鲤鱼鱼皮和鱼骨酶溶性胶原蛋白的性质比较

以鲤鱼鱼皮和鱼骨为原料提取得到酶溶性胶原蛋白(PSC),对鱼皮PSC和鱼骨PSC的性质进行比较。电泳结果表明,鱼皮PSC和鱼骨PSC都属于Ⅰ型胶原;2种胶原蛋白中,脯氨酸和羟脯氨酸含量均低于牛皮酸溶性胶原蛋白;粘度测定的结果显示,鱼皮PSC的变性温度为28.1℃,鱼骨PSC的变性温度为30.0℃;差热分析的结果说明,鱼骨PSC的热稳定性高于鱼皮PSC,这与氨基酸分析和粘度分析的结果相一致;傅立叶红外光谱分析结果显示,鱼皮PSC和鱼骨PSC结构具有很大的相似性。

草鱼鱼鳞酶溶性胶原蛋白粘度特性及变性温度研究

采用旋转流变仪系统考察了浓度、pH、剪切速率、NaCl、CaCl2、丙三醇、乙醇和保温时间对草鱼鱼鳞酶溶性胶原蛋白（PSC）粘度的影响。结果显示，PSC溶液粘度随浓度增大呈指数增加；pH3时粘度最大，pH4和pH6～9时粘度下降，pH10时粘度又陡然回升；粘度随剪切速率的增大呈对数下降；NaCl和CaCl2的添加都会使PSC溶液粘度下降；丙三醇和乙醇添加量在10％以内，其添加浓度与粘度成正相关；保温时间长短对PSC溶液的粘度影响不大。通过粘度变化考察了不同处理下的变性温度，结果表明，随温度升高，PSC乙酸溶液粘度降低，在28.0℃左右粘度急剧下降，胶原蛋白变性，这与乌氏粘度计测定结果（胶原蛋白乙酸溶液的变性温度为32．0℃）存在较大差异。添加4％丙三醇或4％乙醇对PSC溶液的变性温度基本没有影响，而添加1．5％NaCl或2％CaCl2时。都使变性温度下降到22.0℃左右；PSC水溶液粘度明显大于其柠檬酸和乙酸溶液，且变性温度（32.0℃）高于其柠檬酸（26.0℃）和乙酸（28.0℃）溶液。

绿鳍马面鲀(Navodon septentrionalis)鱼头酸溶性与酶溶性胶原蛋白的分离纯化及理化性质研究

利用酸溶法和酶溶法制备马面鲀鱼头酸溶性胶原蛋白(ASC)和酶溶性胶原蛋白(PSC),并对所制备的ASC和PSC的氨基酸组成、SDS-PAGE、红外光谱、黏度和热变性温度,以及溶解度等性质进行分析。结果表明:马面鲀鱼头中ASC和PSC的提取率分别为0.94%±0.07%和3.91%±0.14%。Gly(265.0和251.8残基/1000残基)、Ala(111.0和107.6残基/1000残基)和Pro(87.0和83.1残基/1000残基)含量较高,而His和Tyr的含量较少,且未检测到Cys。ASC和PSC中亚氨基酸(Pro和Hyp)含量为169.3和160.6残基/1000残基。氨基酸组成分析、SDS-PAGE和红外光谱(FTIR)证实ASC和PSC均属于I型胶原蛋白,热变性温度分别为17.6°C和16.5°C。在酸性p H值范围内,ASC和PSC的溶解度较高;当Na Cl溶液浓度高于2%,ASC和PSC的溶解度会显著降低。综上,相对于哺乳动物类胶原蛋白,马面鲀鱼头ASC和PSC的亚氨基酸含量和热变性温度较低,结构稳定性差,易于降解,可作为胶原蛋白肽的制备原料进行开发。

鲤鱼鱼皮和鱼骨酶溶性胶原蛋白性质异同的分析

本研究对以鲤鱼鱼皮和鱼骨为原料得到的两种酶溶性胶原蛋白(PSC)的性质进行比较分析。结果表明,两种胶原蛋白中脯氨酸和羟脯氨酸含量均低于牛皮酸溶性胶原蛋白;黏度法测定鱼皮PSC的变性温度为28.1℃,鱼骨PSC的变性温度为30.0℃;DSC分析的结果也说明鱼骨PSC的热稳定性高于鱼皮PSC;电泳结果表明,鱼皮PSC和鱼骨PSC的肽链组成和多肽链的分子量相近,二者具有很大的相似性。

草鱼鱼鳞酶溶性胶原蛋白肽脱腥脱苦工艺研究

以草鱼鱼鳞提取的酶溶性胶原蛋白肽（papain soluble collagen peptide，PSCP）为研究对象，研究不同截留分子量纳滤膜对PSCP回收率的影响；并以正交实验L9（3^4）研究了不同β-环糊精添加量、水浴时间、水浴温度对PSCP腥苦味及回收率的影响；最后分析了PSCP中氨基酸的含量和比例。结果显示，纳滤膜截留分子量为400～600u时，PSCP回收率最小（16．71％），推测PSCP分子量介于300～600u之间。β-环糊精最佳包埋条件为：添加量4％、水浴温度70℃、水浴时间40min，在此条件下鱼鳞胶原蛋白肽的回收率为92-21％，感官评分为9．30，脱腥脱苦效果最好。PSCP氨基酸分析结果显示，有16种氨基酸含量大于1％，共占总氨基酸含量的99．07％，其中羟脯氨酸含量大于8％。该方法及优化后的工艺参数为工业化生产提供了依据。

几种淡水鱼鱼鳞酶溶性胶原蛋白的比较研究

利用红外光谱(FT-IR)分析比较3种不同前处理试剂对几种淡水鱼鱼鳞酶溶性胶原蛋白(PSC)结构的影响。结果表明:盐酸、碳酸钠对鱼鳞PSC结构有很强的破坏作用;采用乌氏黏度计测得草鱼、鳙鱼、鲢鱼、鲫鱼4种淡水鱼鳞PSC的变性温度分别为33.0、31.9、31.5、30.8℃;测得4种鱼鳞PSC中羟脯氨酸含量分别为47.85、44.91、40.36、39.59mg/g;通过电泳考察4种鱼鳞PSC的分子量分布,其中草鱼鱼鳞PSC由3条不同的肽链α1、α2、α3组成;鳙鱼、鲢鱼、鲫鱼由两条α链(α1和α2)组成;电泳谱带无杂带,表明所提胶原蛋白纯度高且达到电泳纯;通过红外光谱比较分析了4种鱼鳞PSC结构,结果表明,4种鱼鳞PSC红外结构基本一致。结合红外光谱和电泳分析表明,4种鱼鳞PSC均为Ⅰ型胶原蛋白。

皱纹盘鲍酶促溶性胶原蛋白的性质研究及抗体制备

针对加工副产物鲍鱼外套膜利用率低的现象,对鲍鱼腹足和外套膜胶原蛋白相关性质进行比较研究,以期为鲍鱼的综合加工提供一定的理论依据。本研究以皱纹盘鲍为原料分别提取得到腹足酶促溶性胶原蛋白(pepsin-soluble collagen of abalone adductor,PSC1)和外套膜酶促溶性胶原蛋白(pepsin-soluble collagen of abalone mantle,PSC2),对PSC1和PSC2相关特性进行比较分析,并利用PSC1制备得到兔抗鲍鱼胶原蛋白多克隆抗体。SDS-PAGE显示,PSC1和PSC2分子组成均为(α1)3,且α1的分子量为140 ku,与水产无脊椎动物Ⅰ型胶原蛋白特征相似。对PSC1进行肽指纹图谱分析,获得6个肽段、含75个氨基酸残基,与盘鲍螺的胶原蛋白前肽α链和欧洲鲍螺的纤维状胶原一致性分别达100%和88%,证明纯化的PSC1为胶原蛋白。氨基酸组成分析表明,PSC1和PSC2的组成基本一致,但脯氨酸和羟脯氨酸含量均低于牛酸溶性胶原蛋白。圆二色谱分析结果显示,PSC1和PSC2溶液均在220和197 nm分别有一正、负峰,具有典型胶原蛋白三股螺旋结构特征。FTIR光谱分析结果提示PSC1和PSC2具有相似的三螺旋结构。利用兔抗皱纹盘鲍PSC1多克隆抗体对皱纹盘鲍、尼罗罗非鱼、鲤和仿刺参胶原蛋白进行免疫印迹分析发现,该抗体只与皱纹盘鲍PSC1和PSC2的α、β和γ链产生反应,表明该抗体具有良好的特异性。

鲟鱼和草鱼鱼鳔酶溶性胶原蛋白的理化性质比较

以鲟鱼鱼鳔和草鱼鱼鳔为原料,比较分析两种鱼鳔酶溶性胶原蛋白(PSC)的理化性质。通过胶原蛋白得率、氨基酸组成、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、紫外光谱、傅里叶红外光谱、圆二光谱、微量热仪分析两种鱼鳔PSC的组成及理化性质的差异。结果表明,鲟鱼鱼鳔基本营养成分中的粗脂肪和羟脯氨酸含量均显著高于草鱼鱼鳔(P<0.05);鲟鱼鱼鳔PSC得率80.63%显著高于草鱼鱼鳔PSC得率49.85%(P<0.05);两种鱼鳔PSC都属于I型胶原蛋白;鲟鱼鱼鳔PSC的α链相对分子质量和二聚体β链的含量低于草鱼鱼鳔PSC;氨基酸组成中鲟鱼鱼鳔PSC中的丝氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、组氨酸和精氨酸的含量显著高于草鱼鱼鳔PSC(P<0.05),草鱼鱼鳔PSC中的丙氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、脯氨酸和羟脯氨酸的含量显著高于鲟鱼鱼鳔PSC(P<0.05);两种鱼鳔PSC具有相似的二级结构;鲟鱼鱼鳔PSC的变性温度29.26℃显著低于草鱼鱼鳔PSC变性温度36.01℃(P<0.05)。在两种鱼鳔PSC之间,草鱼鱼鳔PSC比鲟鱼鱼鳔PSC有更好的热稳定性,但是鲟鱼鱼鳔PSC比草鱼鱼鳔PSC有更高的得率。

黑鲫鱼皮中酶溶性胶原蛋白的提取及其性能研究

黑鲫鱼皮中的酶溶性的胶原蛋白被成功的提取出来,提取率为85%(以干重计算),纯化的胶原蛋白由两条明显的α1链和一条α2链组成,没有二硫键的存在,具有Ⅰ型胶原蛋白的结构特征,含有133个亚氨基酸残基(以1 000总计),变性温度为25.6℃,比猪中胶原蛋白的变性温度低11℃,其等电点为8.23,紫外吸收光谱显示纯化的胶原蛋白在218 nm处有强烈的吸收。当pH=3时,提取的胶原蛋白在0.5 M的醋酸溶液中的溶解度最大,同时当NaCl浓度为0.1 mg/mL时,其溶解度也达到最大,继续增加盐的浓度,其溶解度开始减小。黑鲫鱼皮中胶原蛋白的大量提取说明黑鲫鱼皮可以作为未来提取胶原蛋白以及工业生产的一种新的来源。

刺参体壁及罗非鱼皮酶促溶性胶原蛋白特性的对比研究

本实验对刺参体壁酶促溶性胶原蛋白(pepsin soluble collagen from Stichopus japonicus,sjPSC)和罗非鱼皮酶促溶性胶原蛋白(pepsin soluble collagen from Oreochromis niloticus,onPSC)的理化特性进行对比研究。结果表明,两种胶原蛋白的紫外与傅里叶变换红外光谱分析结果都较为相似。由十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱可知,两种胶原蛋白均以α-和β-链为主,在非还原和还原条件下,二者的电泳图谱非常相似,这表明蛋白中没有二硫键被还原。甘氨酸是sjPSC和onPSC中主要氨基酸,其中每1 000个氨基酸残基中分别含有(344.57±2.16)、(353.00±4.84)个甘氨酸残基。相比较而言,sjPSC中谷氨酸、天冬氨酸、丝氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、酪氨酸含量较高,onPSC中L-羟脯氨酸、L-脯氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸含量较高。在V8酶和α-糜蛋白酶作用下,sjPSC和onPSC的肽谱分析表明二者的结构有一定区别,尤其是谷氨酸、天冬氨酸及羟脯氨酸残基。

不同部位鲽鱼皮酸溶性胶原蛋白的提取及其特性

以新鲜的鲽鱼黑皮和白皮为研究对象,从其中提取酸溶性胶原蛋白(acid-soluble collagens,ASC),并对其理化性质和乳化活性及乳化稳定性进行比较研究,为鲽鱼皮的开发利用提供一定的理论依据。通过傅里叶变换红外光谱(Fourier transform infrared spectroscopy,FTIR)技术和扫描电子显微镜(scanning electron microscopy,SEM)初步研究了黑皮和白皮ASC的结构特征;同时对其溶解性、流变学特性、等电点、乳化活性指数(emulsifying activity index,EAI)及乳化稳定性指数(emulsifying stability index,ESI)进行了研究。FTIR扫描结果表明,黑皮和白皮ASC都存在酰胺A、酰胺B、酰胺Ⅰ、酰胺Ⅱ、酰胺Ⅲ,均保持了胶原蛋白三维螺旋结构的完整性;SEM观察结果表明,黑皮和白皮ASC均呈现多空的网络结构,且分布比较均匀,说明酸法提取胶原蛋白的过程基本上保留了胶原纤维原有的空间网状结构。EAI及ESI结果表明,黑皮ASC的EAI明显低于白皮ASC(P<0.05),分别为(2.60±0.53)、(7.30±0.41)m^2/g,而黑皮ASC的ESI明显高于白皮ASC(P<0.05),分别为(49.12±5.18)、(27.56±4.91)min。以上结果显示,从黑皮和白皮中提取的ASC的理化性质和功能特性存在一定的差异。

鮟鱇鱼皮酶溶性胶原蛋白对自由基的清除作用

采用胃蛋白酶从鮟鱇鱼皮中提取胶原蛋白,分析胃蛋白酶酶溶性胶原蛋白的氨基酸组成和超微结构,并研究体内外清除自由基机理。结果表明:胃蛋白酶酶溶性胶原蛋白的超微结构呈均匀网状分布,是良好的药物载体,体外清除自由基效果呈质量浓度依赖性,当质量浓度为10 mg/L时,清除超氧阴离子自由基(O2-·)和羟自由基(·OH)能力最强。体内实验显示其能显著抑制小鼠皮肤中丙二醛生成,提高超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶和羟脯氨酸含量,当剂量为100 mg/(kg·d)时最好。提示该胶原蛋白具有体内外清除自由基作用,其氨基酸组成、超微结构与清除自由基能力有关,提取的鮟鱇鱼皮酶溶性胶原蛋白清除自由基活力接近于提取的胶原蛋白肽。

鲤鱼鳞酸溶性胶原蛋白提取的研究

研究了以酸法提取鲤鱼鳞胶原蛋白过程中温度、时间、乙酸浓度的影响,并以SAS对影响因素进行了回归分析,得到了鲤鱼鳞胶原蛋白提取的最佳条件,温度18℃、提取时间38 h、乙酸浓度为1.3 m ol/L,在提取之前,采用Na2CO3处理对胶原蛋白提取有较大的提高。为淡水鱼综合加工利用提供理论依据。

转谷氨酰胺酶对鲤鱼肌原纤维蛋白乳化活性和凝胶特性的影响

目的:研究添加转谷氨酰胺酶(Transglutaminase,TG)对鲤鱼肌原纤维蛋白乳化活性和凝胶特性的影响,为改善鱼糜制品的品质特性提供理论依据。方法:肌原纤维蛋白溶液浓度为40 mg/mL,TG添加量为蛋白溶液的0%、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%(W/V),测定蛋白溶液的乳化活性及凝胶特性指标。结果:随着TG添加量的增加肌原纤维蛋白溶液乳化活性降低(p <0.05); TG添加增大了蛋白浊度(p <0.05);蛋白流变结果表明,随着TG添加量的增加显著增大储能模量(G')(p <0.05),降低起始凝胶温度,并提高蛋白变性温度;与对照相比,添加0.1%的TG会降低凝胶持水性,但是进一步增加TG对凝胶持水性影响不显著(p> 0.05);添加TG显著降低了凝胶白度(p <0.05);凝胶质构测定结果显示,随着TG添加量的增加,会改进蛋白质的凝胶特性,显著增加凝胶弹性和硬度(p <0.05)。结论:肌原纤维蛋白中添加TG到能够降低蛋白的乳化特性,但会改进肌原纤维蛋白的凝胶特性。

草鱼鱼鳞、鱼皮和鱼骨酸溶性胶原蛋白特性对比研究

从草鱼鱼鳞、鱼皮和鱼骨中提取酸溶性胶原蛋白(ASC),对其特性进行对比分析。紫外光谱和电泳图谱结果显示,3种ASC紫外特征吸收峰出现位置与I型胶原蛋白紫外特征吸收峰出现的位置基本一致,分子结构都至少含有两条α链;傅里叶红外光谱显示,草鱼鱼鳞、鱼皮和鱼骨ASC在酰胺A带的N-H伸缩均以氢键形成缔合体,酰胺Ⅰ带和酰胺Ⅲ带的特征吸收峰表明鱼鳞和鱼骨ASC的α-螺旋结构保存较完整,鱼皮ASC的α-螺旋结构已经被破坏;3种ASC在热稳定性方面存在一定差异,热变性温度鱼骨ASC(34.5℃)>鱼皮ASC(32℃)>鱼鳞ASC(31℃),可能与胶原存在的组织和所处的环境有关。

响应面法优化鲫鱼鱼鳞酸溶性胶原蛋白提取工艺

在单因素实验基础上,采用响应面法对影响酸溶性胶原蛋白(acid-soluble collagen,ASC)提取效果的3个因素即乙酸浓度、液料比和提取时间进行了优化,建立并分析了各因素与ASC得率关系的数学模型。结果表明:ASC最佳提取工艺条件为:乙酸浓度0.41mol/L,液料比12mL/g,提取时间54.81h,在此工艺条件下,ASC最高得率(以干基计)理论值为20.97%,而实测值可达20.68%,与理论预测值相比,相对误差为1.38%。ASC的相对溶解度在pH4时最大,当NaCl浓度低于3%(mg/mL)时,ASC的相对溶解度基本不变,当NaCl浓度大于3%(mg/mL)时,相对溶解度迅速降低,但都在40%以上。

鲢鱼鱼皮中酸溶性胶原蛋白提取工艺研究

以鲢鱼鱼皮为原料,通过单因素试验和正交试验对鲢鱼鱼皮中酸溶性胶原蛋白的提取工艺参数进行分析,并用AR-500动态流变仪对鲢鱼鱼皮中酸溶性胶原蛋白的热变性温度进行分析。结果表明:鲢鱼鱼皮原料中酸溶性胶原蛋白提取的最佳工艺条件为:以乙酸作为提取剂,乙酸浓度0.3 mol/L,料液比1∶60(g/m L),提取时间96 h;此胶原蛋白的热变性起始温度为32.31℃,峰值温度为34.82℃。

酸法和酶法提取鳄鱼皮胶原蛋白及性质研究

对以鳄鱼皮为原料得到的酸溶性胶原蛋白(ASC)和酶溶性胶原蛋白(PSC)的性质进行比较分析。紫外扫描结果表明所提取出的胶原蛋白在232nm波长处有显著吸收峰;SDS-PAGE结果表明ASC和PSC的肽链组成具有很大的相似性,均含有两种α肽链及其交联链(β链及γ链);溶解性分析表明鳄鱼皮胶原蛋白的等电点在pH7左右;ASC和PSC的保水性经过6h(25℃)仍然高于85%;ASC的吸油性(24mL/g)和PSC的吸油性(41mL/g)差异较大。根据上述测定结果可知,鳄鱼皮胶原蛋白ASC和PSC组成类似,符合Ⅰ型胶原蛋白的特征,但二者具体的功能性质略有差异。

秘鲁鱿鱼皮酸溶性胶原蛋白提取工艺优化及其特性

以秘鲁鱿鱼皮为原料,通过单因素试验及响应面优化法得到秘鲁鱿鱼皮酸溶性胶原蛋白(acid soluble collagen,ASC)最佳提取工艺,并对ASC的理化特性进行研究。结果表明:最佳提取工艺为在4℃条件下,冰醋酸浓度0.47 mol/L、液料比24.5 mL/g,浸泡43 h后,ASC提取率为31.76%;紫外全波长扫描结果表明,所得ASC在231 nm波长处有最大吸收峰,符合Ⅰ型胶原蛋白特征;凝胶电泳分析表明,提取的ASC含有α1、α2和β链;拉曼光谱分析表明,所得ASC结构完整,三螺旋结构未受到破坏;ASC的相变温度为50.07℃。

鮟鱇鱼皮酶溶性胶原蛋白清除自由基机理的初步研究

本实验采用胃蛋白酶从鮟鱇（Lophius litulon）鱼皮中提取胶原蛋白,分析该酶溶性胶原蛋白的氨基酸组成和超微结构,并初步探讨体内外清除自由基机理。结果显示,该胶原蛋白的超微结构呈均匀网状分布,是良好的药物载体,体外清除自由基效果呈浓度依赖性,当浓度为10 mg/L时清除O^-2·和·OH能力最强,另外,体外实验显示其能显著抑制小鼠皮肤中丙二醛（MDA）生成,提高超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和羟脯氨酸（Hyp）含量,当剂量为100 mg·kg^-1·d^-1时最好。初步研究表明,该胶原蛋白具有体内外清除自由基作用,其氨基酸组成、超微结构与清除自由基能力有关,提取的鮟鱇鱼皮酶溶性胶原蛋白清除自由基活力接近于之前提取的胶原蛋白肽。