国产结核分枝杆菌T细胞免疫反应检测试剂盒诊断结核病的临床试验研究

目的:评价国产结核分枝杆菌T细胞免疫反应检测试剂盒(简称“试验试剂盒”)在体外定性检测疑似结核病患者新鲜外周静脉抗凝血中结核分枝杆菌特异性T细胞免疫反应结果的检测效能。方法:采用国产试验试剂盒与已上市进口产品(简称“对照试剂盒”),针对2020年11月至2021年6月陕西省结核病防治院收治的335例及2021年7月至2022年6月第四军医大学第一附属医院收治的343例疑似结核病患者的新鲜外周静脉抗凝血进行检测效能的比较研究。结果:678例外周静脉抗凝血样本中,以对照试剂盒为参考标准,试验试剂盒检测的敏感度为93.97%(327/348),特异度为96.06%(317/330),一致率为94.99%(644/678);以病原学诊断和临床诊断结果为参考标准,试验试剂盒检测的敏感度为82.93%(277/334),特异度为81.69%(281/344),一致率为82.30%(558/678),对照试剂盒检测的敏感度为87.13%(291/334),特异度为83.43%(287/344),一致率为85.25%(578/678);204例病原学阳性患者外周静脉抗凝血样本中,试验试剂盒的结核病检出率为82.35%(168/204),对照试剂盒的结核病检出率为88.24%(180/204);130例病原学阴性患者的外周静脉抗凝血样本中,试验试剂盒的结核病检出率为83.85%(109/130),对照试剂盒的结核病检出率为85.38%(111/130);在344例非结核肺部疾病患者外周静脉抗凝血样本中,两种试剂盒检测的一致率为95.35%(328/344),试验试剂盒检测的特异度为81.69%(281/344),对照试剂盒检测的特异度为83.43%(287/344)。结论:国产结核分枝杆菌T细胞免疫反应检测试剂盒与进口已上市试剂盒,对疑似结核病患者新鲜外周静脉抗凝血体外检测结核分枝杆菌特异性T细胞免疫反应的结果具有较高的一致性,可以作为疑似结核病患者的替代诊断工具。

大豆脂肪氧化酶-Ⅲ酶联免疫检测试剂盒的制备及其稳定性研究

为了实现对脂肪氧化酶-Ⅲ缺失大豆材料的快速筛选,通过双抗体夹心法利用大豆脂肪氧化酶-Ⅲ的单抗及脂肪氧化酶多抗制备了大豆脂肪氧化酶-Ⅲ的酶联免疫检测试剂盒。结果表明,该试剂盒在2-8℃条件下可以保存6个月,稳定性良好,并可实现对脂肪氧化酶-Ⅲ缺失大豆材料的快速检测。

黄曲霉毒素B1酶联免疫试剂盒稳定性研究

目的:研究自制黄曲霉毒素B1(AFB1)酶联免疫试剂盒在不同温度下的稳定性。方法:比较研制出的AFB1酶联免疫试剂盒在4℃和37℃保存条件下加入不同质量浓度的AFB1后其空白对照孔OD值的变化范围、IC20、IC50、IC80及RSD值的变化情况,及标准曲线的R2值等指标。结果:4℃保存270d空白对照孔OD值变化范围为1.129～1.777,IC20、IC50、IC80及RSD分别为0.05ng/mL和27.36%、0.27ng/mL和27.58%、0.92ng/mL和19.82%,该保存时间内各标准曲线线性关系良好(R2值均大于0.97);37℃加速破坏条件下保存13d内空白对照孔OD值变化范围为1.200～1.809,IC20、IC50、IC80及RSD变化分别为0.06ng/mL和27.71%、0.25ng/mL和25.66%、1.181ng/mL和21.89%,该保存时间内各标准曲线线性关系良好(R2值均大于0.98)。结论:研制的AFB1酶联免疫试剂盒在4℃和37℃加速破坏条件下分别保存270d和13d,试剂盒空白对照孔的OD值均大于1.0,各项指标可满足现场检测要求。

盐酸克伦特罗的酶联免疫分析试剂盒的研制——Ⅱ克伦特罗酶联免疫检测方法的研究

〔目的〕在成功制备关键试剂的基础上 ,建立克伦特罗酶联免疫检测方法 ,并研制其测试盒。〔方法〕应用ELISA法重复测定样品 ,变异系数为 6.9% ,方法的添加回收率尿样为 92 .5 % ,检测限可达 0 .1ng/ml ,克伦特罗抗体与沙丁胺醇、异丙肾上腺素交叉反应率分别为 1.2 5 %、0 .0 3 %。〔结果〕自制的试剂盒与英国Randox公司的 β -Agonist试剂盒对比试验结果 ,两组数据经极差t检验分析 ,|t| <t0 .975无显著差异。〔结论〕该试剂盒具有专一性、快速、灵敏、准确的特点。

企鹅珍珠贝Cd-MT的酶联免疫检测试剂盒的研制

金属硫蛋白是重金属污染的生物标志物,建立其快速检测方法对环境污染的监测具有重要作用。在成功制备免抗企鹅珍珠贝Cd-MT多克隆抗体的基础上,研制一种可以检测贝类Cd-MT的间接竞争酶联免疫吸附分析(ELISA)试剂盒。经过条件优化,该ELISA方法的检测范围为2.0×103～3.9×103 ng/mL,检出限为1.58ng/mL,半数抑制浓度(IC50)为405.92ng/mL,批内相对标准偏差≤8.7%,批间相对标准偏差≤5.2%,添加回收率为84.4%～132.9%,试剂盒在4℃下可保存6个月。

酶联免疫检测试剂盒应用于牛奶中四环素残留的测定

为了加强牛奶中四环素残留量的监控,以四环素-卵清白蛋白为包被抗原,四环素-牛血清白蛋白免疫的产生的抗血清为抗体,辣根过氧化物酶-羊抗兔IgG为酶标记物,研制了四环素快速酶联免疫分析试剂盒,在3.9-2000ng/mL四环素标准浓度范围内,呈线性相关,相关系数为0.9882,批内误差小于批间误差,但其变异系数均在10%以下。与土霉素、金霉素的交叉反应分别为24.31%、6.22%。该试剂盒具有快速、灵敏、准确的特点,适用于牛奶中四环素残留量的快速筛选测定。

石杉碱甲快速检测酶联免疫试剂盒的制备

目的：制备并鉴定石杉碱甲单克隆抗体,研制石杉碱甲间接竞争酶联免疫试剂盒.方法：以石杉碱甲人工抗原免疫BALB/c小鼠获得单克隆抗体,采用酶联免疫吸附法制备石杉碱甲试剂盒,对试剂盒各项指标进行评价.结果：试剂盒工作范围为5~2 500 ng/ml,检测限为6.242 ng/ml,与多种生物碱均无交叉反应,试剂盒可在4℃或-20℃下稳定贮存半年以上,石杉碱甲片回收率在94.2%~108.6%之间,变异系数在2.3%~4.8%之间.结论：石杉碱甲ELISA试剂盒快速、灵敏、稳定,可用于石杉碱甲的含量测定.

国产乙型肝炎病毒表面抗原酶联免疫吸附试验试剂盒的检测效果评价

目的:评价6种国产乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒的检测效果。方法:应用AXSYM全自动微粒子酶免疫化学发光分析仪检测测定后余留标本,对相关样品进行稀释,然后选取6种国产HBsAgELISA试剂盒进行检测,评价6种国产试剂盒的灵敏度、精密度、特异度、检测范围和钩状效应(Hook效应),确立临界值(cut-off)对应的浓度范围以及不同孵育时间对检测灵敏度的影响等。结果:6种试剂盒的灵敏度有一定差异,范围在0.40～0.60ng/mL之间。对低浓度标本,6种试剂盒的批内精密度变异系数(CV)分别为6.21%、9.45%、9.42%、13.04%、10.49%和4.84%;批间精密度CV分别为15.76%、19.12%、19.54%、23.89%、24.22%和14.99%。HBsAg质量浓度与临界值指数(COI)呈S型曲线关系。在本实验所分析的HBsAg浓度范围内未发现高剂量Hook效应。6种试剂盒临界值对应的质量浓度在0.3～0.5ng/mL之间。结论:国产HBsAgELISA试剂盒的灵敏度有待进一步提高。

布鲁氏菌病补体结合酶联免疫吸附试验抗体检测试剂盒敏感性和特异性评价

为评价布鲁氏菌病补体结合酶联免疫吸附试验抗体检测试剂盒(CF-ELISA试剂盒)的敏感性、特异性及与其他试剂盒的符合率,用CF-ELISA试剂盒对布病感染地区牛、羊血清各200份,布病净化地区牛、羊群血清各100份进行抗体检测,同时与其他商品化检测试剂进行了比较。结果表明,感染地区牛、羊血清抗体的McNemar检验结果表明CF-ELISA试剂盒与间接酶联免疫吸附试验(iELISA)试剂盒和CGS的敏感性和特异性差异均不显著(P>0.05),Kappa一致性检验分析结果表明,CF-ELISA试剂盒与iELISA试剂盒检测结果有高度的符合性。检测净化地区牛、羊群血清抗体产品间的特异性和符合率均为100%。

进出口植物产品中甲胺磷残留量酶联免疫检测试剂盒的研究

采用直接竞争酶联免疫吸附试验（ELISA）对进出口植物产品中甲胺磷残留量进行快速筛选检测。将O,S-二甲基硫代磷酰氯与牛血清白蛋白偶联作为免疫原,免疫试验兔获得特异性抗体,并成功建立了甲胺磷残留直接竞争ELISA检测方法及检测试剂盒。结果：检测线性范围0.95-500μg/mL,检测低限为1μg/mL;大米、青菜、苹果、西红柿和黄瓜的加标回收率为72.6%-94.3%;重现试验变异系数为5.4%;试剂盒贮藏在4℃5个月和30℃7d质量稳定。表明本试剂盒具有操作简便、准确、快速、灵敏等特点。

链霉素酶联免疫检测试剂盒方法学评价的设计及应用

由于检测试剂盒方便、快捷,使用范围越来越广泛,其质量直接关系到结果的准确,需要有合适的评价方法确保试剂盒的性能指标符合使用需求。该文针对链霉素酶联免疫检测试剂盒方法学评价,设计完整的评价方案并应用于实际,结果表明:该方案对于判别试剂盒的质量具有较高的实际应用价值。

动物尿液中β-受体激动剂酶联免疫检测试剂盒使用通则的建立

酶联免疫检测法具有操作简便、灵敏度高、设备成本低、可实现批量样品的快速检测等突出特点,现已成为国内外广泛采用的检测农产品中违禁物质的手段。目前国内市场上针对动物尿液中β-受体激动剂的酶联免疫检测试剂盒种类繁多,但产品质量参差不齐。操作人员由于对产品性质、使用方法、注意事项等关键环节理解的偏差,往往造成检测结果不准确,导致阳性样品流入市场。本文建立了酶联免疫检测试剂盒的使用通则,旨在为检验检测人员采购、验收、使用该类产品提供技术参考。

囊虫病循环抗原酶联免疫试剂检测盒的研制

以部分纯化囊虫抗原免疫 Ｂ Ａ Ｌ Ｂ／ｃ 小鼠，取其脾细胞与 Ｓ Ｐ２／０ 细胞融合制备抗囊虫循环抗原（ Ｃ Ａ） Ｍｃ Ａｂ ，共获得 ８ 株分泌抗囊虫 Ｃ Ａ Ｍ ｃ Ａｂ 细胞株。经鉴定，筛选出组合后能获得最佳检测效果的 Ｃ Ａ Ｍ ｃ Ａｂ细胞株 Ｍ ｃ Ａｂ １ Ｃ７（包被）和 Ｈ Ｒ Ｐ１ Ｂ５ 作为检测用的 Ｍ ｃ Ａｂ，用其建立了检测囊虫 Ｃ Ａ 的双抗体夹心 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ方法，并研制了囊虫病 Ｃ Ａ 检测试剂盒。试剂盒用于检测囊虫病 Ｃ Ａ，敏感、特异、快速、简便，囊虫病血清 Ｃ Ａ的检出率为 ９１．４３％ ，脑脊液 Ｃ Ａ 的检出率为 ９４．４４％ 。

应用进口鸡传染性法氏囊病酶联免疫试剂盒检测鸡传染性法氏囊病抗体

应用进口鸡传染性法氏囊病酶联免疫试剂盒检测鸡传染性法氏囊病抗体陈娟，步恒富陈德威，赵继勋（军事医学科学院实验动物中心北京１００８５０）（北京农业大学）传染性法氏囊病（ＩＢＤ）是危害幼鸡的一种急性、高度接触性疾病，呈世界性流行，目前已成为养鸡业中最具危...

农药硫丹抗体制备以及酶联免疫试剂盒的研究

硫丹是一种人工合成的有机氯化合物,广泛用作农药杀虫剂。由于该药物具有杀虫范围广、价格低廉、对蜜蜂低毒等优点,因此被广泛应用于防治棉花、果树、大豆、蔬菜、茶及烟草等各种农作物中的害虫。我国于20世纪90年代开始生产硫丹,到2011年,登记使用的硫丹产品有47种,涉及药企43家,称为该药物的第二大生产国。该药物有效期长,但具有生物富集作用,对鱼类、贝类等有较大危害性,对哺乳动物具有累积毒性,已有大量文献报道在蔬菜、水果等农作物中检测到硫丹残留。

人类免疫缺陷病毒1／2型抗体检测酶联免疫试剂盒的研制

采用二聚体合成肽（ＨＩＶ－１ｇｐ４１、ｇｐ１２０、ｐ２４和ＨＩＶ－２ｇｐ３６）包被酶标板条制备成固相抗原，与鼠抗人ＩｇＧ单克隆抗体酶标记物、底物ＴＭＢ及阴阳性参考血清配套制备成ＨＩＶ抗体ＥＩＡ试剂盒，专供检测人血清或血浆ＨＩＶ１／２抗体之用。以荷兰、韩国及万泰试剂作为对照，用该试剂盒对检定所的Ｐａｎｅｌ标准及献血员１５５５０例（其中ＨＣＶ抗体阳性１２８例，ＨＢｓＡｇ阳性４６例）进行检测，四种试剂对检定所Ｐａｎｅｌ标准的１３份阳性血清均呈阳性反应，２８份阴性血清均为阴性；献血员１５５５０例，四种试剂对其中１份血清均呈阳性反应，经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ试验证实为阴性，四种试剂的阴性检出率均为９９．９９％。连续制备三批试剂经中国药品生物制品检定所检定，所检项目全部合格；同时委托检定所进行临床考核，４７份阳性血清全部呈阳性反应，１５０份阴性血清全部为阴性。说明该试剂盒具有很好的敏感性和特异性。

血站实验室梅毒抗体酶联免疫吸附测定检测试剂的应用效果分析

探究血站实验室梅毒抗体(抗-TP)酶联免疫吸附(ELISA)测定检测试剂的应用效果。方法 于2020年1月~2021年9月我站采集的18254份无偿献血标本为研究对象,应用ELISA进行检测,分析检测结果。结果 18254例血液样品中,ELISA检测抗-TP反应性为112例,其中85例被TPPA确证为真阳性,ELISA检测敏感度43.15%、特异度100.00%、准确度99.39%;通过ELISA确诊112例具有抗-TP,其中108例为金豪TP-ELISA反应,TPPA确认数为105例,灵敏度为 97.22% ,特异度为100.00% ,漏诊率为 2.78%;英科创新TP-ELISA反应104例,TPPA确认数为102例,灵敏度为 98.08% ,特异度为100.0% ,漏诊率为 1.92%。结论 ELISA法测试抗-TP酶假阳性率较高,建议报废相应血液,献血者归队并再次献血。

两种检测EB病毒衣壳抗原IgA抗体的酶联免疫吸附试验试剂盒性能比较

人体感染EB病毒（EBV）后会产生多种抗体,EBV衣壳抗原IgA抗体（VCA-IgA）是其中一种,使用酶联免疫吸附试验（ELISA）法可以检测出其存在与否[1,2],但市场上检测VCA-IgA的ELISA试剂盒多种多样。临床实验室所选择的试剂盒由于供货、招标或其他因素等有时需要更换试剂盒,