超声辅助酶提取、双水相萃取及大孔树脂纯化天麻素的工艺研究

目的:优化超声辅助酶提取天麻中天麻素工艺并通过双水相萃取和大孔树脂进一步纯化,为精制天麻素提供工艺参考。方法:通过单因素试验考察和正交优化试验得到最佳超声辅助酶提取条件。通过双水相工艺考察得到最佳双水相萃取条件。通过大孔树脂工艺考察对大孔树脂型号进行筛选,对上样条件、洗脱条件进行优化。结果:超声辅助酶提取选择α-淀粉酶,最佳提取条件设定为料液比为1∶30,加酶量为0.8%,酶解时间为80 min,酶解温度为60℃,酶解pH值为5.5。最佳双水相萃取条件设定为乙醇体积分数为47.5%,硫酸铵质量分数为15.0%,萃取液浓度为0.2 g/mL,大孔树脂筛选型号为HPD100,最佳上样浓度为0.2 g/mL,径高比为1∶5,上样流速为3 BV/h,上样量为100 mL,最佳洗脱液体积分数为30.0%,洗脱流速为4 BV/h,洗脱液用量为230 mL。结论:本研究对超声辅助酶提取工艺优化结果较好,采用双水相体系和大孔树脂纯化,使天麻素纯度明显提高。且这一系列工艺稳定可靠,可为后续制剂及新药研发奠定基础。

抗氧化酵母醛脱氢酶提取物对鱼肉模拟消化过程中脂肪氧化的影响

鱼肉脂质在消化过程中可能发生明显氧化,产生有害醛类。本文以脂肪过氧化值(peroxidation value,POV)、硫代巴比妥酸反应物值(thiobarbituric acid reactant value,TBARS)、醛类化合物和多不饱和脂肪酸含量作为评价指标研究了一株抗氧化酵母醛脱氢酶(aldehyde dehydrogenase,ALDH)提取物对鱼肉模拟消化过程中脂肪氧化的影响。结果表明,在模拟胃肠道消化过程中,空白鱼肉(CK)在模拟消化5 h后POV从(0.12±0.06)meq/kg增加到(1.14±0.12)meq/kg,加入ALDH提取物的鱼肉(FE)模拟消化5 h后POV为(0.69±0.08)meq/kg,而加入包埋ALDH的鱼肉(EB)POV为(0.13±0.06)meq/kg;CK组TBARS值从(0.77±0.11)mg/kg增加到(2.31±0.13)mg/kg,而FE、EB组的TBARS值分别为(0.79±0.09)mg/kg和(0.19±0.09)mg/kg;模拟消化物中含量较多的醛包括壬醛、己醛、2-庚醛、壬二烯醛、2-己烯醛等;CK组的醛含量在消化过程中迅速增加,FE、EB组醛含量逐渐减少,消化结束时己醛、壬醛、2-庚醛含量已低于检测限。CK组鱼肉中EPA、DHA在消化过程中氧化损失分别为59%和58%,FE组的损失值分别为35%和32%,EB组的损失值分别为20%和26%。本研究证明了抗氧化酵母ALDH提取物可以很好地抑制鱼肉在模拟消化过程中的脂肪氧化并有效消减因脂肪氧化产生的有害物质。酵母酶提取物可能是控制脂质氧化致餐后氧化应激的新型有效活性制剂。

侧柏叶中挥发性组分的酶提取及分析

报道了用酶提取侧柏叶中的挥发性组分,考察pH值、酶用量、样品粒度等因素对提取率的影响,测得其挥发油的含量为6.0%(w)。采用GC-MS法分离确认出38种化学成分,其中主要成分为雪松烯,占总挥发油的41.25%。并将酶提取(CE)法与同时蒸馏萃取(SDE)法进行了对比。

响应面分析法优化金樱子多糖的酶提取工艺

目的采用响应面分析法优化金樱子多糖的酶提取工艺。方法在单因素试验基础上,采用响应面设计法考察酶解时间、酶解温度和酶添加量对多糖提取条件的影响,并以最佳水平为中心点,多糖提取率为响应值,依据Design-Expert 8.0.5软件对各试验点的响应值进行回归分析。结果在分析各因素的显著性和交互作用后,得出金樱子多糖的酶提取最佳工艺条件为:提取温度65℃,酶用量594 U·g-1,提取时间2.3 h,p H 5.0。在此条件下,金樱子多糖的提取率为14.49%,与理论提取率(14.72%)接近。结论在响应面分析法优选出来的最佳条件下,金樱子多糖的实际提取率与理论提取率接近,说明响应面分析法优选金樱子多糖的酶提取工艺条件可行。

卷柏中挥发性组分的酶提取及气相色谱-质谱分析

用酶提取卷柏中挥发性组分,考察pH值、酶用量、样品粒度等因素对提取率的影响。测得其挥发油的含量为w=5.85%。采用气相色谱-质谱法(GC/MS)分离确认出31种化学成分,其中主要成分为雪松醇,占总挥发油的45.07%。并将酶提取法(CE)与水蒸汽蒸馏-萃取法(DSE)法进行了对比。

没药中挥发性成分的酶提取及GC/MS分析

采用纤维素酶提取法(CE)和水蒸气蒸馏提取法(DSE)对没药挥发油成分进行比较研究。利用气相色谱-质谱联用技术对其化学成分进行分析,从中分别鉴定出34种和38种化学成分,用峰面积归一法通过数据处理系统得出各化学成分在挥发油中的百分含量,分别占挥发油总成分的70.05%和67.95%,共同组分中含量最多的是乙酸辛酯和辛醇。

复合酶提取石榴皮中原花青素工艺优化及其动力学模型建立

目的优化复合酶(纤维素酶-果胶酶)提取石榴皮中原花青素的工艺,并建立其动力学模型。方法以原花青素得率为评价指标,Plackett-Burman设计筛选影响因素,Box-Behnken设计对加酶量、酶解温度和酶解时间进行优化。建立4种提取工艺的动力学模型(Allometric1、Expdec1、Logistic、Sweibull1),通过精准因子(A)、偏差因子(B)、根平均方差(RMSE)、决定系数(R2)分析模型的适用性。结果最佳条件为加酶量1.5%、酶解温度48℃、酶解时间270 min,原花青素得率为1.88%。Logistic模型和Sweibull1模型拟合精度均较高,并且后者在最佳酶解温度(48℃)下预测效果更好。结论所建立的优化条件和动力学模型均可用于石榴皮中原花青素提取工艺的工程放大和优化控制。

不同pH值和酶提取体系对丹参抗氧化酶活性的影响

目的:考察不同的pH值磷酸缓冲溶液,以及加入EDTA-Na2或/和PVP的酶提取体系对丹参抗氧化酶活性的影响。方法:使用不同pH值的磷酸缓冲溶液考察了丹参SOD、CAT、POD酶活性在冷冻前后10d的差异;在最优的pH值磷酸缓冲溶液中加入不同物质考察SOD、CAT、POD的活性差异。结果:使用0.05mol·L-1,pH值为7.0的磷酸缓冲溶液,内含0.1mmol·L-1EDTA-Na2,1%(w/v)聚乙烯吡咯烷酮(PVP)作为提取体系,检测SOD酶、CAT酶和POD酶活性获得的数据较优。

一种贵州豆豉酶提取物的溶栓活性及溶栓机理研究

目的:探讨贵州豆豉酶提取物的溶栓活性和溶栓机理。方法:用纤维蛋白平板法和溶解血凝块试验法研究贵州豆豉酶提取物的溶栓活性,用加热和未加热纤维蛋白平板分别检测豆豉酶提取物在这两种条件下的溶栓活性,以纤维蛋白平板上透明溶栓圈直径的变化来阐明豆豉酶提取物的溶栓机理。结果:贵州豆豉酶提取物在20 h内溶解血凝块,3批酶提取物样品溶栓效价平均值分别为19 250 U/g(n=3,RSD=1.03%)、20 664 U/g(n=3,RSD=0.81%)和20 263 U/g(n=3,RSD=0.63%);贵州豆豉酶提取物在未加热纤维蛋白平板上溶栓圈直径大于加热平板,存在显著差异。结论:贵州豆豉酶提取物具有溶栓活性,可直接溶解纤维蛋白,也可通过激活血纤维蛋白溶酶原间接溶解纤维蛋白。

响应面法优化复合酶提取枸杞子总黄酮的工艺研究

目的采用响应面法优化复合酶提取枸杞子总黄酮的工艺条件。方法在单因素试验基础上,选择酶用量、酶解时间、酶解温度为因素,进行3因素3水平的中心组合设计,采用响应面法分析3个因素对枸杞子总黄酮得率的影响。结果复合酶辅助提取枸杞子总黄酮的工艺路线为:复合酶用量0.30%,酶解时间1.0 h,酶解温度60℃。总黄酮得率预测值为0.949 2%。结论响应面法优化复合酶辅助提取枸杞子总黄酮的方法稳定可行,操作简单,可为深入研究及应用提供依据。

水蛭酶提取工艺的研究

目的通过实验优选水蛭酶提取工艺条件。方法以体外的抗凝活力为指标,进行单因素试验,考察胃酶加入量、提取温度、提取时间、药液pH对有效成分提取的影响,用正交试验优选提取条件。结果优选的提取工艺为:温度42℃,pH1.5,加酶量为300U/g,提取4h。结论实验表明,此方法提取率高,工艺合理。

虎杖中白藜芦醇应用酶提取研究

目的探讨虎杖中白藜芦醇应用酶提取。方法精确称取虎杖粉碎用HPLC法测定不同酶量条件下以及不同酶解时间下白藜芦醇的转化率。结果随着酶解时间越长,虎杖苷的转化率越高,酶-料比1.0%时转化率最高,酶-料比1.2%时4h转化率最低,白藜芦醇的转化率不是随酶-料比增加而增加。结论随着复合酶用量的增加,白藜芦醇的提取率逐渐增大,对一定的底物浓度存在一个最佳的酶用量,并非酶添加量越大酶解效果越好。

甜瓜果实蔗糖代谢酶提取液中2种去糖方法的比较

以甜瓜鲁厚甜1号开花当天的果实为试材,分别测定蔗糖代谢相关酶—酸性转化酶(AI)、中性转化酶(NI)、蔗糖合成酶(SS)和蔗糖磷酸合成酶(SPS)的活性。对酶提取液中干扰测定结果的可溶性糖采取2种方法进行去除(1)直接用SephadexG-25柱离心去糖;(2)酶提取液先经过硫酸铵沉淀,去糖,重新溶解后再用SephadexG-25柱脱盐。结果显示,方法2处理后AI和NI、SPS和SS的活性均高于方法1。这表明在研究甜瓜果实蔗糖代谢相关酶活性时,采用方法2处理酶提取液效果更好。

莪术中挥发性成分的酶提取及GC-MS分析

采用纤维素酶提取法(CE)和水蒸气蒸馏提取法(DSE)提取莪术药材中的挥发油成分,利用气相色谱-质谱联用技术对其进行化学成分分析,分别鉴定出34种和26种化学成分,用峰面积归一法,通过数据处理系统得出各化学成分,分别占挥发油总成分的67.61%和60.15%,共同组分中,含量最多的是表-莪术酮和β-姜黄酮。

香薷中挥发性成分的酶提取及GC-MS分析

采用纤维素酶提取法(CE)和水蒸气蒸馏提取法(DSE)对香薷草挥发油成分进行比较研究。利用气相色谱-质谱联用技术对其化学成分进行分析,从中分别鉴定出23种和13种化学成分,用峰面积归一法通过数据处理系统得出各化学成分在挥发油中的百分含量,分别占挥发油总成分的97.17%和97.72%,共同组分中含量最多的是百里香酚和香荆芥酚。

高活性菠萝蛋白酶提取的研究获全国商业科技进步奖三等奖

由中华全国供销合作总社济南果品研究院主持完成的“高活性菠萝蛋白酶提取的研究”课题成果，近日获全国商业科技进步奖三等奖。菠萝蛋白酶具有药用价值和工业应用价值，在医药领域，能抑制血小板聚集，加速纤维蛋白原的分解，增进药物吸收，减少抗生素用量，抑制毒素分泌。

穿山龙中薯蓣皂苷酶提取工艺的优化

目的优化穿山龙中薯蓣皂苷酶提取工艺。方法以薯蓣皂苷提取率为评价指标,单因素试验考察酶解时间、酶解温度、酶解pH、液料比、提取时间、提取温度、乙醇体积分数,再通过响应面法优化提取工艺。结果最佳条件为酶解温度44℃,酶解pH 4.9,酶解时间1.9 h,液料比9∶1,薯蓣皂苷提取率为4.757%,与预测值(4.764%)接近。结论该方法合理、准确、可靠,可用于酶提取穿山龙中的薯蓣皂苷。

酸性脲酶产生菌诱变育种、产酶条件及粗酶提取的研究

从土壤中分离到一株产酸性脲酶的菌株 ,该菌株经紫外线 (UV)照射 ,硫酸二乙酯 (DES)处理 ,UV -DES复合诱变及培养条件优化 ,酶活达到 2 2 6u/mL ,经诱变后的菌株 ,在pH6 5、温度 2 8～ 30℃、尿素浓度为5g/ 10 0 0mL时产酶最佳。Ni2 + 、Mn2 + 对产脲酶有促进作用 ;Ca、2 + 、Cu2 + 、Zn2 + 、Al3 + 对产脲酶没有影响 ;Fe、3 + 、Ag+ 对产酶有抑制用 ,Hg2 + 对产酶有强抑制作用 ,该菌株所产脲酶为胞内酶 ,经超声波破碎后 ,用pH6 5 ,浓度0 0 5M柠檬酸缓冲液抽提 。

知母多糖复合酶提取工艺优化及其免疫活性

本文对知母多糖的提取工艺及体外免疫活性进行研究,为知母多糖的开发利用提供理论依据。试验以复合酶提取知母粗多糖,在正交试验确定复合酶比例的基础上,通过单因素实验和响应面优化试验,确定知母多糖的最佳提取工艺;采用DEAE-52纤维素层析柱进行分离得到4种多糖组分APSE-0、APSE-1、APSE-2和APSE-3。以RAW264.7巨噬细胞为研究模型,采用MTT法、Griess法测定知母多糖各组分对细胞增殖能力和一氧化氮(NO)释放量的影响。结果表明,最佳复合酶比例为:木瓜蛋白酶16000 U/g,纤维素酶1200 U/g,果胶酶1600 U/g。最优提取工艺为酶解时间2 h,液料比15:1(mL/g),酶解温度52℃,在此条件下得率为(10.58%±0.03%)。体外免疫活性实验结果证明,四种知母多糖组分均能明显促进RAW246.7巨噬细胞的增殖,APSE-0、APSE-2和APSE-3均可极显著诱导NO的释放,其中,APSE-2的免疫活性最强,可作为潜在的功能性食品或作为免疫力低下人群的膳食补充剂。剂。

遗传算法优化超高压辅助复合酶提取枸杞多糖工艺及其抗炎活性研究

以枸杞为原料,采用超高压辅助复合酶提取其中的多糖,通过单因素试验和遗传算法确定最佳的提取条件;采用脂多糖诱导RAW264.7小鼠巨噬细胞建立体外细胞炎症模型;通过MTT法检测在最优工艺参数组合下获得的枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharides,LBP)对LPS诱导RAW264.7细胞存活率的影响;利用ELISA法测定LBP对LPS诱导RAW264.7细胞培养液中NO、TNF-α、IL-1β和IL-6含量的影响。结果表明:超高压辅助复合酶提取枸杞多糖的最优的工艺参数组合为提取压力200.0 MPa、提取温度25.0℃、保压时间5.6 min和复合酶质量分数1.3%,在此条件下枸杞多糖得率为6.58%±0.11%。LPS质量浓度和处理时间分别为1μg/mL和24 h来构建RAW264.7细胞炎症模型;枸杞多糖质量浓度为5、10、20 mg/mL对RAW264.7细胞无毒性作用;枸杞多糖能显著抑制LPS诱导RAW264.7细胞上清液中NO、TNF-α、IL-1β、IL-6含量,进一步表明枸杞多糖具有较好的抗炎效果。研究结果为植物多糖的提取提供一种高效的提取方法。