免疫酶标技术在细胞学及针吸活检中的应用

免疫酶标技术是利用抗体与抗原的特异性结合,通过附着于抗体或抗原上的酶催化底物显色来对某种物质进行定性、定位及定量。其在临床病理诊断上,主要用于组织切片(如冰冻或石蜡切片),通常简称为免疫组化,通过观察较大群体细胞组织的显色变化来判断其来源或性质。近三年来,我们在此方面进行了一些尝试,报告如下。 1

APAAP桥联酶标技术快速诊断合胞病毒

本文报告应用 APAAP 桥联酶标技术,对116例急性下呼吸道感染的患儿,进行合胞病毒抗原快速诊断研究,并与免疫荧光(IFA)技术对照.二者阳性符合率98.00%,阴性符合率95.38%,准确性为96.55%.进一步证明:APAAP 桥联酶标技术特异性好、敏感性高,用于呼吸道细胞检测,无内源性酶的干扰,且操作简便,无需荧光显微镜,利于基层推广应用,优于 IFA 技术,是较为理想的合胞病毒感染的快速诊断技术;若与 IFA 技术联用,可提高阳性检出率.

磁性分离酶标技术在生殖内泌激素检测中的应用

目的 磁性分离酶标技术在生殖内泌激素检测中应用。方法 利用Serozyme -Ⅱ型磁性分离酶标仪及其配套试剂检测了六种生殖内分泌激素 (E2 、LH、FSH、HCG、T、PRL) ,并对其方法进行了评价。 结果 此法批内变异系数小于 4.1% ,批间变异系数小于 7.2 % ;标准曲线一次定标后至少可使用一个月。线性范围宽 (E2 在 0～ 11nmol/L、LH在 0～ 2 0 0miu/ml、FSH在 0～ 15 0miu/ml、HCG在 0～5 0 0miu/ml、T在 0 .5～ 5 5nmol/L、PRL在 0～ 2 5 0ng/ml) ;在 4h内显色稳定 ;回收率分别为 97.5 %、10 3%、97.4%、97.1%、96 .7%、97.2 % ,溶血对检测值有较大影响。仪器采用三波长同时检测 ,可消除试管因素的误差 ,可增大仪器量程 5倍。 结论 本法操作简单快速 ,且无放射性污染 ,对实验室要求低 ,有推广应用价值。

APAAP桥联酶标技术检测支原体和虫媒病毒

APAAP免疫酶标技术(即碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶桥联酶标显色技术)是最近几年随着单克隆抗体(McAb)技术进展而发展起来的一新兴组化染色技术.此项技术在国内首先由杨志刚等同志建立并推广应用.我们将这一方法应用于支原体和虫媒病毒抗原检测,获得了满意结果.材料与方法支原体:口腔支原体引自生物制品检定所,猪鼻支原体(BTS-7CF8)引自中监所.病毒:辛德比斯病毒引自生物制品检定所,森林脑炎病毒(森张株)引自长春生物制品所.上述支原体和病毒感染敏感细胞一定时间后按常规法进行细胞滴片,经丙酮固定后,作为感染抗原片.

应用酶标技术检测560例石油工人乙肝五项结果分析

目的了解和掌握胜利油田区域石油工人乙型肝炎病毒(HBV)感染状况,为保障石油工人身体健康、预防和控制乙肝提供科学依据。方法采用北京万泰生物药业股份有限公司生产的乙型肝炎病毒试剂盒(酶联免疫法),对胜利油田某单位560份职业危害体检者的血液样品进行乙肝表面抗原(HbsAg)、乙肝表面抗体(HbsAb)、乙肝E抗原(HbeAg)、乙肝E抗体(HbeAb)、乙肝核心抗体(HbcAb)检测。结果胜利油田石油工人乙肝感染率为75.0%;HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb阳性率分别为31.07%、38.93%、4.64%、36.79%、57.5%;除HbeAb男性阳性率高于女性外,其它乙肝标志物阳性率无性别差异,也无年龄差异。结论胜利油田石油工人乙型肝炎病毒感染较严重,建议认真落实传染病预防和治疗等切实可行的综合措施,保护易感者,管理和/或治疗感染者。

酶标记免疫电镜技术的应用

酶标记免疫电镜技术(E-IEM)是在标记抗体技术和组织化学的基础上发展起来的一项先进的免疫化学测定技术,但对这一方法的介绍和研究在我区尚属空白。本文对 E-IEM 技术应用于动物病毒抗原和肿瘤抗原的定位进行探讨,并对制样条件的选择作了改进。1 材料和方法动物病毒选用猪瘟病毒和口蹄疫病毒,(均由内蒙古畜牧科学院兽医研究所提供)用 IB-RS-2系猪肾传代细胞按常规方法培养,肿瘤组织。

绵羊嗜皮菌病间接免疫酶标组织化学检测方法的建立

为建立一种用于绵羊刚果嗜皮菌病的免疫酶标组化法,采用兔抗刚果嗜皮菌抗体及羊抗兔HRP抗体,对2只人工感染刚果嗜皮菌的绵羊病变皮肤切片进行了免疫酶标组化检测,并与分离培养、PCR方法进行比较,结果显示2只人工感染绵羊皮肤病料均为阳性,与PCR、分离培养及刚果嗜皮菌阳性对照符合率为100%;而健康绵羊皮肤切片、大肠杆菌、肠球菌阴性对照涂片均为阴性。建立的免疫酶组化方法可用于检测绵羊刚果嗜皮菌,且具有特异性强,操作简便等特点。

乙型肝炎患者血清学标志物687例分析

目的 探讨HBV血清学标记的表现模式。方法 共 6 87份乙肝患者血清标本 ,均以酶联免疫吸附法检测。结果 本组血清病毒学标记可分为 10种感染期模式。主要以HBsAg、抗 -HBc、HBeAg即“大三阳”和HBsAg、抗 -HBc、抗 -HBe即“小三阳”模式为主 ,占全部病例的 6 9.0 9%。 结论 HBV血清免疫学标记的模式较为复杂。除了检验误差外 ,产生少见模式的主要原因有低滴度抗 -HBc、低滴度抗

乙型肝炎患者血清学标志分析

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)血清学标记的表现模式。方法767份乙肝患者血清标本均以酶联免疫吸附法检测。结果本组血清病毒学标记模式可分为15种模式。以“145”、“245”、“135”、“25”、“2”模式为主,占全部病例的90.7%。结论HBV血清免疫学标记的模式较为复杂,但这些模式的出现对临床分析和判断患者病程和传染性提供重要依据。

不同人群乙型肝炎患者血清学标志分析

目的探讨我地区乙型肝炎患者不同人群间阳性率及血清学标志的差异,为防治乙肝传染流行提供临床依据。方法搜集符合要求资料8843例,采用ELISA法进行检测,以学生、在职企事业人员、离退休人员进行分组,以1、2、3、4、5、分别代表乙肝二对半的HBsAg、抗-HBs、HbeAg、抗-Hbe、抗-HBc的阳性结果代码。结果阳性率以学生为最高,为68.68%。"2"模式的阳性率也以学生组最高占该组阳性的92。47%。非"2"阳性模式学生组阳性中以"145"和"135"为主,在职人员以"145"和"25"为主,离退休人员以"15""25""5"为主。结论HBV血清免疫学标记的模式较为复杂,不同人群阳性率有所差别,且血清学常见模式亦不同。但这些模式的出现对临床分析和判断患者病程和传染性提供重要依据。

应用LsAB技术显示五羟色胺受体亚型1A在小鼠螺旋神经元上的分布

目的显示五羟色胺(serotonin,5-HT)受体亚型1A在螺旋神经元上的分布。方法采用出生后3～6天的乳小鼠耳蜗进行冰冻切片,应用酶标链亲和素-生物素(labeled streptavidin-biolin technique,LsAB)技术显示五羟色胺受体亚型1A在螺旋神经元上的分布。结果实验组的乳鼠耳蜗螺旋神经元的细胞膜显示阳性信号,阴性对照组的乳鼠耳蜗螺旋神经元的细胞膜上未发现阳性信号。结论五羟色胺受体亚型1A存在于耳蜗螺旋神经元的细胞膜上,推测当毛细胞释放兴奋性神经递质引起螺旋神经元兴奋时,五羟色胺作为神经递质对螺旋神经元的听觉传导活动起着重要的调节作用。

胃粘膜溶菌酶阳性细胞的免疫组织化学研究

溶菌酶(Lysozyme;Lys)是胃粘膜抗感染的防御因素之一。胃液和胃粘膜组织培养上清液中均裣测到 Lys 活性,但 Lys 在胃粘膜组织中的定位研究结果尚不一致本。文应用 ABC 免疫酶标技术,观察 Lys 在正常,慢性萎缩性胃炎,胃溃疡,胃癌及胎胃粘膜中的分布,并探讨其来源及胃粘膜的作用。

无水酒精局部注射治疗血管瘤后VEGF的变化及意义

目的寻找一种客观的指标来反映血管瘤患者经无水酒精局部注射后的临床效果,探讨VEGF与血管瘤的发病机制的关系。方法用免疫酶标技术分别检测10例正常人,10例海绵状血管瘤患者,及上述10例血管瘤患者经无水酒精局部注射一周后及一个月后外周血血清中VEGF的浓度。结果10例血管瘤患者血清中VEGF浓度明显高于正常人组(P<0.01);10例血管瘤患者经无水酒精局部注射一周后血清中VEGF浓度与血管瘤患者组无明显区别(P>0.01);10例血管瘤患者经无水酒精局部注射一个月后外周血血清中VEGF浓度与正常人组无明显差别(P>0.01)。结论免疫酶标技术可以准确测量血管瘤患者及经无水酒精局部注射后外周血血清中VEGF的浓度;VEGF可以作为一种客观依据来反映局部注射无水酒精的临床治疗效果及预后;血管瘤患者局部注射无水酒精方法临床效果确切。为以后临床上各种方法的疗效判断提供依据。

婴幼儿血管瘤患儿外周血中bFGF检测及临床意义

目的寻找一种简单、易行的客观指标,诊断婴幼儿血管瘤及其类型,为临床治疗提供依据。方法用免疫酶标技术检测25例增生期血管瘤、14例消退期血管瘤、12例应用激素治疗后血管瘤、9例血管畸形及12例对照组患儿外周血清中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的浓度。结果25例增生期血管瘤患儿外周血清中bFGF浓度明显高于应用激素治疗后血管瘤、消退期血管瘤、血管畸形及对照组;消退期血管瘤和应用激素治疗后血管瘤患儿血清中bFGF浓度略高于血管畸形及对照组,但差异无显著性。结论外周血中bFGF浓度可做为诊断婴幼儿血管瘤及其分期的重要指标,并为治疗提供依据。

对纤维蛋白诊断生前伤的评价——45例枪弹创组织的MSB染色和扫描电镜对比观察

生活反应是诊断生前伤的主要根据。近二十年来，法医病理学在研究生前伤和死后伤的诊断中，采用了多种新兴技术，如扫描电镜技术、酶组织化学技术、酶标技术、电泳技术等，促使生前伤的诊断水平有明显提高。伤后存活1小时死亡者，大部分皆可获得明确诊断，