Asp896～Val911缺失的阴离子交换蛋白1C末端表达质粒的构建

目的 构建Asp896～Val911缺失的阴离子交换蛋白 1(AnionExchange1,AE1)C末端表达质粒。方法 利用PCR方法 ,以pFAST Bac AE1 C end为模板 ,扩增出AE1后 16位氨基酸Asp896～Val911缺失的C末端基因 ,将其克隆至pGADT7载体上。用醋酸锂法将构建好的pGADT7 AE1 c end truncation转染酵母菌AH10 9,观察其在选择性培养基上的表达情况。结果 成功构建了AE1缺失后 16位氨基酸的C末端表达质粒。结论 重组质粒pGADT7 AE1 c end truncation对酵母无毒性 ,不能激活检测基因 ,可作为酵母双杂交系统中的靶基因。