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4种小鼠肠上皮细胞分离培养方法的比较
被引量:
10
1
作者
孙秀梅
程帆
+4 位作者
刘维
孙涛
薛秀恒
李培英
王菊花
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2013年第5期25-31,共7页
【目的】比较4种小鼠肠黏膜上皮细胞(Intestinal epithelial cells,IECs)分离方法的分离效果,建立小鼠IECs的有效分离培养方法,获得小鼠IECs原代细胞,为后续研究做准备。【方法】分别采用组织块培养法、嗜热菌蛋白酶消化法、胶原酶Ⅺ和...
【目的】比较4种小鼠肠黏膜上皮细胞(Intestinal epithelial cells,IECs)分离方法的分离效果,建立小鼠IECs的有效分离培养方法,获得小鼠IECs原代细胞,为后续研究做准备。【方法】分别采用组织块培养法、嗜热菌蛋白酶消化法、胶原酶Ⅺ和中性蛋白酶Ⅰ联合消化法以及胶原酶Ⅰ和中性蛋白酶Ⅵ联合消化法共4种方法分离小鼠IECs并培养,通过细胞免疫组织化学法和细胞免疫荧光法对分离的IECs进行细胞特异性鉴定,比较4种方法的分离效果。【结果】组织块培养法所获IECs活力好,增殖能力强,但成纤维细胞污染较严重,细胞纯度低;胶原酶Ⅰ和中性蛋白酶Ⅵ分离法获得的IECs数量少且细胞增殖能力弱;嗜热菌蛋白酶消化法及胶原酶Ⅺ与中性蛋白酶Ⅰ联合消化法所获得的小鼠IECs纯度较高,原代培养时增殖能力稍弱于组织块培养法,但传代后增殖能力趋于稳定。通过细胞免疫组织化学法和细胞免疫荧光法对分离的细胞进行鉴定,结果表明,分离的细胞多数为小鼠IECs。【结论】嗜热菌蛋白酶消化法及胶原酶Ⅺ与中性蛋白酶Ⅰ联合消化法均适合肠道上皮细胞的分离和培养。
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关键词
小鼠
小肠上皮细胞
原代
培养
组织块
分离
培养
法
酶学分离培养法
下载PDF
职称材料
题名
4种小鼠肠上皮细胞分离培养方法的比较
被引量:
10
1
作者
孙秀梅
程帆
刘维
孙涛
薛秀恒
李培英
王菊花
机构
安徽农业大学动物科技学院
安徽农业大学茶与食品科技学院
出处
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2013年第5期25-31,共7页
基金
国家自然科学基金项目(31001019)
安徽省自然科学基金项目(11040606M91)
文摘
【目的】比较4种小鼠肠黏膜上皮细胞(Intestinal epithelial cells,IECs)分离方法的分离效果,建立小鼠IECs的有效分离培养方法,获得小鼠IECs原代细胞,为后续研究做准备。【方法】分别采用组织块培养法、嗜热菌蛋白酶消化法、胶原酶Ⅺ和中性蛋白酶Ⅰ联合消化法以及胶原酶Ⅰ和中性蛋白酶Ⅵ联合消化法共4种方法分离小鼠IECs并培养,通过细胞免疫组织化学法和细胞免疫荧光法对分离的IECs进行细胞特异性鉴定,比较4种方法的分离效果。【结果】组织块培养法所获IECs活力好,增殖能力强,但成纤维细胞污染较严重,细胞纯度低;胶原酶Ⅰ和中性蛋白酶Ⅵ分离法获得的IECs数量少且细胞增殖能力弱;嗜热菌蛋白酶消化法及胶原酶Ⅺ与中性蛋白酶Ⅰ联合消化法所获得的小鼠IECs纯度较高,原代培养时增殖能力稍弱于组织块培养法,但传代后增殖能力趋于稳定。通过细胞免疫组织化学法和细胞免疫荧光法对分离的细胞进行鉴定,结果表明,分离的细胞多数为小鼠IECs。【结论】嗜热菌蛋白酶消化法及胶原酶Ⅺ与中性蛋白酶Ⅰ联合消化法均适合肠道上皮细胞的分离和培养。
关键词
小鼠
小肠上皮细胞
原代
培养
组织块
分离
培养
法
酶学分离培养法
Keywords
mouse
mouse intestinal epithelial cells
primary culture
tissue fractional cultivation
enzymology fractional cultivation
分类号
Q813.11 [生物学—生物工程]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
4种小鼠肠上皮细胞分离培养方法的比较
孙秀梅
程帆
刘维
孙涛
薛秀恒
李培英
王菊花
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2013
10
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