一种制备酶标记抗体的新技术及在血痕种属鉴定的应用

本实验建立了一种过碘酸钠氧化法为基础、制备ＨＲＰ标记的免抗人ＩｇＧ抗体的新技术。首先以己二酰二肼作为肼化剂，在ＩｇＧ分子上接上肼基，然后以过碘酸钠作为氧化剂，使ＨＲＰ分子上的糖基氧化为醛基，进而使醛基与联结在ＩｇＧ分子上的肼基形成Ｓｃｉｆｆ氏碱而达到酶与抗体的联接。在用斑点ＥＬＩＳＡ方法鉴别血痕种属的研究中，该法制各的酶标记抗体具有高效价，高敏感度，高特异性等优点。

GP_（125）酶标记抗体法测定细胞增殖活性

利用与细胞增殖有关的抗原ＧＰ_（１２５）和Ｂ_３抗体结合，形成抗原抗体复合物，再同酶结合形成抗原－抗体－酶复合物。该复合物与ＡＢＴＳ－Ｈ_２Ｏ_２发生颜色反应，在一定波长下可测定细胞增殖。本法亦可测定细胞活化剂效应及抗癌药物的抑瘤效应，是一种测定细胞增殖活动性的非放射性方法。

用酶标记抗体法鉴定法医检材的ABO血型

在法医学领域中,鉴别ABO系血型似乎是一种简单的方法。但是由于检材多种多样,所以想用单一的方法去处理所有的检材是无论如何办不到的。

酶标记鸡卵黄抗E.coli O157∶H7抗体的制备与特性研究

目的：研究制备特异性抗E.coli O157：H7鸡卵黄免疫球蛋白（IgY）及酶标记抗体（IgY-HRP）的工艺条件。方法：分别用灭活菌体、脂多糖及O抗原多糖抗原免疫临产母鸡，水稀释法结合离子交换色谱分离提取IgY，再用过碘酸钠法和戊二醛法进行HRP标记，各种制品的分析用电泳及ELISA法。结果：可获得纯度为79．6％～85．3％的IgY，提取率74％～77％；过碘酸钠氧化法标记效果较好，IgY-HRP（1mg／ml）最高效价640。结论：免疫制备IgY方法可行，过碘酸钠法标记IgY-HRP取得良好效果。

抗宫颈癌单克隆抗体AU_（14－1）的辣根过氧化物酶标记

应用过碘酸钠氧化改良法成功地将辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记抗宫颈癌单克隆抗体ＡＵ＿（１４－１），其质量经鉴定符合要求，适用于建立ＡＵ＿（１４－１）－ＥＬＩＳＡ，以测定人血清宫颈癌抗原。

抗体夹心酶联免疫吸附法测定重组E.coli L-天冬酰胺酶及药代动力学研究

目的 建立大鼠血浆中重组E .coliL 天冬酰胺酶的抗体夹心酶联免疫吸附测定法 ,并进行药代动力学研究。方法 应用重组E .coliL 天冬酰胺酶免疫家兔 ,分离IgG ,用DEAE 纤维素柱色谱纯化 ,辣根过氧化物酶标记抗体 ,建立抗体夹心酶联免疫吸附法 ,测定大鼠血浆中重组E .coliL 天冬酰胺酶浓度。结果 方法的线性范围为 1～6 4U·L- 1 ,血药浓度与时间的关系符合二房室模型 ,初期和末端的T1 2 分别为 0 5 0～ 0 5 7h和 2 4 5～ 3 0 2h ,AUC与剂量成正比。结论 建立的抗体夹心酶联免疫吸附法在灵敏度、特异性、线性范围、精密度和回收率等方面 ,满足药代动力学研究要求。实验方法和重组E .coliL

酶标记SPA法检测肺炎患儿咽分泌物中的腺病毒和合胞病毒抗原

用酶标记SPA法检测了肺炎患儿咽脱落细胞中的腺病毒和合胞病毒抗原,证实此法具有明显的特异性。共检测了108例申的腺病毒抗原和238例中的合胞病毒抗原,与传统法的总符合率分别为87. 0%和87. 4%。经统计学处理,均与传统法有明显的一致性,说明可用于临床,作为小儿病毒性肺炎的快速诊断方法。

乳铁蛋白酶标抗体的制备及其酶联免疫检测方法的建立

采用过碘酸钠法对抗牛乳铁蛋白抗体进行了辣根过氧化物酶标记,建立了二步式的双抗体夹心ELISA法,并对市售奶粉样品进行了测定。结果表明:所制备的酶标记抗体效价达到了1.6×106,与乳中主要其他蛋白如酪蛋白、乳白蛋白和β-乳球蛋白基本没有交叉反应,特异性较好;将HRP-2B12稀释105倍,以1%OVA为封闭液、含3%BSA的PBST溶液为酶标抗体稀释液,在此条件下建立的ELISA方法实现了对奶粉样品的定性测定。

用酶标抗人IgG单克隆抗体直接ELISA法检测微量血痕种属的研究

用酶标抗人ＩｇＧ单克隆抗体直接ＥＬＩＳＡ法检测微量血痕种属的研究湖南省公安科研所（４１０００６）聂绍禄单克隆抗体问世以来，已在法医学中开始进行应用研究，它的主要特征是具有高度的特异性和敏感性，据Ｔａｉｎａｌｃｍ等（１９８４）报道指出，抗人ＭｃＡｂ与常...

水产品中恩诺沙星残留的一步法酶联免疫检测研究

采用过碘酸钠氧化法合成了辣根过氧化物酶(HRP)标记的恩诺沙星抗体,建立一步式直接竞争酶联免疫吸附检测(ELISA)技术,并以鳗鱼为样本进行了恩诺沙星残留的加标检测。结果表明,所制备的酶标记抗体效价达到10000以上,与同族其他药物及族外药物没有显著的交叉反应;所建立的一步式ELISA法检测限约为10μg/kg。在10～40μg/kg浓度范围内,加标鳗鱼样本中恩诺沙星的检测回收率在70%以上,相对平均偏差小于6%,检测时间缩短到2h以内,约为传统两步式ELISA法的一半左右。

马铃薯A病毒重组CP多克隆抗体的制备及其在DAS-ELISA检测中的应用

利用重组CP作抗原制备出马铃薯A病毒的多克隆抗体,并将其用于DAS-ELISA检测。以p ET22b(+)为起始载体,构建了PVA-CP基因的原核表达载体p ET22b-ACP,重组菌BL21(p ET22b-ACP)经IPTG诱导表达出了分子量为30 k Da的特异性重组CP。利用高纯度重组CP为抗原免疫家兔,制备出了效价为1∶512 k的抗血清。以PVA重组CP为抗原,用间接ELISA与直接ELISA分别测定重组CP纯化抗体(Ig G)及其碱性磷酸酶标记物(Ig G-AP)的活性,用DAS-ELISA测定2种抗体的活性,目测及OD值测定结果表明3种ELISA测定反应都呈阳性。以PVA病毒阳性标准物为抗原,在上述3种ELISA测定中也呈阳性反应,重组CP多克隆抗体及其酶标抗体与PVA有较强的反应信号。利用重组CP制备的多克隆抗体及其酶标抗体达到了马铃薯A病毒DAS-ELISA检测的要求。

浅析全自动酶联免疫分析系统的发展趋势

酶联免疫吸附试验（EusA）就是用一种抗原或抗体吸附到载体上，最后通过一定的方式使酶标记抗体或抗原与之结合或被阻止与之结合，然后通过显色来检测目标抗体或抗原是否存在的试验。由于ELISA成本低、操作较简便、灵敏度和特异性很高，因此已经成为现代检验医学基本的、常规的检测技术。

酶联免疫吸附(ELISA)法在食品微生物检测中的应用

本文对酶联免疫吸附(ELISA)法的应用原理以及方法进行了详细分析与介绍,并针对这种方法如何被有效应用于食品微生物的检测中进行了论述,从而为有关单位及工作人员在实际工作中提供一定的方法论支撑。在酶标记抗体技术基础上发展起了酶联免疫吸附测定法,它结合了放射免疫测定法与免疫荧光法的技术优点。

一步酶法检测HBsAg时假阴性的原因探讨

由于一步酶法是一次性加入抗原和酶标抗体,当待检抗原含量太高时,结果有误差。为证实这一推断,我们对23例以此法检测结果与阴性的血清进行稀释后仍用一步酶法复检HBsAg,结果报道如下:

酶免疫测定

酶免疫测定又称免疫酶技术(immunoenzymatic technic)是指用酶标记抗体或酶抗抗体进行抗原抗体反应。此技术的原理和操作程序基本与免疫荧光技术相似,不同之处是以酶代替荧光素作为标记物,并以底物被酶分解后的显色深浅反映待测样品中的抗体或抗原含量。

酶联免疫吸附试验一步法检测HBsAg有关问题探讨

酶联免疫吸附试验（ELISA）是检测HBsAg常用方法，根据反应模式可分为一步法和二分法。一步法是将待测样品和酶标记抗体同时加入到反应孔中进行反应。从而达到简便、快速的目的；两步法是先将样品加入到反应孔中，待反应结束后再加入酶标记抗体，从而使待测样品的“捕获反应”和酶标记抗体的“酶联反应”分开进行，因而反应更加稳定、重复性也更好，但反应时间比一步法长。目前国内用于检测HBsAg的试剂盒多为ELISA一步法，在实际工作中，某些因素使一步法检测结果受到影响，若不注意，将出现假阳性或假阴性。现对操作中出现的问题进行探讨，旨在提高HBsAg检测结果的准确性。

核果病毒病及研究现状 Ⅱ.核果病毒的鉴定检测

(一)木本指示植物鉴定检测核果病毒种类繁多,其中一部分病毒可以采用汁液接种法,接种到草本植物上,从而进一步研究其生物学特性并进行种类鉴定。但大多数核果病毒,只能用嫁接方法,借助于木本指示植物所表现的症状特点。来鉴定病毒种类。鉴定不同核果病毒使用的木本指示植物,列于表1中。