DEAE离子交换色谱分离纤维素酶及其分离组分酶活力表征研究

对DEAE离子交换法分离制备纤维素酶条件进行了探索,确定最优分离条件为进样量100μL,流动相pH 7.5,流速3.5mL/min,梯度洗脱75min。在最优分离条件下,可实现纤维素酶3种活力组分的一次性分离。对分离的不同组分进行纤维素酶活特异性表征,确定了不同酶活力组分在色谱图中的分布。

生物传感分析仪在共固定化酶中的应用研究

本文研究了生物传感分析仪在共固定化GOD-CAT树脂的过氧化氢(H2O2)质量浓度的测定和酶活力的表征中的应用。首先,采用过氧化氢电极法检测了反应液中过氧化氢的质量浓度,过氧化氢由不同GOD/CAT酶活比条件下制备的共固定化GOD-CAT树脂催化氧化葡萄糖生成,从而找出了最适的GOD/CAT酶活比;然后,采用葡萄糖氧化酶电极法检测了催化氧化过程中反应液中底物葡萄糖质量浓度的变化,提供了一种共固定化GOD-CAT树脂的活力表征方法,并以此为基础研究了共固定化GOD-CAT树脂的酶学性质。结果表明,共固定化GOD-CAT树脂的最适GOD/CAT活力比是1:1;共固定化酶的最适温度是45℃,最适pH值为6.0,其热稳定性、pH稳定性、操作稳定性及贮存稳定性较游离酶均有一定的提高。