两步酶分层消化法用于大鼠视网膜色素上皮细胞的培养

目的探索体外分离、培养大鼠视网膜色素上皮(RPE)细胞的方法,建立其体外培养模式。方法采用两步酶分层消化法分离获取大鼠RPE细胞,F12培养液培养;生长曲线、细胞分裂时间等指标观察细胞生存活力及增生状态;光镜、免疫组织化学法形态学鉴别及细胞鉴定,电镜观察超微结构。结果收获的大鼠RPE细胞纯度高,量多,体外生长旺盛,达到融合的时间较短。原代细胞呈多角形,含大量色素;传代细胞呈梭形。电镜显示胞浆内含黑色素颗粒及各种细胞器。结论两步酶分层消化法是分离培养大鼠RPE细胞的理想方法,培养的细胞可用于RPE的体外实验研究。

酶分层消化法获取视网膜纯感光细胞

探讨分离视网膜感光细胞的方法。方法 :采用 0 .2 5 %胰酶 (视网膜感光细胞面朝下法 )和 2 .5 %胰酶 + 0 .2 %胶原酶 +0 .4% EDTA的消化液 (视网膜感光细胞面朝上法 )酶分层消化法分离获取纯视网膜感光细胞。结果 :酶分层消化法可分离获取纯视网膜感光细胞。结论 :酶分层消化法是一种可靠。