应用酶切富集PCR法检测非小细胞肺癌患者胸腔积液表皮生长因子受体基因突变

目的探讨酶切富集PCR法检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者胸腔积液表皮生长因子受体基因(EGFR)外显子19缺失和外显子21 L858R突变的临床意义。方法采用EGFR基因突变酶切富集及非酶切富集PCR法对30例NSCLC患者胸腔积液游离核酸EGFR基因外显子19缺失和外显子21 L858R突变进行分析。结果30例NSCLC患者中,酶切富集PCR法分别检出EGFR基因外显子19缺失10例(33.3%)和外显子21 L858R突变5例(1.7%),非酶切富集PCR法则仅能分别检出6例(20.0%)和1例(3.3%);两种方法检出率差异有统计学意义(P=0.032)。在接受吉非替尼治疗的4例患者中,2例检出EGFR基因突变患者治疗后肿瘤均部分缓解。结论酶切富集PCR法可以高效、经济、准确地检测NSCLC患者胸腔积液游离核酸EGFR基因突变,可能成为临床NSCLC患者选择EGFR酪氨酸激酶抑制剂治疗的预测方法。

酶切富集PCR法在非小细胞肺癌患者EGFR基因突变检测中的应用

目的评价酶切富集PCR法在非小细胞肺癌患者EGFR基因突变临床检测中的可行性。方法应用酶切富集PCR及非酶切富集PCR法分析非小细胞肺癌患者EGFR基因突变状况。结果在50份肿瘤组织、55份血浆、15份血清标本中,酶切富集PCR法分别检出EGFR基因突变22例(44.0%)、29例(52.7%)、9例(60.0%),而非酶切PCR法则仅能检出EG-FR基因突变16例(32.0%)、7例(12.7%)、2例(13.3%),P=0.216、<0.001和0.008;应用酶切富集PCR法检测15例配对血浆、组织标本和15例配对血浆、血清标本EGFR基因突变,其检出率无明显差异(53.3%vs 46.7%和66.7%vs 60.0%)。结论酶切富集PCR法适用标本广泛、简便易行,便于临床非小细胞肺癌患者EGFR基因突变筛查。

非小细胞肺癌患者外周血表皮生长因子受体基因突变的检测及临床意义

目的探讨外周血表皮生长因子受体(EGFR)基因突变在非小细胞肺癌(NSCLC)吉非替尼治疗适宜患者筛选中的价值。方法对2005年12月至2007年12月在广州医学院第一附属医院肿瘤血液中心治疗的170例NSCLC患者,应用EGFR基因突变酶切富集PCR法分析血浆游离核酸EGFR基因外显子19缺失和外显子21L858R突变。分析血浆EGFR基因突变与性别、吸烟史、病理类型、TNM分期、吉非替尼治疗客观缓解率和疾病无进展生存期间的关系。结果 170例血浆标本共检出血浆EGFR基因突变77例,突变率为45.3%。血浆EGFR基因突变主要见于肺腺癌患者(P<0.001)及非吸烟者(P=0.001)。在33例接受吉非替尼治疗的患者中,血浆EGFR基因突变阳性患者的客观有效率和中位疾病无进展生存期均显著优于血浆EGFR基因突变阴性患者(P=0.001)。结论血浆游离核酸酶切富集PCR法能够灵敏而特异地检测NSCLC的EGFR基因突变。突变检测阳性者对吉非替尼的反应率明显高于野生型患者。

改良法对NSCLC患者癌组织及外周血K-ras基因常见突变位点的检测

目的建立改良的酶切富集PCR-焦磷酸测序技术,检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织与血浆中K-ras基因的突变情况。方法配对提取43例NSCLC患者的癌组织和血浆DNA,采用酶切富集PCR-焦磷酸测序技术检测K-ras基因第2外显子12及13密码子点突变,利用混合突变/野生型K-ras基因的细胞系(A549/HCC827)测定该方法的灵敏度。结果 NSCLC患者癌组织中K-ras突变率为9.3%(4/43),血浆中K-ras突变率为7.0%(3/43),均为12密码子突变,突变一致性达75%。混合细胞系检测显示,酶切富集PCR-焦磷酸测序技术的检测灵敏度达0.1%。结论酶切富集PCR-焦磷酸测序技术具有快速、准确、灵敏度高等优点,可用于临床NSCLC患者K-ras突变的筛查。