的特点，又普遍具有高灵敏度、快速检测等优点，已被医院大量使用。利用双抗体夹心法建立CA125酶促化学发光免疫分析方法具有重要意义。

人促甲状腺激素酶促化学发光免疫分析方法的建立

采用双抗体夹心法建立了定量检测人血清中促甲状腺激素含量的酶促化学发光免疫分析方法，其中，1株抗TSH抗体包被96孔微孔板，另1株与辣根过氧化物酶结合形成酶标记物，鲁米诺-过氧化氢作为发光底物。该方法测量范围为0.1～100 mIU/L ，分析灵敏度为0.04 mIU/L ，批内、批间变异系数分别为3.98％～6.48％和4.61％～13.1％，回收率为95.8％～117.4％，高浓度 TSH样品系列倍比稀释后，测定值与稀释度呈线性相关，相关系数大于0.99。与LH的交叉率＜1.62％，与FSH和 HCG的交叉率分别＜0.05％和＜0.02％。与罗氏化学发光免疫分析方法测定的临床值进行比较，相关性方程为 y＝1.10 x -0.207，相关系数 r＝0.969。与免疫放射分析试剂盒进行比较，相关性方程为 y＝1.00 x＋0.191，相关系数 r＝0.965。本方法操作简便、快速，适用于临床检测和科研应用。

促甲状腺激素生物素-亲和素酶促化学发光免疫分析方法的建立

目的建立一种低成本、高灵敏度的检测血清促甲状腺激素(TSH)的生物素-亲和素酶促化学发光免疫分析方法。方法引入生物素-亲和素放大系统,一株抗TSH的单克隆抗体包被微孔板,另一株标记生物素,辣根过氧化物酶标记链亲和素,鲁米诺作为发光底物,采用夹心法,建立TSH酶促化学发光免疫分析方法。结果方法分析灵敏度为0.01mIU/L,批内变异系数为2.01%～5.40%,批间变异系数为2.96%～17.9%,回收率为90.6%～114.4%,高值促甲状腺激素血清样品经系列倍比稀释后,测定值与稀释度呈线性关系,相关系数大于0.99,与原子高科TSH免疫放射分析方法和罗氏电化学发光分析法的测定值具有良好的相关性。结论生物素-亲和素TSH酶促化学发光免疫分析方法具有成本低、灵敏度高、特异性高和稳定性好的特点,具有广阔的应用前景。

抗苗勒氏管激素的生物素-链霉亲和素-辣根过氧化物酶酶促化学发光免疫分析方法的建立

目的:抗苗勒氏管激素(AMH)在评价卵巢储备功能方面具有更高的准确性,将其用于青春期、生育期女性的生育指导时具有很好的临床价值。目前对于AMH的检测,临床上常采用的是酶联免疫分析法,但存在灵敏度低、检测范围窄等缺点,而影响AMH实际水平的测定,使得对病情的预估不准确对疾病的治疗产生影响。因此,建立一种低成本、高敏感度的检测AMH水平的方法尤为重要。方法:利用生物素-亲和素放大系统,将一组抗AMH的第一抗体包被微孔板,同时用生物素标记第二抗体,与第一抗体-抗原复合物结合之后,再与生物素-链霉亲和素-辣根过氧化物酶结合物结合,加入发光底物,建立AMH酶促化学发光免疫分析方法,同时对这一体系的线性、灵敏度、特异度、稳定性、回收率等参数进行检测,并与常规ELISA法进行相比检测AMH浓度。结果:线性检测范围为(0.42～50.00)U/ml,该体系稳定性好,灵敏度0.42U/ml,批内差异小于10.0%,批间差异小于10.0%,与常规ELISA对比差异有统计学意义。结论:AMH的生物素-链霉亲和素-辣根过氧化物酶酶促化学发光免疫分析易于操作、灵敏度高、价格低廉,适用于临床检测。

鸡蛋中泰妙菌素化学发光酶免疫分析方法研究

针对鸡蛋中泰妙菌素的残留问题,通过半抗原及抗原设计合成、动物免疫及细胞融合筛选,成功得到可特异、灵敏识别泰妙菌素的单克隆抗体,并建立了泰妙菌素的化学发光酶免疫分析方法(CLEIA)。采用棋盘法结合单因素实验优化策略,确定最佳反应条件为:包被原质量浓度0.26µg/mL,抗体质量浓度0.94µg/mL,反应体系为0.02 mol/L的PBS(pH 7.4)缓冲液,酶标二抗质量浓度及其稀释液和反应时间分别为2µg/mL、PBST和40 min。在该条件下,建立了泰妙菌素的CLEIA方法,其IC_(50)为0.54 ng/mL,检出限(LOD,IC_(10))为0.03 ng/mL,线性检测范围(IC_(20)~IC_(80))为0.17~1.74 ng/mL,且与其它功能结构类似物无明显交叉反应,特异性良好。将建立的CLEIA方法用于鸡蛋实际样品的检测,加标回收率为100%~118%,相对标准偏差(RSD)小于10%,结果与HPLC-MS/MS(r^(2)=0.9987)一致,表明该方法适用于鸡蛋样品中泰妙菌素残留的快速筛查。

促甲状腺素受体抗体化学发光免疫分析法与酶联免疫分析法的对比研究

运用化学发光免疫分析法（CLIA）与酶联免疫分析法（ELISA）分别检测血清促甲状腺素受体抗体（TRAb）含量,分析比较两种方法的差异,探讨CLIA法检测TRAb的可行性和实用性。对象和方法1对象本院内分泌科门诊及住院随机患者血清样本共87例,男23例,平均年龄51±13岁;女64例,平均年龄43±15岁。

化学发光酶免疫法与放射免疫法检测血清β-绒毛膜膜促性腺激素的方法比较

目的研究化学发光酶免疫法检测替代放射免疫法检测的可靠性及在方法学上前者是否更具优势。方法利用两法分别检测血清 β-绒毛膜膜促性腺激素 (β- HCG) ,并进行精密度、准确度、病人结果可报告范围、分析灵敏度和特异性、回收率方面的比较。结果两法检测结果差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ,并且相关性良好 (r=0 .9972 ) ,但化学发光酶免疫法在病人结果可报告范围、精密度、分析灵敏度及抗干扰能力方面均优于放射免疫法。结论化学发光酶免疫法完全能够替代放谢免疫法 ,并且还具有报告范围宽、精密度和分析灵敏高、抗干扰能力强的优点。

一种新型酶促化学发光增强液的发光性能及其在免疫分析中的应用

在辣根过氧化物酶 /鲁米诺 /增强剂 /过氧化氢 (HRP/luminol/enhancer/H2 O2 )增强化学发光体系中 ,加入一系列辅助试剂 ,获得了一种灵敏度高、发光持续稳定、可长期贮存的新型酶促化学发光增强液。该增强液灵敏度为 2 4amol/孔 ,发光半衰期为 4 0min ,工作液在室温可稳定存放 1个月 ,在 37℃下可稳定存放 14d。在此基础上 ,在TSH BASECLEIA和AFPECLEIA上进行了应用。TSH BASE CLEIA测量范围为 0 17～ 35mIU/L ,信噪比大于 5;分析灵敏度为 0 0 4mIU/L ,功能灵敏度为0 0 6mIU/L ;批内变异系数为 2 96 %～ 5 0 5% ,批间变异系数为 4 0 1%～ 7 56 % ;回收率为 10 1%～119% ;稀释实验相关方程为y =4 4.6 50x + 0 .352 ,r =0 .996 ;与BayerACS :180系统进行方法学比较 ,相关方程为 y=0 .889x - 0 .351,r =0 .984。AFPECLEIA测量范围为 5～ 2 0 0 0ng/mL ,信噪比大于 4。动力学实验表明 ,加入发光液之后 15min测量 ,结果准确可靠。

促卵泡激素酶促化学发光免疫分析试剂盒的研制

采用双抗体夹心法建立了测定人血清FSH酶促化学发光免疫分析方法。本方法的测量范围为1.5～100 IU/L,灵敏度为0.36 IU/L,批内变异系数为1.0%～1.6%,批间变异系数为4.0%～4.6%,回收率为90.6%～117.8%,稀释实验测定值与稀释度呈线性相关,相关系数r=0.990。与TSH的交叉率<0.23%,与LH和HCG的交叉率分别<0.16%和<0.27%。与贝克曼化学发光免疫分析方法测定的临床值进行比较,相关性方程为y=0.85x-0.03,相关系数r=0.954。与免疫放射分析试剂盒进行比较,相关性方程为y=0.97x+5.29,相关系数r=0.965,与放射免疫分析试剂盒,进行比较,相关性方程为y=0.95x-3.82,相关系数r=0.954。方法学鉴定结果符合免疫分析的基本要求。

微粒子化学发光免疫测定促甲状腺素敏感性方法的建立与应用

目的 :建立一种低成本、高敏感性检测血清促甲状腺激素(TSH)的微粒子化学发光免疫分析 (CLEIA)方法。方法 :采用碱性磷酸酶标记的抗TSHβ亚单位特异性单克隆抗体 (mAb) ,与FITC偶联的抗TSHα亚单位的另一mAb配对 ,构成双抗体夹心免疫结合 ,用抗FITC多抗免疫磁珠做固相分离载体 ,用金刚烷胺CSPD为发光底物的非均相免疫分析法。结果 :方法灵敏度 4 μIU/L ,批内变异系数 (CV)平均为7.4 5 % ,批间CV平均为 10 .4 5 % ,回收率为 91.4 %～ 10 2 .4 %。将实际样品测定与ACS 180  系统检测的结果相比较有较好的相关性。结论 :微粒子化学发光定量测定TSH的成本低、灵敏度及特异性高和稳定性好 。

促甲状腺素受体抗体化学发光免疫、酶联免疫分析法检测比较

目的比较促甲状腺素受体抗体采用化学发光免疫、酶联免疫分析法(ELISA)检测的效果。方法选取我院2016年10月至2017年10月期间收治的150例甲状腺功能异常患者作为观察组,另选取150例健康体检者作为对照组。采用化学发光免疫及ELISA检测两组的促甲状腺素受体抗体水平,对比分析两种检测方式的结果。结果与化学发光免疫法相比,采用ELISA的对照组、甲状腺功能亢进、Graves患者的促甲状腺素受体抗体水平较高(P<0.05)。采用ELISA的对照组、甲状腺功能亢进、Graves患者的促甲状腺素受体抗体检测阳性率与化学发光免疫法比较无统计学差异(P>0.05)。化学发光免疫法和ELISA检测共同阳性103例,共同阴性151例,两种检测方法结果存在交叉状况。结论化学发光免疫法和ELISA检测促甲状腺素受体抗体的效果相当,两者均有优势,临床上将两种检测方法结合应用,可提升诊断效果。

应用化学发光酶免疫法检测甲亢和甲减患者血清TSH的结果分析

目的:了解应用化学发光酶免疫法检测促甲状腺激素(TSH)对甲状腺功能亢进症(hyperthyroidism,简称甲亢)和甲状腺功能减退症(hypothyroidism,简称甲减)患者的诊断价值。方法:将患者分为甲亢组和甲减组,采用化学发光酶免疫法测定治疗前后两组血清TSH含量。结果:两组患者血清促甲状腺激素(TSH)含量与治疗前比较,治疗后第50～70天差异无统计学意义(P>0.05),治疗后第71～120天差异有统计学意义(P<0.05)。结论:应用化学发光酶免疫法(CLEIA)检测血清TSH对于甲亢、甲减患者的及时诊治有非常重要的价值,应引起临床足够重视。

尿与血清中HCG的化学发光酶免疫分析法比较

目的测血HCG和尿HCG与妊娠及滋养细胞疾病辅助诊断的关系。方法用化学发光法检测30例妊娠或滋养细胞疾病妇女血HCG和尿HCG的浓度。结果妊娠及滋养细胞疾病妇女血HCG和尿HCG的检测值均升高。结论血和尿HCG显著增高对妊娠及滋养细胞疾病妇女诊断有一致性,并且血HCG比尿HCG更准确更有临床意义。

微粒子化学发光酶免疫法与放免法测定促甲状腺激素的临床价值比较

目的 为了比较微粒子化学发光酶免疫法 (chemiluminescentimmunoassay ,CLIA)及放射免疫法(radiomunoassay ,RIA)用于评价甲状腺功能的临床价值。 方法 分别采用这两种方法对 5 0例正常人 (对照组 )、5 0例甲状腺性甲亢患者 (甲亢组 )及 5 0例原发性甲减患者 (甲减组 )进行促甲状腺激素 (thyroidstimulatinghormone,TSH)、FT3 、FT4、TT3 、TT4等测定。结果 用CLIA测定sTSH甲亢患者与对照组比较具显著性差异 ,而用RIA测TSH则甲亢与对照组没有差别。对甲减患者 ,sTSH、TSH与对照组比较均具显著性差异。

基于化学发光磁酶免疫的HCG检测系统研究

介绍了一种基于化学发光磁酶免疫分析技术测定人绒毛膜促性腺激素(HCG)的检测系统。该检测系统通过良好的屏蔽和抗干扰设计,以高速高频的FPGA器件完成光子计数,实现对HCG的定量检测。对HCG抗原溶液的检测结果表明,检测系统在HCG抗原浓度为0.06～600ng/mL范围内线性关系良好,相关系数R=0.951。对检测系统进行重复性测试,变异系数为0.61%,重复性较好。该系统具有小型便携、灵敏度高、重复性好等特点,在疾病标志物现场检测领域具有较为广阔的应用前景。

化学发光酶免疫法与磁珠分离酶联免疫法检测血清β-绒毛膜促性腺激素的比较观察

目的研究化学发光酶免疫法检测替代磁珠分离酶免疫法检测的可靠性及在方法学上前者是否更具优势。方法利用两法分别检测血清β-绒毛膜促性腺激素(β-HCG),并进行精密度、准确度、病人结果可报告范围、分析灵敏度和特异性、回收率方面的比较。结果两法测定结果差异无显著性(P>0.05),并且相关性良好(r=0.9972),但化学发光酶免疫法在病人结果可报告范围、精密度、分析灵敏度及抗干扰能力方面均优于磁珠分离酶联免疫法。结论化学发光酶免疫法完全能够替代磁珠分离酶联免疫法,并且还具有报告范围宽、精密度和分析灵敏度高、抗干扰能力强等优点。

化学发光成像分析法定量检测人尿液中β-人绒毛膜促性腺激素

采用一种灵敏、简单的方法, 可实现对β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)的高通量检测.本法具有酶联免疫吸附(ELISA)法的特异性、增强化学发光法(ECL)的高灵敏度及化学发光成像分析高样品通量等优点.冷却电感耦合 (CCD)成像系统被用于检测增强化学发光信号.发光强度值与β-HCG在12.5 ～ 400 mIU/mL范围内呈线性关系;检出限为4 mIU/mL.测定了妇女尿液中β-HCG的含量,分析结果与医院的诊断结果一致.