均相酶增强免疫法监测丙戊酸浓度及临床应用

目的探讨均相酶增强免疫(Emit)法监测丙戊酸的方法评价及其在癫痫患者中的临床意义。方法采用均相酶增强免疫法测定质控品和癫痫患者血清丙戊酸浓度,并对测定结果进行分析。结果均相酶增强免疫法测定丙戊酸的精密度;批内变异系数(CV)值为2.52%～5.70%,批间CV值为2.70%～4.85%;回收率为98.4%～105.4%,平均102.1%。210例癫痫患者391例次丙戊酸血药浓度测定中,205例次(52.4%)丙戊酸血药浓度在有效治疗范围(50～100mg/L)内;152例次(38.9%)血药浓度小于50mg/L;34例次(8.7%)血药浓度大于100mg/L。结论均相酶增强免疫法监测丙戊酸浓度简便、可行、快速,是一种理想的检测方法;合理设定丙戊酸有效血药浓度范围(50～100mg/L),临床治疗过程加强丙戊酸血药浓度监测,是保证疗效和安全的重要措施。

酶增强免疫分析法监测他克莫司血药浓度质控评估

目的:探讨用酶增强免疫分析法监测他克莫司血药浓度的质量,确定适合于本实验室的他克莫司药物监测质控规则。方法:以标准质控为样本,分析用酶增强免疫法测定他克莫司血药浓度方法的稳定性和准确性,并对我院2009年的质控结果进行评价、分析,建立新的质控规则。结果:在本实验室条件下,他克莫司测定值为20℃、21℃、23℃、24℃时,与22℃时测定值比较,差异均有统计学意义(P<0.05);他克莫司高中低三个浓度的RSD为3.4%～10.1%,回收率为96.1%～105.4%,均符合《中国药典》对生物样品检测规定;本实验室新的质控规则为12s/13s/22s/41s。结论:用酶增强免疫分析法检测他克莫司血药浓度的方法稳定性和准确性较好,可以在临床中推广应用,但合理质控规则的建立是此方法实施的保障。

用酶增强免疫分析法监测他克莫司血药浓度的质控评估

目的：评价酶增强免疫分析法（EMIT）监测患者全血中他克莫司浓度的质量,建立并改进他克莫司血药浓度监测的质量控制方法。方法：以标准质控为样本,进行预防性质量控制和室内质量控制研究。对2008年血药浓度监测中随行质控样本的测定值做回顾性研究并进行统计学分析,建立新的质控规则。结果：他克莫司低、中、高浓度（4.3、8.9、18.0 ng/ml）2009年质控样本的日内、日间RSD为1.8%-11.2%,平均回收率为90.5%-114.0%,符合《中华人民共和国药典》生物样品测定的要求。2008年质控样本的低、中、高浓度（3.8、7.5、15.0 ng/ml）的随行质控RSD分别为21.8%、14.2%和15.5%,适合本单位的质控规则为12S/13S/22S/41S/7tr。结论：EMIT法准确度和精密度良好,是一种较理想的他克莫司血药浓度测定方法,但影响因素较多,特别是温度对其影响较大,因此必须做好质量控制。

酶增强免疫分析法与微粒子酶联免疫吸附法检测他克莫司药物浓度的结果对比研究

目的对酶增强免疫分析法(EMIT)与微粒子酶联免疫吸附法(MEIA)进行比对实验,评估SYVAViva-E临床化学分析仪(简称SYVA Viva-E)和Abbott IMX分析仪(简称Abbott IMX)2种检测系统测定他克莫司(FK506)药物浓度的一致性。方法将Tac/Csa CONTROL质控品分别用SYVA Viva-E(EMIT)和Abbott IMX(MEIA)进行批内、批间精密度测定。FK506的靶值(检测范围):A1水平为4.3(2.1～6.5)ng/mL、A2水平为8.9(5.3～12.5)ng/mL、A3水平为18.0(14.0～22.0)ng/mL。将158份临床患者样本分为极低浓度(0.1～<2.0 ng/mL)、低浓度(2.0～<8.0 ng/mL)、中浓度(8.0～<14.0 ng/mL)、高浓度(14.0～<20.0 ng/mL)和极高浓度(20.0～24.0 ng/mL)5个组,用SYVA Viva-E和Abbott IMX平行测定FK506浓度,观察2种检测系统测定临床样本的相关性。结果当FK506浓度处于A1水平时,SYVA Viva-E的批内、批间精密度及检测结果均值均高于Abbott IMX(P<0.05);处于A2、A3水平时,2种检测系统批内、批间精密度及检测结果均值相近,差异无统计学意义(P>0.05)。Abbott IMX的检测精密度优于SYVA Viva-E。当临床样本浓度<8.0 ng/mL时,SYVAViva-E检测结果的均值比Abbott IMX约高1.0 ng/mL,二者比较差异有统计学意义(P<0.01),与测定质控品的结果一致;当样本浓度≥8.0 ng/mL时,SYVA Viva-E检测结果的均值与Abbott IMX相近,二者比较差异无统计学意义(P>0.05)。2种检测系统测定临床样本的总体相关性较好(r=0.977),但SYVA Viva-E检测结果均略高于Abbott IMX。结论应用EMIT检测FK506时,其检测结果略高于MEIA,尤其在低浓度范围更加明显。2种检测系统在检测FK506浓度时可能存在系统偏差。

液相色谱-质谱联用和酶增强免疫分析法测定人全血环孢素A浓度比较

目的建立液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)法测定人全血环孢素A(CsA)浓度,并与酶增强免疫分析(EMIT)法进行相关性分析。方法以乙腈为沉淀剂,环孢素D(CsD)为内标,Waters Atlantisd C18(3.9 mm×150 mm,3μm)色谱柱为分析柱,10 mmol·L^(-1)醋酸铵乙腈-10 mmol·L^(-1)醋酸铵为流动相进行梯度洗脱,质谱方法应用电喷雾电离源(ESI源),采用多反应监测方式进行正离子检测,用于定量分析的离子反应为CsA m/z 1 220.0→m/z 1 202.8,内标CsD m/z1 216.8→m/z 119.4。分别采用LC-MS/MS法和EMIT法测定124例患者服用CsA后的全血药物浓度,比较两种方法测定结果的相关性。结果以LC-MS/MS法测定结果(X)与EMIT法测定结果(Y)作线性回归方程,Y=0.999 3X+20.387(r=0.983,n=124,P<0.05),EMIT法测全血CsA的浓度较LC-MS/MS法偏高。结论 LC-MS/MS法和EMIT法测定人全血CsA的浓度相关性良好,在CsA药物浓度监测中,对不同测定方法的测定差异,应予以关注并作相应调整。

酶增强免疫分析法测定环孢素A和他克莫司血药浓度的质量控制

目的 评价和分析酶增强免疫分析法（EMIT）监测患者全血中环孢素A（Cs A）和他克莫司浓度的室内质控结果。方法 对四川省医学科学院·四川省人民医院药学部实验室2013年6月~2014年9月作Cs A和他克莫司血药浓度监测的随行质控结果进行评价与分析,建立常规中心线及控制限,绘制质控图。结果 Cs A和他克莫司低、中、高3个水平的常规中心线分别为69.19、159.41、388.11 ng/m L和5.21、9.20、19.34 ng/m L;Cs A的低、中、高浓度的日内和日间精密度的RSD分别为10.38%、8.61%、9.40%和16.10%、13.31%、12.64%,相对回收率分别为95.26%、110.65%、107.51%和104.80%、98.30%、98.18%;他克莫司的低、中、高浓度的日内和日间精密度的RSD分别为10.21%、8.69%、4.29%和19.93%、14.02%、13.96%,相对回收率分别为117.20%、107.55%、103.47%和112.20%、105.00%、104.00%,均符合《中国药典》2010年版的要求。运用Westgard多规则控制方法对质控结果进行分析检出Cs A失控2次;他克莫司失控7次。结论 EMIT测定Cs A和他克莫司血药浓度具有较好的精密度和稳定性,适于临床开展治疗药物监测,但应建立质控方法对质控结果进行评估,以保证实验室测定数据的准确性,为临床提供准确的监测结果。

化学发光酶免疫法测牛奶中3种喹诺酮类药物

建立可同时检测牛奶中氧氟沙星（OFL）、麻保沙星（MAR）、氟罗沙星（FLE）残留的直接竞争化学发光酶免疫法（dc—CLEIA），方法的检出限分别为0．01、0．03、0．04ng／mL。牛奶中的氧氟沙星、麻保沙星、氟罗沙星用7．5％的三氯乙酸提取，测定200、100、50、20、10ng／mL5个添加水平的回收率，平均回收率在75．4％-94．1％之间。HPLC与dc—CLEIA测定的结果有很好的相关性，说明所建立的dc—CLEIA可用于实际样品的检测，结果准确可靠。

EMIT法和HPLC法监测苯妥英和苯巴比妥血药浓度比较研究

目的比较酶增强免疫法(EMIT)和高效液相色谱法(HPLC)监测苯妥英(PHT)和苯巴比妥(PB)血浆药物浓度的相关性。方法收集癫痫患者服药后的稳态谷浓度血样,分别用EMIT法和HPLC法进行测定,考察2种测定方法的相关程度。结果以HPLC法测定结果(X)与EMIT法测定结果(Y)所作线性回归方程如下:YPHT=0.505+1.200X(r=0.991);YPB=0.103+1.115X(r=0.970);EMIT法测定血浆中PHT浓度较HPLC法高3.0μg/mL,EMIT法测定血浆中PB浓度较HPLC法高1.7μg/mL,2种方法测定PHT和PB血浆药物浓度结果差异有统计学意义(P<0.05)。结论EMIT法和HPLC法测定2种抗癫痫药血浆浓度结果差异具有统计学意义,在PHT和PB治疗药物监测中应予以关注并作相应调整。

三种检测方法测定甲氨蝶呤血药浓度的比较分析

目的比较高效液相色谱法(HPLC)、荧光偏振免疫分析法(FPIA)和酶增强免疫法(EMIT)监测甲氨蝶呤(MTX)血浆药物浓度的相关性。方法收集接受大剂量甲氨蝶呤化疗后的患者的血液样品,分别用HPLC、FPIA和EMIT法进行测定,考察3种测定方法的相关程度。结果多配对样本Friedman检验提示3种方法间差异有显著性,Wilcoxon检验结果提示HPLC法和FPIA法检测结果之间差异无显著性,EMIT法结果与另外两种方法之间差异有显著性。3种检测方法的的回归分析结果为:Y HPLC=1.00X FPIA+0.015(r=0.978,P<0.000 1);Y HPLC=0.94X EMIT-0.079(r=0.956,P<0.000 1);Y FPIA=0.95X EMIT-0.089(r=0.927,P<0.000 1)。结论 3种甲氨蝶呤检测方法之间还是存在差异,但这种差异是可以预见性的,且可以通过换算消除,临床治疗和研究工作要予以注意。

EMIT法与HPLC法测定人血中丙戊酸浓度的比较

目的:比较酶倍增免疫分析法(EMIT)与高效液相色谱法(HPLC)测定人丙戊酸血药浓度的方法学相关性。方法:用统计学方法比较EMIT法和HPLC法测定丙戊酸血药浓度的方法学效能指标差异,同时采用双变量回归与相关分析对HPLC法和EMIT法测定的结果进行比较。结果:在1～150mg/L浓度范围内,两种方法的准确度差异无统计学意义(P>0.1),而HPLC法精密度显著高于EMIT法(P<0.01)。52例样本HPLC法测定结果(X)与EMIT法测定结果(Y)作回归分析,方程为:Y=0.9665X+1.0674,r=0.9947(n=52);两种方法测定结果经配对t检验,差异无统计学意义(P>0.1)。然而,血药浓度<10mg/L的7例患者测定结果差异有统计学意义(P<0.01)。结论:丙戊酸血药浓度在1～150mg/L浓度范围内时,两种方法测定结果存在高度相关性,但HPLC法的精密度优于EMIT法。当丙戊酸血药浓度偏低(<10mg/L)时,宜用HPLC法测定。

EMIT法和HPLC法监测环孢菌素A血药浓度比较研究

目的:比较酶免疫增强法(EMIT)和高效液相色谱法(HPLC)监测环孢菌素A血药浓度的相关性。方法:收集肾脏移植患者服药后的稳态谷浓度血样,分别用EMIT法和HPLC法进行测定,考察2种测定方法的相关程度。结果:以HPLC法测定结果(X)与EMIT法测定结果(Y)所做线性回归方程如下:Y=0.816 8X+34.699(r=0.955 0),EMIT法测定全血中环孢菌素A浓度较HPLC法为高。结论:EMIT法和HPLC法测定环孢菌素A血药浓度结果差异具有统计学意义,在CsA治疗药物监测中应予以关注并作相应调整。

两种方法检测3种药物血药浓度比较研究

目的比较高效液相色谱法(HPLC)和酶增强免疫法(EMIT)在检测患者体内抗癫痫药物苯巴比妥(PB)、苯妥英(PHT)及卡马西平(CBZ)血药浓度方面的相关性。方法将检测对象按测定项目、性别、年龄对同一患者的标本同时用HPLC和EMIT进行检测,以HPLC参考方法为准进行配对t检验和相关性分析。结果A(CBZ)组中A1组(所有检测对象)两种方法检测结果相差2.256,差异有统计学意义(P<0.05);A2组(女性)两种方法检测结果相差2.74,差异有统计学意义(P<0.05);A3组(男性)两种方法检测结果相差2.11,差异有统计学意义(P<0.05);A4组(年龄小于20岁)两种方法检测结果相差2.81,差异有统计学意义(P<0.05);A5组(年龄大于或等于20岁)两种方法检测结果相差2.09,差异有统计学意义(P<0.05)。B(PHT)组总标本两种方法检测结果相差12.05,差异有统计学意义(P<0.05)。C(PB)组总标本两种方法检测结果相差7.77,差异有统计学意义(P<0.05)。结论EMIT与HPLC参考方法差异有统计学意义,二者具有较好的相关性。

HPLC法与EMIT法测定人血中甲氨蝶呤血药浓度差异分析

目的:比较酶增强免疫分析法(EMIT)和高效液相色谱法(HPLC)测定甲氨蝶呤(MTX)血药浓度结果,并分析两种测定方法所得结果存在偏差的原因。方法:7例骨肉瘤患者,采用大剂量(10 g·m-2)甲氨蝶呤静脉滴注后,同时采用EMIT法和HPLC法测定血浆中MTX药物浓度,并对结果进行比较。结果:骨肉瘤患者给药后48、60、96 h的血药浓度,采用EMIT法测得的值约是HPLC法测得值的1.72倍;采用EMIT法测得的血药浓度远远低于HPLC法测得的MTX及其代谢物7-OHMTX的浓度之和。结论:MTX的主要代谢物7-OHMTX与EMIT法检测MTX存在显著的交叉反应,这可能造成EMIT法测定结果高于HPLC法。

化学发光微粒子免疫分析法与酶增强免疫分析法测定甲氨蝶呤血药浓度的比较研究

目的:评价化学发光微粒子免疫分析法(CMIA)及酶增强免疫分析法(EMIT)测定甲氨蝶呤(MTX)血浆药物浓度结果的一致性及相关性。方法:收集儿科、骨肿瘤科共41例大剂量MTX化疗患者的血液样本,分别使用CMIA和EMIT方法测定样本中的MTX血浆药物浓度,并对比两方法检测低、中、高3个不同水平质控的结果,使用Prism 6. 02软件对以上数据进行统计分析。结果:CMIA方法测定MTX浓度的日内、日间精密度均高于EMIT法。在<0. 30μmol·L-1(17例)和≥0. 30μmol·L-1(24例) 2个浓度区间,2种方法测定的结果无显著性差异(P> 0. 05)。Bland-Altman分析显示2种方法产生偏倚分别为0. 007和0. 010,Pearson相关分析显示两方法所得结果显著相关(P <0. 05),相关系数分别为0. 766和0. 988。结论:CMIA法与EMIT法检测MTX血浆药物浓度的结果无显著性差异,一致性良好,两者均适用于该项目的临床检测,但在检测结果的稳定性和检测成本上,CMIA法优于EMIT法。

糖尿病肾病肾移植受者血环孢素浓度的监测指标

目的探讨糖尿病肾病肾移植受者血环孢素(CsA)浓度的监测指标。方法采用酶增强免疫分析法监测17例糖尿病肾病肾移植受者全血中CsA的谷浓度(C0)和服药后2 h的峰浓度(C2),筛除出现肝、肾毒性或排斥反应的数据,并按手术后时间、性别和年龄分组进行统计分析。结果肾移植手术后第1个月、第2～4个月、第5～6个月,C0+C2的合理范围分别为800～1 800,700～1 500,600～1 200 ng.mL-1,C2/C0控制在4～8。结论用C0+C2和C2/C0作为血CsA浓度的监测指标,更能反映糖尿病肾病肾移植受者体内CsA的暴露情况和肝肾功能,避免毒性和排异反应。

糖尿病肾病肾移植受者术后血环孢素A浓度的特点分析

目的探讨糖尿病肾病肾移植受者术后血环孢素A(CsA)浓度的特点。方法采用酶增强免疫分析法(Emit),对34例(糖尿病肾病17例)肾移植受者全血中CsA的谷浓度(C0)和服药后2 h的峰浓度(C2)进行监测,筛除出现肝、肾毒性或排斥反应的数据,并按术后时间进行分组对比分析。结果糖尿病与非糖尿病肾病肾移植术后第1、2月CsA的C0值分别为(214±84)、(175±46)和(251±85)、(209±74)ng/ml,C2值分别为(1087±471)、(963±326)和(1570±600)、(1543±401)ng/ml,2组间差异有统计学意义(P<0.05)。其余月份2组间C0和C2差异无统计学意义(P>0.05)。结论糖尿病肾病肾移植受者术后1～2个月内C0和C2宜控制在(120～250)ng/ml和(550～1500)ng/ml范围内,并随术后时间的延长而逐渐下降,避免毒性和排异反应。

丙戊酸钠血药浓度监测结果的相关因素分析

目的:分析影响丙戊酸钠血药浓度监测结果的因素,为丙戊酸钠的合理使用提供参考。方法:采用酶增强免疫分析法监测丙戊酸钠的血药浓度,分析监测结果与病人的年龄、性别、疗效、用药剂量间的关系。结果:在监测的158例病人中,丙戊酸钠血药浓度<50、50～100、>100μg/ml的病例数分别为69例(43.67%)、70例(44.30%)和19例(12.03%),控制癫发作的总有效率分别为36.23%、87.14%和78.94%。血药浓度<50μg/ml组与50～100μg/ml组和>100μg/ml组之间,服药剂量<400mg/d组与400～800mg/d、>800mg/d组之间,疗效有显著性差异(P<0.01)。不同年龄组,不同性别组之间,血药浓度监测结果的差异没有统计学意义(P>0.05)。结论:临床应根据血药浓度监测结果个体化给药。

大剂量甲氨蝶呤治疗骨肉瘤血药浓度监测结果分析

目的 分析大剂量甲氨蝶呤治疗骨肉瘤血药浓度特点及对甲酰四氢叶酸钙（CF）使用的指导意义,以预防和减轻毒副反应.方法 选取2012年1月至2014年10月在南京大学医学院附属南京鼓楼医院住院的骨肉瘤手术前后患者67例,依据甲氨蝶呤用药剂量分为甲氨蝶呤8 g/m2组（34例）和甲氨蝶呤10 g/m2组（33例）.采用酶增强免疫分析（EMIT）法监测化疗后0、24、48、72 h甲氨蝶呤血药浓度（Cx,x=0、24、48、72）,分析Cx与患者年龄、性别、用药剂量的关系,观察2组患者的毒副反应发生情况,并记录C24≥5.0 μmol/L和/或C48≥0.5 μmol/L和/或C72≥0.2μmol/L的患者增加使用CF解救的次数和剂量.结果 C0和C24甲氨蝶呤8g/m2组与甲氨蝶呤10 g/m2组比较差异有统计学意义[（548.01±127.03） μmol/L比（839.48±113.09） μmol/L、（4.61±1.46） μmol/L比（5.79±3.01） μmol/L,P＜0.05],C48和C722组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.在同一剂量组中,不同年龄和不同性别患者之间,各时点Cx差异无统计学意义（P＞0.05）;C24和/或C48和/或C72高于安全值的患者,甲氨蝶呤8 g/m2组有11例（32.4％）,甲氨蝶呤10 g/m2组有16例（48.5％）;甲氨蝶呤10 g/m2组毒副反应发生率和程度与甲氨蝶呤8 g/m2组差异无统计学意义（P＞0.05）;与甲氨蝶呤8 g/m2组相比,甲氨蝶呤10 g/m2组CF的用量和解救次数明显增加,差异有统计学意义[（132±66）mg比（104±31）mg、（7.2± 1.9）次比（6.5±1.5）次,P＜0.05].结论 在通常6～ 12 g/m2的用量中,适当增加大剂量甲氨蝶呤的用量可以明显提高甲氨蝶呤血药浓度的峰值,但也会延迟甲氨蝶呤的清除,依据监测结果适时调整CF的用量和用法,可以预防和减轻毒副反应。

两种不同试剂盒检测手段对肝移植患者他克莫司血液浓度的影响

目的探讨两种不同试剂盒检测手段对肝移植他克莫司血液浓度的影响。方法选取2013年2月~2016年8月在舟山医院肝病科接受他克莫司检测的肝移植患者81例,用药后12采集患者空腹上肢静脉血,分别采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测试剂盒和酶增强免疫法（EMIT）检测试剂盒对全血样本他克莫司血液浓度进行检测,观察、比较2种检测手段的测定结果及相关性。结果 ELISA法具有较好的日内及日间精密度和准确度,RSD均〈5%,其中在低浓度区间时检测的精密度稍差;EMIT法具有较好的日内及日间精密度和准确度,RSD均〈5%,其中在低浓度区间检测的精密度稍差;采用ELISA检测试剂盒测得的他克莫司血药浓度（5.19±0.73）μg/L明显低于采用EMIT试剂盒测得的结果（8.29±1.14）μg/L,差异具有统计学意义（P〈0.05）;2种试剂盒检测结果的相关系数r=0.9176,检测结果呈正相关关系;他克莫司血药浓度〈2.0μg/L时,ELISA试剂盒的测定结果（1.116±0.125）μg/L明显低于EMIT试剂盒的测定结果（1.507±0.201）μg/L,具有统计学意义（P〈0.05）。结论 ELISA检测试剂盒和EMIT检测试剂盒均可用于肝移植患者他克莫司血液浓度的监测,且相关性较好,但二者测定的他克莫司血液浓度差异显著,需各自建立治疗窗范围进行判断,检测结果不可相互替换。

2012年儿童药物浓度监测分析

目的对本院2012年儿童血药浓度监测结果进行回顾性分析,为临床合理用药提供依据。方法采用酶增强免疫分析法(EMIT)测定,对服用丙戊酸钠、苯妥英、卡马西平、地高辛、茶碱、甲氨蝶呤、环孢素、他克莫司的病人进行血药浓度监测,并对4055例监测结果进行统计和分析。结果丙戊酸钠的受检例数最多,2679例(75.89%),平均浓度(58.70±25.97)μg/ml,地高辛的受检例数最少,只有2例。三个免疫抑制剂项目中,甲氨蝶呤的受检例数最多,463例(31.1%)。结论血药浓度监测对指导儿童临床合理用药具有重要作用。