酶联免疫吸附检测法检测全血中他克莫司浓度及其应用

目的：探讨酶联免疫吸附检测法（ＥＬＩＳＡ）检测全血中ＦＫ５０６浓度的准确性及其在器官移植术后抗排斥治疗中的应用。方法：采用酶联免疫吸附检测法，对５例肝移植术后患者不同时期全血中ＦＫ５０６谷值浓度进行监测，并结合临床调整剂量，分析该法的准确性及其对临床ＦＫ５０６应用的指导作用。结果：在３０５个血样的１３１次检测中，质控血样检测结果全部在控制范围内，高、低浓度两个质控的ＲＳＤ值分别为９．０９％和１１．９０％，监测下的ＦＫ５０６血药浓度控制与文献报道一致。结论：酶联免疫吸附检测法灵敏度高、特异性强，是一种较理想的ＦＫ５０６血药浓度常规检测方法，适宜在医院内开展。

酶联免疫吸附检测法的应用研究进展

酶联免疫吸附检测法(ELISA)由于具有灵敏、特异、简单、快速及易于自动化操作等优点而得到了快速发展,并且被广泛应用于多个领域。本文对ELISA检测法应用现状及优缺点进行综述,为今后ELISA检测法的更为广阔的应用与发展提供参考。

胆汁泡蛋白酶联免疫吸附检测法的建立与初步临床应用

目的 建立胆汁泡蛋白快速检测法 ,作为防治胆石症临床研究的指标。方法 提取 3 3 .5kd胆汁泡蛋白 ,建立酶联免疫吸附检测法 (ELISA)标准曲线 ,并应用ELISA药盒测定正常人、胆石症患者胆汁和血清中泡蛋白含量 ,同时观察利胆冲剂、胆通胶囊等对泡蛋白的影响。结果 ELISA曲线方程为Y =0 .0 3 5X(r=0 .99) ;胆固醇性结石组胆囊胆汁和血清 3 3 .5kd泡蛋白含量分别为 (2 13 .4± 70 .1)mg/L、(179.8± 97.9)mg/L ,明显高于胆色素性结石症、非胆石症胆道疾病组以及正常人组 (P <0 .0 5) ,而后三者之间没有显著差异 (P >0 .0 5) ;利胆冲剂治疗两周后 ,胆汁和血清泡蛋白含量显著降低 ,而对照组和胆通胶囊治疗组未见明显变化。结论 胆汁泡蛋白的含量在不同人群差异显著 ;利胆冲剂等药物能降低胆汁和血清 3 3 .5kd泡蛋白含量 。

酶联免疫吸附检测法在农药残留检测中的应用

随着农药种类和用量的不断增加,农药的残留对人体的危害以及食品进出口的影响日益严重,因此进行农药残留检测工作非常重要,其中最重要的是建立高效的检测方法。酶联免疫吸附检测法(ELlSA)特异性高、灵敏性强,在农药残留检测中的研究和应用也越来越多,本文综述了其在农药残留检测方面的应用现状、存在问题及建议。

酶联免疫吸附检测法临床应用进展

酶联免疫吸附检测法(ELISA)因具有简单、高效、灵敏、特异、稳定、试剂成本低等特点,被广泛应用于临床医学诊断和研究、食品安全检测等生命科学领域。近年来,ELISA在常规临床诊断应用基础上,通过研究者不断摸索和实践,在感染性疾病、呼吸系统疾病、循环系统疾病、泌尿系统疾病、内分泌及代谢性疾病、神经系统及精神疾病等诸多疾病实验室诊断方面取得新的进展。本文对近几年ELISA临床应用情况进行综述,对存在问题进行分析总结,并提出相应对策,以期为ELISA更好地服务于临床提供借鉴。

罗汉果甜苷V人工抗原免疫原性检测法的建立与评价

目的制备罗汉果甜苷V(mogroside V,MogV)-载体蛋白复合物人工抗原及抗血清,建立抗血清与MogV特异性反应的检测方法,为进一步制备MogV的单克隆抗体、建立快速检测MogV的ELISA法提供技术基础。方法将MogV与丁二酸酐、载体蛋白牛血清蛋白(BSA)和人血清蛋白(HSA)反应偶联,制得半抗原-载体蛋白复合物后,通过紫外扫描光谱计算出结合的半抗原数目;以此抗原免疫Balb/c小鼠,制备抗血清,并通过ELISA法检测效价和特异性。结果合成的人工抗原MogV-HS-BSA结合比约为44∶1,MogV-HS-HSA结合比约为64∶1;通过免疫小鼠得到特异性针对MogV的抗血清,血清效价较高。结论 MogV人工抗原有较好的免疫原性,建立的免疫原性检测方法简便可行。

ELISA法检测花生酱中AFB_1样品前处理方法的改进研究

通过ELISA法,对检测花生酱中AFB1含量的前处理方法进行了改进研究。通过对样品提取条件的优化,提取液稀释度的改变,建立了新的前处理方法,并利用回收率的测定与国标法进行比较。结果表明:利用改进的提取方法处理花生酱样品,对常见浓度加标回收率达75%～120%。新的提取方法不仅简化了操作步骤,减少了工作量,又提高了回收率。

利用特异性抗体建立金黄色葡萄球菌肠毒素B快速检测方法

目的:利用特异性靶向金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)的抗体建立2种体外快速检测SEB的方法。方法:通过间接ELISA法及生物膜干涉技术测定3株抗体(LXY8、LXY9和LXY10)与SEB的结合活性;通过竞争ELISA法鉴定3株抗体的表位交叉情况;利用配对抗体建立双夹心ELISA检测法和胶体金试纸条层析技术检测SEB。结果:3株抗体与SEB均具有较高的亲和力(LXY8:KD=5.25×10^-10 mol/L;LXY9:KD=5.18×10^-9 mol/L;LXY10:KD=8.93×10^-10 mol/L);经间接ELISA法获得生物素标记的抗体与SEB结合的最低饱和浓度为0.25μg/mL,以该浓度作为抗原表位竞争的浓度,竞争ELISA结果表明3株抗体与SEB结合的表位不交叉;根据双夹心配伍实验的结果,获得LXY8与LXY10的最佳配对,SEB的最低检测限为240 pg/mL,而基于LXY8与LXY10配对的胶体金检测试纸条能够在5~10 min内完成样品的检测,且检测灵敏度约为2 ng/mL。结论:基于双夹心酶联免疫吸附技术建立了一种特异、灵敏的体外检测SEB的方法,利用胶体金层析技术开发了SEB快速检测的胶体金检测试纸条,能够实现SEB现场快速高效检测。

免疫学检验方法

9719630 应用单克隆抗体对尿中2,3-二去甲-6-酮-前列腺素 F1α的酶联免疫吸附检测法/Lindsay C//Clin Biochem.-1995,28(4).-395～400 一军大9719631 用两步单克隆竞争酶联免疫吸附夹心法测定脂蛋白(a)/Morikawa W//

马铃薯试管苗病毒检测技术研究

根据大兴安岭马铃薯种薯生产实际,应用酶联免疫吸附检测法(ELISA)检测茎尖组织培养试管苗的带毒情况,鉴定危害马铃薯生产的6种主要病毒(PVX、PVY、PVS、PVM、PVA、PLRV),并结合指示植物如千日红进行最后鉴定,筛选健康、无毒的试管苗,为切段扩繁及试管薯生产作准备。该方法简单易操作,可作为国内生产脱毒种薯单位的标准检测方法进行推广。

感染负荷与粥样硬化形成及斑块性质的相关性（摘要）

目的探讨感染负荷与冠状动脉粥样硬化及其斑块性质的相关性。方法2001年12月至2003年10月在本院接受介入检查的患者182例，血管内超声检测确定冠状动脉粥样硬化及其斑块性质；介入检查前抽静脉血．酶联免疫吸附检测法（ELISA）检测患者血清巨细胞病毒、幽门螺旋菌，肺炎衣原体、EB病毒、B型柯萨奇病毒、A型流感病毒、B型流感病毒、结核杆菌抗体IgG／IgA及乙肝病毒表面抗原。免疫散射比浊法检测高敏C反应蛋白（hs—CRP）水平。结果根据感染负荷将患者分为三组：A组：感染原n≤3种，B组：n=4～5种和C组：n≥6种。冠状动脉粥样硬化的检出率随感染负荷的增加而增加．各组冠状动脉粥样硬化阳性率分别为44．4％，70．6％和76．7％（P〈0．001）；感染负荷与动脉粥样硬化阳性率呈正相关，r=0．9396。血清hs—CRP水平升高者（〉5．0mg／L）冠状动脉粥样硬化阳性率升高更明显（43．8％，70．0％，70．8％）比（45．5％，63．7％．96．8％）．A、B、C组易损斑块检出率分别为33．3％、32．4％、51．7％（P〈0．05），感染原在5种以上者易损斑块检出率明显升高。结论以往感染微生物数量与冠状动脉粥样硬化率相关，血清hs—CRP水平升高者中两者的相关性更明显．提示二者有协同作用。高水平的感染负荷与冠状动脉粥样硬化的的易损斑块率相关。

伏马菌素B2人工抗原的制备研究

为制备伏马菌素B2人工抗原,通过戊二醛法和碳二亚胺法将伏马菌素B2偶联到载体蛋白上,人工抗原免疫BALB/c小鼠后,酶联免疫吸附法测定抗血清的效价,竞争酶联免疫吸附法测定人工抗原的免疫原性。通过氨基化和羧基化的苏丹红作为内参,紫外可见光谱扫描图谱鉴定伏马菌素B2成功偶联到载体蛋白上,免疫原性鉴定证明,碳二亚胺法制备的人工抗原可刺激BALB/c小鼠产生抗伏马菌素B2的抗体。

钾胁迫对枳生长及根系激素和信号物质水平的影响

以枳为材料,研究在沙培条件下其生长、内源激素和信号物质对不同浓度K胁迫的响应。结果显示,与适钾(6 mmol/L)处理相比,无钾(0 mmol/L)、低钾(2 mmol/L)和高钾(12 mmol/L)处理都抑制了植株株高、茎粗、叶片数以及叶、茎和根生物量,也显著降低了根系吲哚乙酸(IAA)、赤霉素(GAs)、油菜素内酯(BR)、玉米素核苷(ZR)含量,但显著增加了根系脱落酸(ABA)含量以及根系信号物质钙调素(CaM)、水杨酸(SA)、一氧化氮(NO)、茉莉酸(JA)水平。K诱导的内源激素和信号物质水平变化表明枳实生苗能对K胁迫快速响应。

大黄酸人工抗原合成及免疫原性鉴定

大黄药理作用广泛,是临床常用中药材之一。大黄酸是其主要活性成分,大黄酸的含量是大黄质量控制的主要指标之一。目前对大黄酸的检测主要是通过仪器分析手段,如高效液相色谱法,但是仪器分析通常操作繁琐、耗时长、通量小且仪器设备昂贵。与之相比,酶联免疫检测法(ELISA)则具有灵敏度高、操作简单、设备仪器需求少、通量高等优点,是实现中药材快速检测的有效手段之一。该研究制备大黄酸(rhein)人工抗原及血清,为之后大黄酸单克隆抗体制备及建立酶联免疫吸附检测方法提供基础。通过碳二亚胺法活化大黄酸,分别与牛血清白蛋白(BSA)及鸡卵清白蛋白(OVA)偶联制备免疫抗原及包被抗原;通过紫外分光光度法检测人工抗原的半抗原与载体蛋白偶联比,分别为4.0:1(rhein-BSA)和2.6:1(rhein-OVA)。用免疫原免疫Bal b/c雌性小鼠,制备抗血清,通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗血清效价及特异性。结果表明血清效价均高于8 000,特异性强,免疫原性良好。

木犀草苷人工抗原合成及免疫原性鉴定

金银花是常用大宗中药材之一,市场流通量大,但存在较多质量问题,建立一种金银花质量快速检测方法具有重要意义。木犀草苷是其质量控制指标之一,目前木犀草苷的含量检测主要以仪器检测为主,无法满足简单、快速、高通量的需求。酶联免疫检测法(ELISA)则具有灵敏度高、操作简单、设备仪器需求少、通量高等优点,是实现中药材有效成分快速检测的有效手段之一。该研究以木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷为原料,通过活泼酯法,分别与牛血清白蛋白(BSA)及鸡卵清白蛋白(OVA)偶联制备免疫抗原及包被抗原;紫外分光光度法检测半抗原与载体蛋白的偶联比,分别为3.7∶1(LG-BSA)和1.0∶1(LG-OVA);免疫原(LG-BSA)免疫Bal b/c雌性小鼠,制备抗血清,ELISA检测抗血清效价并建立血清特异性标线。结果显示血清效价>2 000,以抗血清建立特异性标线,IC_(50)=298.7μg·L^(-1),标线范围18.4~4 852.4μg·L^(-1),表明所制备的完全抗原免疫原性良好。

3种登革热抗原检测方法的比较

目的比较3种检测方法——免疫胶体金包被法、ELISA检测法及PCR核酸检测法,测定登革热抗原的敏感性、特异性及其3种方法的优缺点。方法用免疫胶体金包被法和ELISA检测法及PCR核酸检测法,对来源于医院临床诊断的疑似登革热病例的血清进行抗原检测。结果 100份临床诊断疑似登革热病例的血清经过免疫胶体金包被法检测为阳性者再次用ELISA检测法及PCR核酸检测法测定抗原,检测后的阳性结果准确率均为100%,而100份免疫胶体金包被法检测为阴性的血清,用ELISA检测法及PCR核酸检测法测定抗原,结果出现了假阴性。结论通过比较免疫胶体金包被法、ELISA检测法及PCR核酸检测法检测登革热抗原,使用ELISA检测法及PCR核酸检测法测定登革热抗原的敏感性较强,准确度很高并具有可排除干扰因素的优点。

感染负荷与粥样硬化形成及斑块性质的相关性

目的探讨感染负荷与冠状动脉粥样硬化及其斑块性质的相关性.方法 2001年12月至2003年10月在本院接受介入检查的患者182例,血管内超声检测确定冠状动脉粥样硬化及其斑块性质;介入检查前抽静脉血,酶联免疫吸附检测法(ELISA)检测患者血清巨细胞病毒、幽门螺旋菌、肺炎衣原体、EB病毒、B型柯萨奇病毒、A型流感病毒、B型流感病毒、结核杆菌抗体IgG/IgA及乙肝病毒表面抗原.免疫散射比浊法检测高敏C反应蛋白(hs-CRP)水平.结果根据感染负荷将患者分为三组:A组:感染原n≤3种,B组:n=4～5种和C组:n≥6种.冠状动脉粥样硬化的检出率随感染负荷的增加而增加,各组冠状动脉粥样硬化阳性率分别为44.4%,70.6%和76.7%(P<0.001);感染负荷与动脉粥样硬化阳性率呈正相关,r=0.9396.血清hs-CRP水平升高者(>5.0 mg/L)冠状动脉粥样硬化阳性率升高更明显(43.8%, 70.0%, 70.8%)比(45.5%, 63.7%, 96.8%).A、B、C组易损斑块检出率分别为33.3%、32.4%、51.7%(P<0.05),感染原在5种以上者易损斑块检出率明显升高.结论以往感染微生物数量与冠状动脉粥样硬化率相关,血清hs-CRP水平升高者中两者的相关性更明显, 提示二者有协同作用.高水平的感染负荷与冠状动脉粥样硬化的易损斑块率相关.