多孔硅-酶复合电极对葡萄糖溶液的电化学检测

多孔硅（PS）具有纳米级尺寸,高的表面积比和生物兼容性为固定生物分子提供了有利的条件。文章采用光电化学腐蚀的方法制备出多孔硅,并将3-氨基丙基三乙氧基硅烷（APTS）共价结合到多孔硅表面实现其生物功能化。通过戊二醛（Gluta）交联的方式将葡萄糖氧化酶（GOD）固定到生物功能化多孔硅上,形成GOD-Gluta-APTS-PS复合结构并用作电化学测量的工作电极。铂金和饱和甘汞电极分别作辅助电极和参比电极。通过测量还原电流对数与电极电势的关系以及计时电流曲线,对10×10^-6-55×10^-6mol dm^-3浓度范围的葡萄糖水溶液进行测量分析,发现还原电流与葡萄糖溶液在一定范围内有线性响应关系。制成的多孔硅酶复合电极间隔5天重复使用1次,20天内性能能保持基本不变。

测蔗糖复合酶电极的研究

采用酶电极流动注射分析系统(EFIA),由固定化酶膜包括蔗糖转化酶(INV)、葡萄糖变旋酶(MUT)及葡萄糖氧化酶(GOD)与氧电极共同组成的复合酶电极用于蔗糖的快速测定。实验确定每张酶膜的最适酶量(IU比)为1NV:MUT:GOD=72:48:2.4。酶经固定化后,INV与MUT的综合回收活力>42.9%。其最适ph为5.8—6.5。最适温度范围是35—45℃。动态法和稳态法测试的线性范围分别为:5×10^(-4)—10^(-1)和10^(-5)—2×10^(-3)mol/L,响应时间分别<20s和<2min。实验的重复性良好,变异系数<1.7%。用此酶电极测定以蔗糖为碳源的发酵液中的蔗糖含量,平均回收率达到98%。发酵液中的蔗糖分解产生的葡萄糖对本电极的干扰可通过平行运行的GOD电极来校正。连续使用的寿命至少为120h。比前年报道的14h有了显著的提高。酶膜显示了较好的保存稳定性(30天,保存于4℃蒸馏水中)和一定的抗热性(50℃,30min)。

流动注射复合酶电极法测定麦芽糖的研究

利用聚乙烯醇（ＰＶＡ）包埋法共固定糖化酶和葡萄氧化酶（ＧＯＤ）制成酶膜，与氧电极结合成为复合酶电极；该电极可以用于流动注射分析系统中测定溶液中麦芽糖。对酶电极的ｐＨ效应和温度效应作了研究。酶电极的线性范围为０．５－３５ｍｍｏｌ／Ｌ．响应周期小于２ｍｉｎ。变异系数（ＣＶ）为１．８％。在半连续使用状态下，酶电极可以使用１０ｄ以上。糟化酶保持活力为６０％。对延长酶电极寿命和克服共存葡萄糖的干扰的方法作了探讨。

柠檬酸复合酶电极的研制与应用

测定柠檬酸的含量,对发酵法制取柠檬酸工业有重要意义。目前最常用的是无机比色分析。此法要求条件荷刻,步骤多,费时。1966年,Mollering和Gruber利用五种酶对柠檬酸进行酶比色分析,此法线性范围较宽,反应也比较灵敏,但由于同时使用了五种酶,工业上应用的可能不大。基于他们的原理,我们考虑利用柠檬酸裂解酶和草酰乙酸脱羧酶固定到CO_2气敏电极上,利用电位法测定柠檬酸。

纳米颗粒复合材料增强的蔗糖、葡萄糖双功能生物传感器

采用憎水纳米二氧化硅溶胶(Nano-SiO2)增稳、亲水纳米金(Nano-Au)溶胶增敏,利用聚乙烯醇缩丁醛(PVB)包埋,将蔗糖转化酶(INV)、变旋酶(MUT)、葡萄糖氧化酶(GOD)共固定于铂电极表面,通过时间电流法对目标样品中的蔗糖和葡萄糖含量进行测量:响应时间13s;蔗糖在0～300mg/L、葡萄糖在0～180mg/L范围内有良好的线性关系;蔗糖测定回收率为94.84%～105.21%;蔗糖酶膜连续使用寿命约为1个月。