免疫亲和层析技术协同酶联免疫吸附法检测赭曲霉毒素A

利用免疫亲和层析技术(immunoaffinity chromatography,IAC)对样品中赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)进行捕获与浓缩,利用酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法对IAC捕获的目标物OTA进行测定。IAC与ELISA中的抗OTA单克隆抗体来自不同的克隆株,分属不同独特型,与OTA结合靶点的选择性存在差异,IAC与ELISA协同检测,可以有效过滤OTA结构类似物造成的干扰,提高免疫分析的特异性与灵敏度。该方法用于加标样品测定时,OTA的检出限为0.2 ng/g,定量限为0.4 ng/g,OTA的平均回收率为75.9%,与单一的ELISA法相比,该方法虽然回收率略低,但灵敏度可以显著提高,达到ELISA法的60倍。通过对49份样品的实际检测,该方法检出阳性样品与国标法的符合率达到100%,漏检率为0%,由此可见,该方法在准确性上表现出明显的优势。作为一种综合免疫分析技术,该方法不需要大型仪器设备,对操作环境没有严格要求,便于基层实验室对样品中OTA的分析。

酶联免疫吸附法与核酸检测技术在血站血液标本乙肝病毒筛查中的应用

目的探究酶联免疫吸附法(ELISA)与核酸检测(NAT)技术在血站血液标准乙肝病毒(HBV)筛查中的应用。方法选取2022年1月—2022年12月血站采集的血液标本12282份作为研究对象,所有标本均接受ELISA、NAT检测,以电化学免疫发光法(ECLIA)检测结果作为金标准,对两种检测方法的检测结果做一致性分析,并比较两种检测方法的窗口期、准确度、灵敏度、特异度2、阳性率、漏诊率差异,比较不同HBV感染状态患者HBV-DNA阳性率差异。结果ELISA检测HBV的窗口期高于NAT(P<0.05),准确度、灵敏度低于NAT,漏诊率高于NAT(均P<0.05);ELISA、NAT检测HBV的特异度、阳性检出率比较,无明显差异(均P>0.05);大三阳的HBV-DNA阳性率均高于小二阳、小三阳(均P<0.05);小二阳、小三阳两者的HBV-DNA阳性率比较,无差异(P>0.05)。结论ELISA与NAT均可良好应用于HBV检测,且NAT具备更高的准确度、灵敏度和更低的漏诊率,可良好反映HBV的传染性,是ELISA的有效补充。

用酶联免疫吸附受体法检测鱼类生长激素的生物活性

根据激素—受体反应的原理，结合酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ）和放射受体测定法（ＲＲＡ）的优点，应用我们纯化的草鱼生长激素（ｇｃＧＨ）和大鳞大马哈鱼生长激素（ｓＧＨ）及其特异抗体．采用鱼类肝细胞膜受体制剂，首次建立了测定鱼类ＧＨ生物活性的酶联免疫吸附受体测定法（ＥＬＩＳＡ—ＲＡ）。此法检测草鱼ＧＨ的灵敏度达０．０６３～０．１２５μｇ／ｍｌ，检测大马哈鱼ＧＨ与草鱼肝膜受体结合的灵敏度达０．２５μｇ／ｍｌ。同时表明草鱼ＧＨ、基因重组鲤ＧＨ以及大马哈鱼ＧＨ均可不同程度地与草鱼（Ｃｔｅｎｏｐｈａｒｙｎｇｏｄｏｎｉｄｅｌｌｕｓ）、鲤（Ｃｙｐｒｉｎｕｓｃａｒｐｉｏ）、鲶（Ｓｉｌｕｒｕｓｍｅｒｉｄｉｏｎａｔｉｓ）和黄颡鱼（Ｐｅｔｔｅｏｂａｇｒｕｓｆｕｌｖｉｄｒａｃｏ）肝细胞ＧＨ受体特异结合。本测定系统可用于测定鱼类垂体中的ＧＨ含量以及监测鱼类ＧＨ分离纯化过程。

酶联免疫吸附法在畜产品快速检测中的应用

酶联免疫吸附法是畜产品质量安全检测常用的快检方法之一,能快速、准确、高效地对相关产品进行检测。伴随着行业的高速发展,人们对畜产品的需求数量及质量要求也在逐步上升,畜产品的食品安全问题越来越受到重视。但近年来,畜产品中存在着动物疫病、兽药残留及产品非法添加物等相关问题。因此,使用快速、准确的检测方法筛查畜产品的质量安全至关重要。本文以酶联免疫吸附法为主要技术导向,深入剖析其原理,同时对该技术在畜产品快检中的应用情况分层介绍,以期为行业相关研究人员提供依据。

人叶酸受体自身抗体IgG酶联免疫吸附试验检测方法的建立及评价

目的：建立血浆叶酸受体自身抗体免疫球蛋白G（immunoglobulin G，IgG）的酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay ，ELISA）检测方法，并对其进行评价。方法：从正常人的胎盘样品中提取叶酸受体蛋白并将其纯化，以纯化的人源叶酸受体蛋白为包被蛋白，以单克隆抗体为检测二抗，建立血浆叶酸受体自身抗体IgG的间接ELISA检测方法，评价其灵敏度、精密度及稳定性。随机选取24例血浆标本，同时以商品化的牛源叶酸结合蛋白与本方法中提取的人源叶酸受体蛋白作为包被蛋白，采用ELISA方法分别检测血浆中叶酸受体抗体IgG的水平，比较两种方法的检测结果。结果：标准曲线可检测的IgG浓度范围为6．25×10-4～8．00×10-2（标准品采用健康人混合血浆，IgG浓度定为1），最低检测限为3．13×10-4，批内差异为2．74％～8．07％，批间差异为4．16％～8．23％。同一样本不同稀释倍数下IgG的检测结果均在可接受范围内，结果较稳定。血浆标本的牛源包被蛋白与人源包被蛋白检测方法对比结果显示两种方法高度相关，相关系数为0．954（P＜0．001）；人源包被蛋白检测结果比牛源包被蛋白高14％。结论：成功建立以人源叶酸受体蛋白作为包被蛋白、针对血浆叶酸受体自身抗体IgG水平的ELISA检测方法，该方法检测灵敏，重复性好，可用于大样本量的人群检测。

酶联免疫吸附试验检测人叶酸受体抗体IgM方法的建立及评价

目的 建立酶联免疫吸附试验（ELISA）检测人血浆叶酸受体抗体IgM的方法.方法 将从正常分娩健康产妇的胎盘中提取、纯化人叶酸受体蛋白稀释至5 ng/μl,作为抗原包被96孔板,以羊抗人IgM作为二抗,以健康人混合血浆作为标准品,浓度设定为1.采用ELISA检测人血浆叶酸受体抗体IgM水平,并评价该方法的灵敏度、精密度和稳定性.分别以人叶酸受体蛋白和牛源叶酸结合蛋白作为包被蛋白,检测24例健康新生儿母亲和20例神经管畸形患儿母亲的血浆标本叶酸受体抗体IgM水平,比较两种包被蛋白的检测结果.结果 ELISA方法可以检测的人血浆叶酸受体抗体IgM浓度为6.25×10-4～8.00×10-2,最低检测限为3.12×10-4.该方法检测高、中和低浓度血浆叶酸受体自身抗体IgM的批内差异分别为6.61％、3.50％和5.12％,批间差异分别为4.54％、5.49％和5.44％,此方法检测不同稀释倍数样品中叶酸受体自身抗体IgM浓度的测定值均在均数±10%范围内.人叶酸受体包被检测板测得的健康新生儿母亲（t=-11.9,P＜0.001）及神经管畸形患儿母亲（t=7.35,P＜0.001）的叶酸受体抗体IgM浓度均显著高于牛源叶酸结合蛋白包被检测板的测定值.结论 本研究成功建立了检测人血浆叶酸受体抗体IgM的ELISA方法,该方法以人叶酸受体蛋白作为包被蛋白,检测灵敏度高,精密度好,结果稳定.

化学发光法与酶联免疫吸附试验在血液标本内乙肝病毒检测中的价值对比

对比分析化学发光法、酶联免疫吸附法用于检测血液样本内乙肝病毒的价值。方法 选择2022年1月-2023年12月我中心接收疑似乙肝血液样本50例进行回顾性分析,均采取化学发光法、酶联免疫吸附试验对样本内乙肝病毒进行检测,以实时荧光定量聚合酶链反应结果为金标准,分别计算化学发光法、酶联免疫吸附试验检测的灵敏度、特异度及准确率,进一步分析两种检测方法在检测乙肝五项的阳性检出率。结果 50例疑似乙肝患者经实时荧光定量聚合酶链反应检查,结果 显示35例确诊为乙肝疾病,占比70.00%,经过计算,化学发光法检测的灵敏度为97.14%、特异度为93.33%、准确率为96.00%,与酶联免疫吸附试验计算结果比较无统计学差异(p>0.05)。进一步检测乙肝五项结果显示,两项技术在检测HBsAb(乙肝表面抗体)、HBcAb(乙肝核心抗体)、HBsAg(乙肝表面抗原)阳性率比较无统计学差异(p>0.05),化学发光发检测HBeAg(乙肝e抗原)、HBeAb(乙肝e抗体)阳性率高于酶联免疫吸附试验(p<0.05)。结论 化学发光法与酶联免疫吸附试验均可作为检测血液样本内乙肝病毒的方法,其中以化学发光法检测结果更为准确,可用于临床动态监测病情,值得借鉴。

酶联免疫吸附试验(ELISA)在自身免疫性疾病特异性抗体检测中的应用研究

研究酶联免疫吸附试验(ELISA)用于自身免疫性疾病特异性抗体检测的情况,并且使用胶体金法作为对比。方法 选取60例在医院进行HIV抗体检测的病例,利用表1的数据,观察这两种方法在HIV抗体筛查中的阳性检测结果的一致性。结果 同时,通过表2的数据,对比两种方法在特异度、灵敏度和阳性预测值等方面的差异。最终发现,ELISA在HIV抗体检测中的表现较优。其特异度达到了86.66%,灵敏度为83.33%,阳性预测值也为83.33%。相较之下,胶体金法的表现稍逊,其特异度为70.00%,灵敏度仅为50.00%,阳性预测值为60.00%。统计分析显示,ELISA在灵敏度(χ2=1.500, P=0.223)及阳性预测值(χ2=0.749, P=0.383)上均优于胶体金法,但特异度差异无统计学意义(χ2=0.424, P=0.513)。结论 ELISA在自身免疫性疾病特异性抗体检测中展现出较高的灵敏度和阳性预测值,适用于高精度要求的抗体筛查。相较胶体金法,ELISA在灵敏度和预测值方面更具优势,但进一步研究仍需纳入更多样本以验证其应用效果。

酶联免疫吸附试验、金标快速检测法、核酸检测在HIV感染诊断中的应用比较

探究金标快速检测法、酶联免疫吸附试验、核酸检测在人类免疫缺陷病毒(HIV)感染诊断中的应用。方法 研究对象为疑似HIV感染患者,共计1000例,研究开始和结束时间分别为2023.01-2024.01。对入组患者进行金标快速检测法和酶联免疫吸附试验,以免疫印痕迹法诊断结果为金标准。对比两种方式单独使用的诊断效能;并经kappa值分析联合方式和金标准的诊断一致性。结果 诊断结果:1000例疑似患者中,阳性80例,阴性920例,酶联免疫吸附试验真阳、假阳、真阴、假阴分别为80例、1例、919例、0例;金标快速检测法真阳、假阳、真阴、假阴分别为71例、22例、898例、9例;酶联免疫吸附试验真阳、假阳、真阴、假阴分别为70例、25例、895例、10例。酶联免疫吸附试验诊断效能较金标快速检测法、核酸检测更高(P<0.05)。酶联免疫吸附试验结果具有良好的一致性(Kappa值=0.810,95%CI: 0.594~0.830)(P<0.001)。结论 与金标快速检测法、核酸检测相比,酶联免疫吸附试验诊断准确性、灵敏性、特异性等均较高,可实现疾病的准确诊断,便于及时进行治疗,临床应用价值显著,可继续推广及应用。

酶联免疫吸附试验检测促甲状腺激素受体抗体初探

目的探讨酶联免疫吸附试验（EILSA）检测促甲状腺激素受体抗体（TRAb）的意义。方法同时用放射受体分析法（RRA）和EILSA法检测Graves病患者血清中的TRAb，比较EILSA法与RRA法的相关性；再采用EILSA法检测152例不同临床期Graves病患者及健康对照组血清中的TRAb，同时采用化学发光法检测FT3，FT4和TSH。结果按照NGCLSEP9～A文件对两种方法进行直线回归分析，EILSA法同RRA法相关性较好（r=0．9137），对两种方法进行配对资料t检验，差异无统计学显著性意义（P〉0．05）；未治疗组TRAb阳性率高于治疗控制组（P〈0．01），停药组TRAb阳性患者复发的几率高于TRAb阴性患者。结论EILSA法可以取代RRA法检测TRAb；TRAb对于Graves病患者的治疗及预测复发有重要意义，但不适合作为判断甲状腺功能是否正常的指标。

加工食品中花生蛋白夹心酶联免疫吸附测定的前处理方法探究与改进

目的构建一种可配合花生蛋白夹心酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒实现对于加工食品中花生成分可靠检测的高质量样品前处理方法。方法对9种不同pH的提取缓冲液提取未处理、湿热处理、干热处理花生蛋白效果进行比较分析以确定最优提取缓冲液类型。而后,将吐温-20、二硫苏糖醇(dithiothreitol,DTT)、十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)以单独或组合添加的方式加入上一步获得的最优提取缓冲液中,提取3组花生蛋白,并对提取效果与夹心ELISA试剂盒检测花生蛋白回收率进行比较分析以确定最优添加剂配方。结果最终确定添加0.2%SDS和0.1%吐温-20的碳酸盐缓冲液(50 mmol/L,pH 9.6)为最优提取缓冲液。向碳酸盐缓冲液中加入SDS、吐温-20较好地提升了花生蛋白的提取率和回收率,将湿热处理花生蛋白回收率提高了2倍以上。结论本研究实现了对商业加工食品中花生成分的可靠检测,为推动过敏原信息在食品标签的准确标注提供了技术支撑,也为相关研究提供了参考。

酶联免疫吸附试验(ELISA)检测鹿布氏杆菌抗体的研究

通过对布氏杆菌脂多糖抗原、超声波破碎抗原和离心抗原进行筛选和优化 ,确定超声波破碎抗原为最佳抗原 ,首次建立了检测鹿布氏杆菌抗体的间接ELISA。对其特异性、敏感性和重复性进行试验 ,并与其他常规方法进行比较试验 ,结果表明 :该方法的特异性强、敏感性高和重复性好 。

酶联免疫吸附检测法检测全血中他克莫司浓度及其应用

目的：探讨酶联免疫吸附检测法（ＥＬＩＳＡ）检测全血中ＦＫ５０６浓度的准确性及其在器官移植术后抗排斥治疗中的应用。方法：采用酶联免疫吸附检测法，对５例肝移植术后患者不同时期全血中ＦＫ５０６谷值浓度进行监测，并结合临床调整剂量，分析该法的准确性及其对临床ＦＫ５０６应用的指导作用。结果：在３０５个血样的１３１次检测中，质控血样检测结果全部在控制范围内，高、低浓度两个质控的ＲＳＤ值分别为９．０９％和１１．９０％，监测下的ＦＫ５０６血药浓度控制与文献报道一致。结论：酶联免疫吸附检测法灵敏度高、特异性强，是一种较理想的ＦＫ５０６血药浓度常规检测方法，适宜在医院内开展。

酶联免疫吸附技术在食品检测分析中的研究进展

酶联免疫吸附技术(ELISA)是酶免疫测定技术中应用最广泛的技术,是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行,通过酶与底物产生颜色反应,用洗涤法将液相中的游离成分除去后再进行定量测定。主要分为夹心法、间接法和竞争法。本文简要介绍了几种常用方法及其基本作用机制,详述了ELISA检测技术在食品检测中具体应用及发展历史与现状,对其在食品中农药残留、病原微生物、生物毒素、转基因食品、重金属残留、过敏性残留物及违规添加成分检测等方面的应用情况进行系统总结,并对其发展前景进行了分析。

食品中硫丹残留酶联免疫吸附检测方法的研究

建立了测定食品中硫丹农残的酶联免疫吸附检测法(ELISA)。考察了3种提取方法并比较了添加回收率。针对不同的样品,分别采取不同的方式有效地消除了基质对ELISA分析的影响。以ELISA法进行测定得到的样品添加回收率为82.6%～112%,变异系数(CV)为3.65%～16.97%。ELISA法和气相色谱法分析结果具有较好的一致性,从而证明了本实验所建立的ELISA方法的可行性。本方法比常规方法更加简便、快捷,其最低检出限为(0.8±0.1)μg/kg。

酶联免疫吸附法在磺胺类药物残留检测中的应用

介绍了磺胺类药物的毒性及其残留量的检测方法,着重叙述了酶联免疫吸附法及其在磺胺类药物残留检测中的应用。

酶联免疫吸附法在植物性食品安全检测中的应用

文章概述了酶联免疫吸附法(ELISA)的基本原理及方法,详述了其在植物性食品安全检测中的应用,并对该方法的发展趋势及其在食品安全检测中的应用前景进行了展望。

酶联免疫吸附技术及其在食品安全检测中的应用研究进展

本文主要综述了酶联免疫吸附技术原理、分类及其在食品安全检测中的应用,并根据当前研究现状及存在问题进行了研究展望和提出几点发展建议。

酶联免疫吸附试验在食品检测中的应用

本文简要介绍了ELISA的基本原理和类型,详述了国内外使用ELISA方法在食品过敏源、农药残留、致病微生物、转基因等方面检测的最新研究进展,列出了部分目前市售用于食品检测的试剂盒,并对该检测技术的发展趋势及其在食品安全检测中的应用前景进行了展望。

间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清4型鸭疫里默氏杆菌抗体的研究

应用超声波裂解法制备的血清4型鸭疫里默氏杆菌(RA)裂解物作为抗原包被酶标板,成功建立了4型RA抗体检测的间接ELISA法。