辣根过氧化物酶/吲哚乙酸系统作为基因导向性酶前体药物疗法的研究

目的:研究辣根过氧化物酶(HRP)/吲哚乙酸(IAA)系统作为基因导向性酶前体药物疗法(GDEPT)体外作用于人喉鳞癌Hep-2细胞株所产生的细胞毒性作用。方法:构建pcDNA3.1-HRP,将其瞬时转染Hep-2细胞后,Western blotting检测HRP蛋白的表达,MTT法检测加药IAA后对细胞增殖的影响。结果:pcDNA3.1-HRP构建成功,瞬时转染Hep-2细胞后Western blotting能检测到HRP蛋白的表达,MTT法显示HRP/IAA系统能较明显抑制细胞增殖。结论:HRP/IAA系统具备一定的作为基因导向性酶前体药物疗法治疗肿瘤的潜力。

基因导向性酶前体药物疗法在肿瘤治疗中的研究进展

基因导向性酶前体药物疗法 (GDEPT)为肿瘤生物治疗最引人注目的研究领域 ,是继手术、放疗和化疗等传统疗法之后 ,一种具有良好应用前景的肿瘤治疗新措施 ,主要包括HSV tk GCV系统疗法和CD 5 FC系统疗法。为克服传统GDEPT疗法的不足 ,目前多主张联合基因治疗肿瘤 ,有人还提出一种全新的GDEPT疗法。现综述近几年来GDEPT在肿瘤基因治疗中的研究进展。

抗体导向的酶前体药物疗法在肺癌治疗中的研究现状

近几年来,作为一种新型的肿瘤单克隆抗体导向治疗技术,抗体导向的酶前体药物疗法已引起广大研究者的极大兴趣。以肿瘤细胞表面抗原的单克隆抗体与酶的交联物以及该酶可以催化的前体药物所组成的这一系统,可以在肿瘤组织局部催化无活性的前体药物使之成为对肿瘤细胞具有高度杀伤活性的分子,从而在体内对肿瘤细胞发挥选择性的杀伤作用。本文就抗体导向的酶前体药物疗法及其在肺癌治疗中的研究现状作一介绍。

抗体导向的酶催化前体药物疗法

目的综述抗体导向的酶催化前体药物疗法(Antibody directed enzyme prodrug therapy,ADEPT)的研究进展,评价这种技术应用的潜力。方法检索近几年国内外研究ADEPT的相关文献,并进行分析、归纳。结果"抗体导向的酶催化前体药物疗法"是一种肿瘤靶向治疗两步策略。该策略以巧妙的设计克服了以往单抗作为药物载体的许多缺陷,通过分子与分子靶标,酶与底物(前药)的双重选择性,提高药物对肿瘤细胞的靶向性,降低毒性,克服耐药性。结论抗体导向的酶催化前体药物疗法是一种极有发展前途的肿瘤靶向疗法。

肿瘤靶向治疗活性人羧肽酶A1最适片段的分析和克隆

目的:获得肿瘤靶向治疗用活性人羧肽酶A1(hCPA1)的最适片段。方法:计算机分析hCPA1活性相关氨基酸,PCR扩增选择最适基因片段,克隆入PQE-80载体,转化Rosetta gami2(DE3)进行表达,与hCPA1活性中心片段比较酶活性。结果:PCR成功扩增了hCPA1活性中心和hCPA1活性短片段基因,酶切鉴定和测序均证实重组表达载体构建成功,表达的蛋白以SDS-PAGE分析,分别在约25×103和20×103处出现新生蛋白条带,蛋白质印迹法实验证实了新生蛋白为目的蛋白。Hippuryl-L-Phenylalanin(H-L-P)实验显示两者均具有羧肽酶活性,且hCPA1活性短片段的活性与活性中心相当。MTT和细胞凋亡实验结果表明两者均能有效地水解前体药物MTX-α-Phe,抑制前列腺癌细胞株PC-3增殖,促进PC-3细胞凋亡。结论:成功克隆和表达了人hCPA1活性短片段基因和hCPA1活性中心,获得相对分子质量小而具有相似活性的hCPA1蛋白,为进一步将其应用于前列腺癌的ADEPT导向治疗创造了条件。