犬瘟热病毒间接免疫酶组化检测方法的建立

为对犬瘟热病毒(CDV)进行组织定位检查,本实验利用犬瘟热抗CDV单克隆抗体(MAb),采用间接免疫酶组化法对6只人工感染的比格犬肠组织的病毒抗原进行定位检测。结果表明,利用犬瘟热抗CDV MAb建立的间接免疫酶组化方法具有较高的特异性和灵敏性,可原位检测病犬肠组织中CDV抗原的分布,其抗原的阳性表达主要在小肠绒毛和李氏隐窝的上皮细胞胞浆内,表明CDV主要侵害小肠的粘膜上皮组织。

一氧化氮在大鼠异种肝移植急性排异中的作用及其黄递酶组化研究

目的 :探讨一氧化氮 (NO)在肝移植急性反应中的功能作用及 NO合酶 (NOS)的细胞定位。方法 :应用金黄地鼠至大鼠异种原位肝移植急性排斥反应及大鼠同基因原位肝移植动物模型 ,观察 L - NMMA对受体存活期、AL T、TNF-α及移植肝的病理影响 ,应用 NADPH - d组化染色观察 NOS的活性及其细胞来源。结果 :表明 L - NMMA可明显降低异种肝移植组受体存活期、加剧其肝功能恶化、上调 TNF-α、加剧移植肝的病理损害 ;异种肝移植组 NADPH- d组化染色呈强阳性 ,主要在肝实质细胞及浸润炎性细胞表达。结论

培养心肌细胞琥珀酸脱氢酶酶组化显示方法

采用乳大鼠心肌细胞培养,琥珀酸脱氢酶NBT显示法,酶活性处呈紫兰色颗粒或棒状。此方法简便,易于操作,特异性强,定位准确,并可长期保存,具有较大的应用价值。

用间接免疫酶组化法检测“502”胶显现人指纹ABO血型的研究

本文研究应用间接免疫酶组化法检测“502”胶显现人指纹的ABO血型.结果显示69例个体中,检出65例指纹的ABO血型,检出率为94.2%.该方法具有特异性好、准确灵敏、结果可靠、重复性好等特点,为法医物证检验个人识别提供了一种新的手段.

氟化钠对奶山羊软组织酶组化的影响

以奶山羊为实验动物,按体重灌服氟化钠溶液复制奶山羊氟病模型,通过临床观察、病理学和软组织酶组织化学的观测,进一步深入探讨了氟病的发生机理。结果表明,氟引致心脏、肝脏、脾脏、肌肉等组织酶发生变化,说明氟可影响细胞中生物膜上的多种酶的活性,造成生物膜的损伤,损伤的生物膜失去了酶赖以存在的支架,使生物膜上的酶扩散,氟更容易与酶的金属离子结合,进一步加重了对酶活性的影响。

间接免疫酶组化法检测人指纹ABO血型

建立一套测定人指纹 ABO血型的方法体系。运用间接免疫酶技术和免疫印迹技术 ,对指纹胶纸提取的指纹、银粉显现提取的指纹、直接转移至硝酸纤维素膜 (NC膜 )上的指纹、银粉显现转移至 NC膜上的指纹、“5 0 2”胶熏显转移至 NC膜上的指纹等进行 ABO血型检测。上述 5种方法采集的 2 12枚指纹 ,绝大部分能正确地检出 ABO血型 ,检出率为 90 %～ 93.8% ;未能检出的样本为非分泌型人指纹。应用间接免疫酶技术及免疫印迹技术测定人指纹的 ABO血型的方法具有特异性强、准确可靠、检测方便等优点 ,在法庭科学中易推广应用 。

人工晶体睫状沟缝线固定术的酶组化观察

以家兔建立人工晶体睫状沟缝线固定术动物模型。手术后1／2、1、2、3月时摘取术眼及对照眼睫状沟组织，采用酶组化技术观察睫状沟组织的反应。结果显示，术后1／2月，钠钾－ATP酶活性明显升高，1／2～3月逐渐降到正常与对照组一致。图像经计算机分析和统计学处理。结果表明，睫状沟缝线固定术安全、可靠。

免疫酶组化法检测人工感染牦牛体内布氏杆菌的研究

为了确定免疫酶组化法检测布氏杆菌的临床应用价值,笔者利用甘肃省甘南州兽医站人工感染试验的牦牛,进行现场检测,并与传统的细菌分离培养法做对比试验。对每头牦牛20种组织器官的检验结果表明:免疫酶组化法对细菌分离培养法的阳性符合率为100％,但前者阳性检出率却显著地高于后者。并且用免疫酶组化法检测耗时短,操作安全、简便,因此更具有实用价值。

应用免疫酶组化技术检测狂犬病毒的方法学探讨

目的:比较常规石蜡切片HE染色和免疫酶组化ABC法检测狂犬病毒的灵敏度。方法:在已感染狂犬病毒的10只小鼠脑组织石蜡切片上,分别用HE染色和免疫酶组化ABC法检测狂犬病毒。结果:HE染色仅在4只小鼠脑组织神经细胞胞浆内找到代表狂犬病毒抗原的内基氏小体,阳性率为40%;免疫酶组化ABC法检测10只小鼠脑组织均见内基氏小体,其阳性率为100%,明显高于HE染色法(P<0.05)。结论:用免疫酶组化ABC法检测狂犬病毒抗原比HE染色法未列举特异的事实敏感,提示用免疫酶组化ABC法检测可提高狂犬病毒诊断率。

日粮诱发豚鼠胆囊炎的病理学及酶组化研究

本研究采用高脂肪日粮；高胆固醇日粮；高碳水化合物、低脂、低蛋白日粮；低蛋白、低热卡日粮以豚鼠为动物模型诱发其胆结石形成，通过酶病理组织化学技术结合胆汁成份分析，探讨了多种酶在胆结石形成过程中的作用。结果表明：４ 种致石日粮都能造成豚鼠胆囊炎症和结石形成，肝脏表现为胆管炎和动脉炎，胆囊及肝外胆管粘液腺显著增生。胆囊粘膜β Ｇ Ｃ Ｄ、 Ａ Ｃ Ｐ、 Ａ Ｋ Ｐ 活性升高， Ｇ６ Ｐａｓｅ 活性下降，且各实验组间无明显差异。肝脏β Ｇ Ｃ Ｄ 变化不明显， Ａ Ｃ Ｐ、 Ａ Ｋ Ｐ、 Ｇ６ Ｐａｓｅ３种酶活性变化明显，且各实验组间差异较大。胆汁理化成份明显改变：胆汁β Ｇ Ｃ Ｄ 活性升高且与胆囊炎的严重程度有关，胆汁中 Ｔ Ｂ、 Ｃ Ｂ、 Ｕ Ｃ Ｂ、 Ｃａ２＋ 的含量均升高，并且胆汁各理化成份之间有一定的相关关系。通过分析认为：胆结石的形成与酶代谢紊乱，尤其是β Ｇ Ｃ Ｄ 的紊乱和胆汁中各成份含量失衡有密切关系。

免疫酶组化间接法诊断猪流行性腹泻的研究

建立了免疫酶组化间接法诊断猪流行性腹泻的方法。该法特异性好,简便快速,不需特殊仪器设备,普通显微镜或肉眼即可判定结果,利于基层使用。

用免疫酶组化法测定混合斑中精子ABO血型的案例分析

精液与阴道液混合斑的检测,一直是强奸案件中的棘手问题之一。传统的中和试验由于不能排除阴道分泌物中ABH物质对精液ABO血型测定结果的干扰,个人识别能力有限。国内外学者用多种方法研究证实了人类精子上含ABH物质。欧炯文等采用酶标抗体免疫组化法直接测出了混合斑中精子的ABO型,我们用该法对各市、县公安局送检的12例强奸案混合斑中精子的ABO型进行了测定,供个人识别之用,结果见表、图1、图2。

应用酶组化技术研究肝脏组织细胞内酶活性与死亡时间的关系

应用酶组化技术研究肝脏组织细胞内酶活性与死亡时间的关系曾泽民，涂彬厦门市人民检察院；厦门３６１０１２上海医科大学法医学系，上海２０００３２酶组化技术（Ｅｎｚｙｍｅｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｔｔｅｃｈｎｉｑｕｅ）是通过显色反应来检测组织细胞中内源性酶存在...

应用免疫酶组化法检测病料中的布鲁氏菌

目前,在对布鲁氏菌病临床流产材料及其它病理材料中的布鲁氏菌检查、疫情监测方面,尚无一快速、敏感、实用的方法。为此,本文建立了3种免疫酶组化法(直接法,间接法和SPA法)对5个种14个生物型布鲁氏菌进行了检测,并探讨了这3种免疫酶组化法的应用价值。(一)材料和方法1.实验动物:①家兔,2.5～3kg,布鲁氏菌血清学检查阴性;②怀孕30～35天的豚鼠,布鲁氏菌血清学检查阴性;③小白鼠,18～22g。2.菌种:①布鲁氏菌:5个种不同型别的布鲁氏菌共17株,来源于卫生部药品生物制品检定所。②对照菌:共50株,其中大肠杆菌11株,变形杆菌3株,波氏杆菌1株,羊流产沙门氏菌。

免疫酶组化法检测甲型肝炎IgM抗体的研究

甲肝患者急性期单份血清中特异性HAV-IgM 抗体的检出,可作为甲肝早期诊断可靠的指标.我们用免疫酶组化法检测HAV-IgM 抗体,简便、快速,且不需特殊设备,取得了满意的结果.一、材料和方法1.HAV-BJ-1株感染A_(549)

间接免疫酶组化检测禽波氏杆菌在感染鸡体内的抗原定位

本试验以超声破碎和高速离心方法提取禽波氏杆菌外膜蛋白,作为抗原免疫家兔,制备并纯化兔抗禽波氏杆菌外膜蛋白IgG,建立了能进行禽波氏杆菌抗原定位和检测的间接免疫酶组化法,并对试验条件进行了优化。对禽波氏杆菌人工感染海兰褐雏鸡的检测结果表明,该法能特异性地对气管、肺、肝、心、脾、肾中的禽波氏杆菌进行抗原定位,同细菌分离鉴定的结果符合率为100%。同时对感染鸡胚肝脏和心脏中禽波氏杆菌的检测结果均为阳性。该法具有高度敏感性和特异性特点,可用于禽波氏杆菌临床和试验感染条件下的诊断和定位检测。

五种酶组织化学方洁显示大鼠海马微血管的比较

本文对１０例成年Ｗｉｓｔａｒ大鼠海马，应用过氧化物酶二氨基联苯胺（ＤＡＢ）法、碱性磷酸酶（ＡＩＰ）、镁离子激活的三磷酸腺苷酶（Ｍｇ（２＋）－ＡＴＰａｓｅ）、钙离子激活的三磷酸腺昔酶（Ｃａ（２＋）－ＡＴＰａｓｅ）和５’－核苷酸酶（５’－Ｎａｓｅ）等酶组织化学方法显示其微血管，并应用体视学方法测算，比较上述方法显示微血管的效果，结果表明：ＤＡＢ法显示微血管的效果最好，ＡＩＰ法次之，Ｍｇ（２＋）－ＡＴ－Ｐａｓｅ法再次之。大鼠海马微血管Ｃａ（２＋）－ＡＴＰａｓｅ呈弱阳性，５‘－Ｎａｓｅ呈阴性。ＤＡＢ法和Ｍｇ（２＋）－ＡＴＰａｓｅ法分别适宜作微血管长度密度和血管直径的定量分析。

慢性胃炎3种证型与胃黏膜酶组化的相关性

目的:从胃黏膜表面p H值、组织病理学变化及胃黏膜酶组化角度研究并探讨慢性胃炎肝胃气滞、脾胃气虚及脾胃湿热3种证型演变规律及证的物质基础。方法:60例慢性胃炎3种证型患者胃镜下取胃黏膜活检组织,用精密试纸检测胃黏膜表面p H值,冰冻切片酶组化法显示琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)及碱性磷酸酶(ALP)酶活性,石蜡切片HE及AB-PAS染色光镜观察胃黏膜组织病理学变化及黏液分泌状态。结果:3种证型胃窦黏膜表面p H值分别为:肝胃气滞(5.65±0.24)、脾胃湿热(5.43±0.05)、脾胃气虚(5.49±0.06),差异无统计学意义;胃窦黏膜SDH(-)及弱(+)面积从多至少排序为:脾胃气虚、脾胃湿热、肝胃气滞;肠化部位SDH酶活性相对较强,萎缩部位则较弱或呈(-);3种证型均未见LDH完全(-)病例,脾胃气虚及脾胃湿热证亦未见LDH弱(+)病例,肝胃气滞证仅见2例弱(+);肠化部位LDH活性强于或近似于非肠化区;脾胃气虚证ALP(-)及(+)面积明显多于脾胃湿热和肝胃气滞证,中强(+)面积明显少于肝胃气滞证和脾胃湿热证。结论:胃黏膜酶的分布及其活性变化是慢性胃炎辨证及证型演变的物质基础。