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蚯蚓纤溶酶组分的抗原性 被引量:13
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作者 赵晓瑜 静天玉 +2 位作者 姜晓燕 段明星 郑昌学 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期209-212,共4页
以大豆胰蛋白酶抑制剂为配基 ,通过亲和层析制备出的蚯蚓纤溶酶 (EFE)含有 11~ 13个组分 .为了了解这些组分的相互关系 ,用EFE免疫家兔获得了抗血清 .利用该抗血清与已纯化的 10个组分进行免疫双扩散 ,根据形成沉淀线的形状可以将上述... 以大豆胰蛋白酶抑制剂为配基 ,通过亲和层析制备出的蚯蚓纤溶酶 (EFE)含有 11~ 13个组分 .为了了解这些组分的相互关系 ,用EFE免疫家兔获得了抗血清 .利用该抗血清与已纯化的 10个组分进行免疫双扩散 ,根据形成沉淀线的形状可以将上述 10个组分分为 4大组 .各组内组分之间的沉淀线完全融合 (免疫反应同一性 ) ;组间沉淀线交叉 (免疫反应非同一性 )或为支线 (免疫反应部分同一性 ) .这种按免疫学性质分组与根据分子量大小、氨基酸组成和N端氨基酸序列分组基本吻合 .上述结果为EFE的分类提供了依据 . 展开更多
关键词 蚯蚓 纤溶酶组分 抗原性 免疫反应同一性
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水稻纹枯病菌细胞壁降解酶组分分析、活性测定及其致病作用 被引量:25
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作者 杨媚 杨迎青 +2 位作者 郑丽 李明海 周而勋 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期600-606,共7页
为明确水稻纹枯病菌细胞壁降解酶的种类及其对水稻叶片组织的致病作用,对水稻纹枯病菌的细胞壁降解酶进行了SDS-聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳分析、酶活性测定、叶片浸解后的渗透性还原单糖和相对电导率的测定。水稻纹枯病菌细胞壁降解酶... 为明确水稻纹枯病菌细胞壁降解酶的种类及其对水稻叶片组织的致病作用,对水稻纹枯病菌的细胞壁降解酶进行了SDS-聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳分析、酶活性测定、叶片浸解后的渗透性还原单糖和相对电导率的测定。水稻纹枯病菌细胞壁降解酶的电泳结果显示,提取的细胞壁降解酶混合物中至少含有10种不同分子量的组分。用3,5-二硝基水杨酸法(DNS法)测定了7种常见细胞壁降解酶的活性,结果显示,以羧甲基纤维素钠(CMC)为诱导底物,内切-β-1,4-葡聚糖酶(Cx)活性最高,其次为多聚半乳糖醛酸酶(PG)和聚果胶甲基半乳糖醛酸酶(polymethylgalacturonase,PMG);以果胶为诱导底物,PG活性最强,PMG次之。通过比较不同底物对PG、Cx和PMG这三种主要细胞壁降解酶的诱导效果,发现Cx用1.0%CMC的诱导效果最好,PG和PMG用1.0%果胶的诱导效果最好。Cx的最佳反应温度是30℃,PG和PMG的最佳反应温度是50℃;Cx和PMG的反应时间定为40min较为合适,PG反应时间定为60min较为合适;当pH值达到5.0时PG酶活性最强,当pH值达到9.0时Cx酶活性最强,pH值为4.0~6.0时,PMG的酶活性达到最强。通过对酶处理后叶片的渗透性还原单糖和相对电导率的测定,发现细胞壁降解酶的确对水稻叶片组织造成了损伤,并且随着酶浓度的增加,损伤程度也逐渐加重。 展开更多
关键词 水稻纹枯病菌 细胞壁降解 酶组分分析 活性 浸解作用
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黑曲霉产纤维素酶系各组分特性及酶解条件 被引量:7
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作者 戴四发 贺淹才 《华侨大学学报(自然科学版)》 CAS 2001年第1期65-69,共5页
采用正交实验法分析出黑曲霉 3.316纤维素酶系各组分最适酶解条件 ,其组合分别为 C1酶 (p H5.0 ,4 5℃ ) ,Cx 酶 (p H3.5,6 5℃ )和 βG酶 (p H4 .5,6 5℃ ) .在液体发酵条件下 ,添加质量分数为 0 .0 0 3的碳酸钙时 ,各组分酶活性最高 ... 采用正交实验法分析出黑曲霉 3.316纤维素酶系各组分最适酶解条件 ,其组合分别为 C1酶 (p H5.0 ,4 5℃ ) ,Cx 酶 (p H3.5,6 5℃ )和 βG酶 (p H4 .5,6 5℃ ) .在液体发酵条件下 ,添加质量分数为 0 .0 0 3的碳酸钙时 ,各组分酶活性最高 ,其中以 C1酶明显增高 ,Cx 酶几乎无影响 ,βG酶则明显降低 .C1和 Cx 比酶活只有在碳酸钙质量分数小于 0 .0 0 5时才有提高 ,βG酶则明显降低 .添加蛋白胨 ,C1和 βG酶的最高酶活在碳酸钙质量分数小于 0 .0 0 3时有增加 ,Cx 酶则无明显变化 .碳酸钙和蛋白胨对各组分最高酶活形成时间均无影响 .在各组分酶分泌规律方面 ,仅有碳酸钙对 展开更多
关键词 黑曲霉 纤维素 酶组分 液体发酵 解条件 碳酸钙 蛋白胨 最高
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HeLa细胞内DNA的抗酶(DNase I)组分和AFM直接观察
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作者 孙雪光 曹恩华 +2 位作者 秦静芬 刘峁子 白春礼 《Zoological Research》 CAS CSCD 1999年第1期17-20,共4页
从HeLa细胞提取的DNA经DNaseⅠ酶解后,发现有两种抗酶组分(B和C)。凝胶电泳结果显示组分B的分子大小要超过20000bp,而组分C的分子大小相当于40~50bp。这两种组分在原子力显微镜下的形态都明显不同于... 从HeLa细胞提取的DNA经DNaseⅠ酶解后,发现有两种抗酶组分(B和C)。凝胶电泳结果显示组分B的分子大小要超过20000bp,而组分C的分子大小相当于40~50bp。这两种组分在原子力显微镜下的形态都明显不同于标准的双链DNA,其中组分B与以前观察到的λ-DNA变异结构较为相似,组分C则未见报道,根据其分子的表观宽度和高度推测可能为四链结构。此外,荧光实验还表明这两种组分可与EB相互作用。 展开更多
关键词 HELA细胞 DNA抗 酶组分 原子力显微镜
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2种真菌纤维素酶系组分活性研究初报 被引量:6
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作者 汤莉 薛泉宏 《西北农业大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第1期68-70,共3页
在液体摇瓶培养和固体发酵条件下 ,对 2株产纤维素酶的野生型真菌的产酶动态和酶系活性进行了分析 ,并将固态酶曲与海林产酶粉进行了综纤维糖化对比试验。结果表明 ,2菌株酶系组分酶活较高 。
关键词 纤维素 组分 真菌
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国家蛋白质科学中心(上海)科研人员揭示四膜虫端粒酶组分p75-p45-p19是其独特的CST复合物
6
《生命的化学》 CAS CSCD 2015年第6期824-824,共1页
Nature Structural and Molecular Biology于2015年11月9日在线发表了中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所国家蛋白质科学中心(上海)雷鸣研究组的最新研究成果,揭示了端粒酶组分p75-p45-p19构成了四膜虫中独特的... Nature Structural and Molecular Biology于2015年11月9日在线发表了中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所国家蛋白质科学中心(上海)雷鸣研究组的最新研究成果,揭示了端粒酶组分p75-p45-p19构成了四膜虫中独特的CST复合物。 展开更多
关键词 科学中心 复合物 CST 酶组分 四膜虫 蛋白质 科研人员 上海
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里氏木霉纤维素酶的纯化和性质 被引量:14
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作者 曹健 郭德宪 +1 位作者 曾实 汪晨辉 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第5期72-75,共4页
培养里氏木霉所得的纤维素酶粗酶液经硫酸铵盐析,透析脱盐和柱层析,紫外检测仪记录结果显示出四个蛋白质峰。经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳后有四条明显的蛋白质谱带。相对分子量分别为74,000、55,000、47,000、26,000左右。根据分子量大小... 培养里氏木霉所得的纤维素酶粗酶液经硫酸铵盐析,透析脱盐和柱层析,紫外检测仪记录结果显示出四个蛋白质峰。经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳后有四条明显的蛋白质谱带。相对分子量分别为74,000、55,000、47,000、26,000左右。根据分子量大小和蛋白组份的含量分析,这四种组分可能是β-葡萄糖苷酶,CBHI,CBHII和EGI。本实验得到的纤维素酶最适作用pH值在5.0左右,最适作用温度50℃左右。酶在pH4.0~6.0以及温度低于50℃时较稳定。Hg2+、Ag2+、Al3+、Pb2+、Fe3+对酶有强烈的抑制作用,而Mn2+、Co2+、Fe2+、Zn2+、Ca2+对酶有一定的激活作用。 展开更多
关键词 里氏木霉 纤维素 纯化 性质 酶组分
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降低lncRNA-RMRP表达抑制人肺癌细胞系A549的增殖和侵袭
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作者 郑红 陈晓霞 +2 位作者 韩李周 陈苗 皇甫娟 《基础医学与临床》 CAS 2024年第7期974-978,共5页
目的探讨抑制线粒体RNA加工核糖核酸内切酶RNA组分(RMRP)表达对人肺癌细胞系A549增殖和侵袭的影响;检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者全血和组织中RMRP表达,比较在不同临床指标表达差异性,以期为NSCLC机制研究提供参考资料。方法收集2016年3... 目的探讨抑制线粒体RNA加工核糖核酸内切酶RNA组分(RMRP)表达对人肺癌细胞系A549增殖和侵袭的影响;检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者全血和组织中RMRP表达,比较在不同临床指标表达差异性,以期为NSCLC机制研究提供参考资料。方法收集2016年3月至2021年3年在焦作市人民医院行手术治疗的NSCLC患者122例,同期,在体检中心选取健康者50名作为对照组。RT-qPCR检测全血和组织中RMRP mRNA水平。培养A549细胞分为si-RMRP组、siRNA-NC组和空白组(blank组)。RT-qPCR、CCK-8法和Transwell小室法分别检测细胞中RMRP表达、增殖活性和侵袭细胞数。结果NSCLC患者全血中RMRP相对表达量显著高于对照组(P<0.001);NSCLC组织中RMRP相对表达量高于癌旁组织(P<0.001);低分化、淋巴结转移和TNM分期Ⅲ的NSCLC患者全血和组织中RMRP相对表达量较高分化、未发生淋巴结转化和TNM分期Ⅰ~Ⅱ明显升高(P<0.05);Si-RMRP组细胞中RMRP相对表达量低于空白组(blank组)和siRNA-NC组(P<0.001);相比与blank组和siRNA-NC组,24、48、72和96 h时si-RMRP组细胞吸光度(A)值均降低(P<0.05);Si-RMRP组细胞侵袭数低于blank组和siRNA-NC组(P<0.001)。结论NSCLC患者全血和组织中RMRP相对表达量升高,下调A549细胞中RMRP基因表达可抑制细胞增殖,减少细胞侵袭。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 长链非编码RNA(lnRNA) 线粒体RNA加工核糖核酸内切RNA组分(RMRP) 增殖 侵袭
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纤维素酶的研制及其在饲料中的应用
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作者 栾会妮 孙志明 高强 《山东饲料》 2003年第12期11-13,共3页
纤维素酶(cellulase)是降解纤维素生成葡萄糖的一组酶的总称,它不是单成分酶,而是起协同作用的多组分酶系。本文拟对纤维素酶的研制及其在饲料中的应用作一概述。
关键词 纤维素 研制 饲料添加剂 应用 组分 菌种 制备方法
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加州大学欧文分校团队发现固氮酶铁蛋白可将CO2还原为CO
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《生物产业技术》 2017年第1期5-5,共1页
加州大学欧文分校的团队于2016年12月28日宣布,发现了一种天然酶(固氮酶)中含有铁蛋白(还原酶组分),该物质不与天然催化剂反应,可将CO2转化为CO.CO可作为合成气,能生产有用的生物燃料和其他化学物质.
关键词 CO2还原 加州大学 铁蛋白 固氮 化学物质 生物燃料 天然 酶组分
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亚麻脱胶过程中纤维组成的变化 被引量:1
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作者 王路 刘晓兰 +2 位作者 田英华 张兴坤 张亚萍 《上海纺织科技》 北大核心 2014年第9期6-7,12,共3页
分别采用酶法与温水浸渍法对亚麻原茎进行脱胶,考察脱胶过程中亚麻韧皮纤维中果胶、半纤维素和纤维素含量的变化情况。结果表明,随着脱胶时间的延长,两种脱胶方法均导致了果胶和半纤维素含量的不断下降,纤维素含量不断上升。到达脱胶终... 分别采用酶法与温水浸渍法对亚麻原茎进行脱胶,考察脱胶过程中亚麻韧皮纤维中果胶、半纤维素和纤维素含量的变化情况。结果表明,随着脱胶时间的延长,两种脱胶方法均导致了果胶和半纤维素含量的不断下降,纤维素含量不断上升。到达脱胶终点时,温水浸渍法脱胶亚麻纤维中果胶、半纤维素、纤维素的含量分别为2.68%、12.53%和73.97%;酶法脱胶后纤维中各组分的相应含量为2.06%、11.56%和77.89%。 展开更多
关键词 亚麻 脱胶 酶组分
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西方蜜蜂采集蜂咽下腺中高表达基因的筛选及表达分析
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作者 张娟 高艳 +6 位作者 王若虹 李秋方 杨尚宁 周诗文 石丹丹 苏松坤 聂红毅 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期896-908,共13页
【目的】本研究旨在筛选西方蜜蜂Apis mellifera采集蜂咽下腺中高表达的基因,为进一步筛选和研究蜜蜂采集行为相关基因提供依据。【方法】基于前期已获得西方蜜蜂3日龄工蜂(3 d_W)、10日龄哺育蜂(10 d_N)、10日龄采集蜂(10 d_F)、21日... 【目的】本研究旨在筛选西方蜜蜂Apis mellifera采集蜂咽下腺中高表达的基因,为进一步筛选和研究蜜蜂采集行为相关基因提供依据。【方法】基于前期已获得西方蜜蜂3日龄工蜂(3 d_W)、10日龄哺育蜂(10 d_N)、10日龄采集蜂(10 d_F)、21日龄哺育蜂(21 d_N)和21日龄采集蜂(21 d_F)的咽下腺转录组数据,筛选咽下腺差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),并对10日龄和21日龄采集蜂咽下腺中高表达的DEGs进行GO和KEGG富集分析;利用qPCR检测西方蜜蜂采集蜂咽下腺中高表达的4个DEGs(LOC409889,LOC406114,LOC408453和LOC100578735)在不同发育时期(卵、幼虫、蛹、刚出房工蜂、10日龄哺育蜂和21日龄采集蜂)和21日龄采集蜂组织(腹、胸、触角、上颚腺、咽下腺、蛰针、足、肠道、翅和脑)中的表达量。【结果】比较转录组结果表明,164个上调表达的DEGs在21日龄采集蜂咽下腺中的表达量明显高于在3日龄工蜂、10日龄哺育蜂和21日龄哺育蜂咽下腺中的表达量,且在10日龄采集蜂咽下腺中的表达量也高于在10日龄哺育蜂咽下腺中的表达量;105个下调表达的DEGs的表达趋势与上述164个DEGs的相反。GO分析结果表明,10日龄和21日龄采集蜂咽下腺中高表达的164个DEGs显著富集于硫酸盐跨膜转运蛋白活性、硫化合物跨膜转运蛋白活性、铁离子结合和氧化还原酶活性;下调表达的105个DEGs显著富集于核糖体、细胞内核糖核蛋白复合物和核糖核蛋白复合物;KEGG通路分析结果表明,105个下调表达的DEGs显著富集于核糖体以及淀粉和蔗糖代谢两个通路。qPCR检测结果显示,LOC409889,LOC406114,LOC408453和LOC100578735均在21日龄采集蜂中表达量最高;LOC406114和LOC100578735在21日龄采集蜂咽下腺中的表达量最高,而在其他组织中表达量较低或不表达。【结论】本研究通过比较转录组筛选鉴定了西方蜜蜂采集蜂咽下腺中高表达的DEGs,为深入研究采集蜂咽下腺的功能提供了数据,同时也为研究西方蜜蜂的采集行为及采集力强蜂种的分子选育提供新的视角。 展开更多
关键词 西方蜜蜂 咽下腺 差异表达基因 α-淀粉 丙酮酸脱氢α亚基E1组分
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Studies on Membrane Function and Sugar Components of Ultradried Seeds 被引量:9
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作者 汪晓峰 景新明 +2 位作者 林坚 郑光华 蔡早 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2003年第1期23-31,共9页
The effects of ultradry storage on the activity of ATPase and fluidity of plasma membrane in Chinese cabbage (Brassica pekinensis (Lour.) Rupr.) and elm ( Ulmus pumila L.) seeds were investigated. The results indicate... The effects of ultradry storage on the activity of ATPase and fluidity of plasma membrane in Chinese cabbage (Brassica pekinensis (Lour.) Rupr.) and elm ( Ulmus pumila L.) seeds were investigated. The results indicated that no significant differences in the activity of ATPase and the micro- viscosity of plasma membrane of ultradried (UD) seeds could be found as compared to the control seeds stored under -20 degreesC, although there was a little adverse effect on the seeds with extreme dehydration. The results were consistent with higher vigor level of UD seeds. This implied that ultradry seed storage could protect the integrity of the membrane, maintain its physiological function and improve the storability of seeds. The relationship between sugar and desiccation tolerance of UD seeds was analysed using the HPLC. The results showed that the ratio of reducing to nonreducing sugar was lower in UD seeds than that in control. The content of sucrose and stachyose in elm and Chinese cabbage UD seeds was related to their desiccation tolerance, while no stachyose was detected in corn (Zea mays L.) seeds. This could be one of the reasons for its sensitivity to desiccation. 展开更多
关键词 ultradry seed storage ATPASE micro-viscosity soluble sugar
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Research on Activity and Expression of Tyrosinase in Varicorhinus macrolepis
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作者 庞秋香 王阳阳 +1 位作者 赵博生 孙欢欢 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2012年第2期417-420,共4页
[Objective] This study aimed to analyze tyrosinase activity and its expression in Varicorhinus macrolepis. [Method] V. macrolepis was used as experimental material for the analysis and research of tyrosinase in nine k... [Objective] This study aimed to analyze tyrosinase activity and its expression in Varicorhinus macrolepis. [Method] V. macrolepis was used as experimental material for the analysis and research of tyrosinase in nine kinds of organs and tissues of male and female V. macrolepis individuals by using polyacrylamide gel electrophoresis and biochemical staining method, spectrophotometry and enzyme histochemical technology. [Result] Tyrosinase exists in the liver and pancreas, intestine and spleen of female and male V. macrolepis and in the gallbladder of male V. macrolepis. Tyrosinase activities in various tissues of V. macrolepis varied largely. Specifically, tyrosinase activities in the spleen was the maximum, which was higher in female V. macrolepis than in males. According to the enzyme histochemistry results, strong positive signals of tyrosinase existed in the spleen, intestine, liver and pancreas and gallbladder of V. macrolepis, which was the strongest in the spleen. [Conclusion] In this paper, research on tissue localization of tyrosinase in V. macrolepis had been first reported, which provided theoretical basis for further exploring the functions of tyrosinase in V. macrolepis. 展开更多
关键词 V. macrolepis TYROSINASE ELECTROPHORESIS SPECTROPHOTOMETRY Enzyme histochemistry
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植物乳杆菌IID基因突变株的构建及对IIa类细菌素敏感性分析 被引量:1
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作者 熊尧 谢英 +3 位作者 张世湘 张列兵 罗云波 郝彦玲 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2013年第2期7-9,共3页
采用同源重组技术,对IIa类植物乳杆菌素LB-B1敏感的植物乳杆菌WQ0815中甘露糖磷酸转移酶系统(ElltMan)中的IID组分进行突变,利用牛津杯法分析了植物乳杆菌WQ0815 IID组分突变前后对植物乳杆菌素LB-B1的敏感性变化。结果表明,突变株对植... 采用同源重组技术,对IIa类植物乳杆菌素LB-B1敏感的植物乳杆菌WQ0815中甘露糖磷酸转移酶系统(ElltMan)中的IID组分进行突变,利用牛津杯法分析了植物乳杆菌WQ0815 IID组分突变前后对植物乳杆菌素LB-B1的敏感性变化。结果表明,突变株对植物乳杆菌素LB-B1产生抗性,说明敏感菌株中ElltMan的IID组分是植物乳杆菌素LB-B1发挥抑菌作用时的结合位点。 展开更多
关键词 植物乳杆菌素LB-B1 甘露糖磷酸转移系统IID组分 突变体 功能鉴定
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Analysis of ABC (D) stratification for screening patients with gastric cancer 被引量:17
16
作者 Tomohiro Kudo Satoru Kakizaki +4 位作者 Naondo Sohara Yasuhiro Onozato Shinichi Okamura Yoshikatsu Inui Masatomo Mori 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2011年第43期4793-4798,共6页
AIM:To evaluate the value of ABC(D) stratification [combination of serum pepsinogen and Helicobacter pylori(H.pylori) antibody]of patients with gastric cancer.METHODS:Ninety-five consecutive patients with gastric canc... AIM:To evaluate the value of ABC(D) stratification [combination of serum pepsinogen and Helicobacter pylori(H.pylori) antibody]of patients with gastric cancer.METHODS:Ninety-five consecutive patients with gastric cancer were enrolled into the study.The serum pepsinogenⅠ(PGⅠ) /pepsinogenⅡ(PGⅡ) and H.pylori antibody levels were measured.Patients were classified into five groups of ABC(D) stratification according to their serological status.Endoscopic findings of atrophic gastritis and histological differentiation were also analyzed in relation to the ABC(D) stratification.RESULTS:The mean patient age was(67.9±8.9) years.Three patients(3.2%) were classified into group A,7 patients(7.4%) into group A',27 patients(28.4%) into group B,54 patients(56.8%) into group C,and 4patients(4.2%) into group D,respectively.There were only three cases in group A when the patients taking acid proton pump inhibitors and those who had undergone eradication therapy for H.pylori(group A') were excluded.These three cases had mucosal atrophy in the grey zone according to the diagnostic manual of ABC(D) stratification.Histologically,the mean age of the patients with well differentiated adenocarcinoma was significantly higher than that of the patients with poorly differentiated adenocarcinoma(P<0.05) .There were no differences in the pattern of atrophy in the endoscopies between the well differentiated and poorly differentiated groups.CONCLUSION:ABC(D) stratification is a good method for screening patients with gastric cancers.Endoscopy is needed for grey zone cases to check the extent of mucosal atrophy. 展开更多
关键词 Gastric cancer Helicobacter pylori Pepsinogen ABC (D) stratification Cancer screening
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Zooplankton community analysis in the Changjiang River estuary by single-gene-targeted metagenomics 被引量:1
17
作者 程方平 王敏晓 +1 位作者 李超伦 孙松 《Chinese Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2014年第4期858-870,共13页
DNA barcoding provides accurate stages. Single-gene-targeted metagenomic analysis identification of zooplankton species through all life based on DNA barcode databases can facilitate long- term monitoring of zooplankt... DNA barcoding provides accurate stages. Single-gene-targeted metagenomic analysis identification of zooplankton species through all life based on DNA barcode databases can facilitate long- term monitoring of zooplankton communities. With the help of the available zooplankton databases, the zooplankton community of the Changjiang (Yangtze) River estuary was studied using a single-gene-targeted metagenomic method to estimate the species richness of this community. A total of 856 mitocbondrial cytochrome oxidase subunit 1 (coxl) gene sequences were determined. The environmental barcodes were clustered into 70 molecular operational taxonomic units (MOTUs). Forty-two MOTUs matched barcoded marine organisms with more than 90% similarity and were assigned to either the species (similarity〉96%) or genus level (similarity〈96%). Sibling species could also be distinguished. Many species that were overlooked by morphological methods were identified by molecular methods, especially gelatinous zooplankton and merozooplankton that were likely sampled at different life history phases. Zooplankton community structures differed significantly among all of the samples. The MOTU spatial distributions were influenced by the ecological habits of the corresponding species. In conclusion, single-gene-targeted metagenomic analysis is a useful tool for zooplankton studies, with which specimens from all life history stages can be identified quickly and effectively with a comprehensive database. 展开更多
关键词 ZOOPLANKTON DNA barcodes cytochrome oxidase subunit 1 (coxl)
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CRISPR/Cas9介导的Suds3敲除抑制小鼠胚胎干细胞增殖和中内胚层分化 被引量:1
18
作者 董春阳 王波 +4 位作者 明金 李陈 方仕才 黄依 刘晶 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期1050-1061,共12页
胚胎干细胞(ESCs)具有分化为成体各种细胞的能力,其在发育和分化过程中的命运决定受基因表达、表观遗传和胞外信号等多种因素的综合调控。表观遗传调控例如DNA甲基化、组蛋白乙酰化和甲基化,在ESCs的多能性维持以及分化过程中发挥重要... 胚胎干细胞(ESCs)具有分化为成体各种细胞的能力,其在发育和分化过程中的命运决定受基因表达、表观遗传和胞外信号等多种因素的综合调控。表观遗传调控例如DNA甲基化、组蛋白乙酰化和甲基化,在ESCs的多能性维持以及分化过程中发挥重要作用。Suds3(Sin3 histone deacetylase corepressor complex component SDS3)是Sin3组蛋白去乙酰化酶复合物的重要组分之一,在胚胎发育、细胞增殖、染色体分离等生物过程中发挥重要作用,但Suds3在ESCs中的功能例如对ESCs增殖、多能性维持及分化过程中的影响却少有报道。本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,构建了Suds3基因敲除的小鼠胚胎干细胞系,并结合细胞培养、体外拟胚体(embryoid body,EB)形成和体内畸胎瘤形成,CCK-8细胞增殖检测和细胞计数实验对Suds3在ESCs中的功能展开研究。Western印迹结果显示,SUDS3蛋白未表达,成功实现了对Suds3基因的敲除。通过对细胞形态的观察以及实时荧光定量PCR(QRT-PCR)检测多能性基因的表达,发现Suds3的敲除对ESCs多能性的维持无显著影响。拟胚体形成实验发现,拟胚体形成的第4 d和第6 d,Suds3^(-/-)细胞多能性基因表达并未像野生型细胞一样迅速下调反而提高(^(***)P<0.001),中胚层和内胚层基因表达量相比野生型显著降低(^(***)P<0.001),而外胚层基因表达量相比野生型提高(^(***)P<0.001)。CCK-8增殖检测和细胞计数的结果发现,Suds3的敲除使ESCs的增殖能力受到抑制(^(*)P<0.05,^(***)P<0.001)。体内畸胎瘤形成实验和HE染色表明,Suds3敲除抑制了增殖,同时促进外胚层分化,减少了中胚层和内胚层的分化。并且在Suds3^(-/-)细胞中过表达Suds3可以挽救敲除Suds3引起的ESCs表型变化。本研究成功构建了Suds3敲除的胚胎干细胞系,并表明Suds3的敲除对ESCs多能性的维持无显著影响,抑制ESCs的增殖及促进外胚层分化,限制中胚层和内胚层的分化。上述结果为研究组蛋白乙酰化对ESCs分化及早期胚胎发育的影响提供了新的见解和研究模型,为体外定向分化获取功能性细胞及未来的细胞治疗策略提供了技术参考。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 Sin3组蛋白去乙酰化阻遏复合物组分SDS3 胚胎干细胞 拟胚体形成 细胞增殖
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Cloning and Molecular Identification of A Fatty Acid Desaturase 2 Gene in a and C Genome of Brassica Species
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作者 Lei CHEN Sang SHUANG +2 位作者 Song CHEN Feng CHEN Qi PENG 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2016年第5期1048-1054,共7页
The fatty acid desaturase 2(fad2) gene was proven to be a major locus for high oleic acid(C18:1).Brassica napus is an amphidiploid species originating from a spontaneous hybridization of Brassica rapa and Brassica ole... The fatty acid desaturase 2(fad2) gene was proven to be a major locus for high oleic acid(C18:1).Brassica napus is an amphidiploid species originating from a spontaneous hybridization of Brassica rapa and Brassica oleracea.B.napus contains multiple copies in genome for most of the genes,including fad2 genes.The research cloned nine fad2 genes from 3 varieties of B.rapa and 3 varieties of B.oleracea,respectively.Alignment of the nine fad2 sequences from B.rapa and B.oleracea detected 6 single nucleotide polymorphic sites,which resulted in 6 amino-acid substitutions.The nucleotide substitutions at position 743 bp in the fad2-A gene and position 947 bp in the fad2-C gene were used as 3' end of allele-specific primers.In use of the allele-specific primers to amplify fad2 gene,we could identify if the fad2 gene originated from A genome or C genome.Besides,the research found that fad2 genes in C genome are more conserved in evolutionary process than those in A genome.The fad2 expression data reported in this study revealed that fad2-A from B.rapa was not only expressed in siliques same as fad2-C from B.oleracea,but also expressed in a high level in stems.Not even the less,fad2 gene from B.napus was expressed higher in roots and flowers.All these results provided evidences that fad2,though it was expressed differently in B.rapa and B.oleracea,but it was regulated by the same approach in B.napus. 展开更多
关键词 Fad2 Gene SNP Brassica napus GENOTYPING
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QM/MM Study on Enzymatic Mechanism in Sinigrin Biosynthesis
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作者 Ya-Jie Guo Ya-Jun Liu 《Chinese Journal of Chemical Physics》 SCIE EI CAS CSCD 2022年第1期193-199,I0041-I0057,I0064,共25页
As the major and abundant type of glucosinolates(GL)in plants,sinigrin has potential functions in promoting health and insect defense.The final step in the biosynthesis of sinigrin core structure is highly representat... As the major and abundant type of glucosinolates(GL)in plants,sinigrin has potential functions in promoting health and insect defense.The final step in the biosynthesis of sinigrin core structure is highly representative in GL compounds,which corresponds to the process from 3-methylthiopropyl ds-GL to 3-methylthiopropyl GL catalyzed by sulfotransferase(SOT).However,due to the lack of the crystallographic structure of SOT complexed with the 3-methylthiopropyl GL,little is known about this sulfonation process.Fortunately,the crystal structure of SOT 18 from Arabidopsis thaliana(At SOT18)containing the substance(sinigrin)similar to 3-methylthiopropyl GL has been determined.To understand the enzymatic mechanism,we employed molecular dynamics(MD)simulation and quantum mechanics combined with molecular mechanics(QM/MM)methods to study the conversion from ds-sinigrin to sinigrin catalyzed by AtSOT18.The calculated results demonstrate that the reaction occurs through a concerted dissociative mechanism.Moreover,Lys93,Thr96,Thr97,Tyr130,His155,and two enzyme peptide chains(Pro92-Lys93 and Gln95-Thr96-Thr97)play a role in positioning the substrates and promoting the catalytic reaction by stabilizing the transition state geometry.Particularly,His155 acts as a catalytic base while Lys93 acts as a catalytic acid in the reaction process.The presently proposed concerted dissociative mechanism explains the role of At SOT18 in sinigrin biosynthesis,and could be instructive for the study of GL biosynthesis catalyzed by other SOTs. 展开更多
关键词 SINIGRIN SULFOTRANSFERASE Molecular dynamics Quantum mechanics and molecular mechanics
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