酶联分光光度法测定3T3-F442A分化细胞表达氨基脲敏感胺氧化酶的活性

测定3T3-F442A细胞分化成脂肪细胞的过程中，细胞表达氨基脲敏感胺氧化酶（Semicarbazide-sensitiveamineoxidase，SSAO）活性的变化情况，用于SSAO病理生理学功能的研究。3T3-F442A细胞在分化的不同天数内，收集细胞，超声波破碎后制备SSAO初提物。用分光光度法研究酶活性的基础上加入一种氧化酶，即采用酶联分光光度法分别研究细胞分化不同时间所表达的SSAO活性。结果显示，体外3T3-F442A细胞在分化过程中，SSAO在细胞内的表达呈曲线上升趋势。分化前细胞内几乎检测不到SSAO的存在，分化的第3d只能检测到少量SSAO，此后，SSAO的表达呈急剧上升趋势，细胞分化后的第6～7dSSAO活性达到高峰。

以1-氯萘酚为底物的分光光度法测定辣根过氧化物酶

提出了1-氯萘酚-H2O2-辣根过氧化物酶（HRP）催化动力学光度法测定HRP的新方法。在pH10.0的B-R缓冲溶液中,HRP催化H2O2氧化1-氯萘酚生成有色化合物,通过测定该有色化合物在波长为580 nm处的吸光度值,间接测定HRP的含量。在所选定的实验条件下,测定HRP的线性范围是3.0×10^-9-5.0×10^-7g/mL,检测下限为2.0×10^-9g/mL。此方法可以应用于测定动植物体内的抗原和抗体。

可变误差多面体分光光度法同时测定联磺甲氧苄啶片三组分的含量

以可变误差多面体法处理多波长分光光度数据同时测定联磺甲氧苄啶片中三组分的含量 ,模拟样品中磺胺甲口恶唑、磺胺嘧啶、甲氧苄啶的回收率分别为 98.89%— 10 1.36 %、98.18%— 10 0 .89% ,98.86 %—10 1.75%相对标准偏差分别为 0 .81%、0 .2 3%、0 .94 %。对 3个批号实际样品的测定结果与药典方法的测定结果吻合。

荧光光度法、高效液相色谱法和酶联免疫法检测食用油黄曲霉毒素B1的比较

对荧光光度法、高效液相色谱法和酶联免疫法在检测食用油黄曲霉毒素B1的过程和结果进行比较。结合数据发现,三种方法在检测过程中各有优劣,检测结果均能满足一般检测要求。因此,检测员因根据实验室的环境设备和样品数量择优选择适合的方法。

分光光度计上酶联免疫检测装置的研制

研制的酶联免疫检测装置由光源系统、定位系统、滤光折射系统３部分构成，可安装在普通的分光光度计上，不改变分光光度计原有结构的性能，即可进行酶联免疫检测分析，经相关分析表明，检测结果与ＤＧ３０２２Ａ型酶联检测仪的相关系数达到极显著水平（ｒ＝０９９７６），且其灵敏度高、重复性好、线性误差小，证明该装置能满足酶联免疫检测分析的要求。

化学发光法和酶联免疫吸附法检测丙型肝炎病毒抗体的观察与对比

目的分析和对比应用化学发光法(CLIA)和酶联免疫吸附法(ELISA)对检测丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)准检率和临床意义。方法收集临床血清标本906例,分别应用化学发光法(CLIA)和酶联免疫吸附法(ELISA)监测,并收集监测后阳性标本和可疑阳性标本。最后用第三代重组免疫印迹法(RIBA-3)进行确定再监测。结果两种方法共筛选出血清标本阳性者43例,可疑阳性标本4例。其中CLIA筛选监测出血清阳性者21例,确证为20例,1例可疑阳性。后经RIBA重新确认监测为阳性。敏感性100%。ELISA筛选监测出血清阳性为22例,阴性者3例,确证后阳性为19例,后经RIBA重新确认监测后1例为阴性,2例为阳性。敏感性为95%。结论 CLIA监测法较ELISA监测法灵敏、准确,使用CLIA提高了临床监测率,减少了漏诊现象。对于CLIA和ELISA监测法均显示可疑时,一定要应用RIBA再确诊定性。

用分光光度法定量检测人血清巨噬细胞抑制因子1

结合基础酶联免疫吸附技术(ELISA),用分光光度法检测人血清中的巨噬细胞抑制因子1(MIC-1)的浓度。通过免疫反应将待测物质衍生化,生成可见光区可检测的复合物。在450nm波长处用分光光度法测定该复合物的吸光度,绘制MIC-1浓度-吸光度校准曲线,方程式为y=2.375-2.378/(1+0.001x)0.938(r=0.999)。根据样本的吸光度推算血清MIC-1的浓度。方法的线性范围为15.625—500.000pg/mL。回收率为98.2%—101.6%,相对标准偏差为1.89%—5.10%。

正交函数分光光度法与吸收度减法联用技术测定咳喘感冒片中咖啡因的含量

采用正交函数分光光度法与吸收度减法联用技术测定咳喘感冒片中咖啡因的含量，平均回收率为９９．４％，变异系数（ＣＶ％）为０．９５％，（ｎ＝６），相关系数（ｒ）为０．９９９４。

酶联免疫吸附法与光激化学发光法检测乙肝病毒的临床价值对比

目的探讨酶联免疫吸附法与光激化学发光法检测乙型肝炎(乙肝)病毒的临床应用价值。方法84例疑似乙肝患者,均抽取清晨空腹静脉血,分为2份,分别进行光激化学发光法和酶联免疫吸附法检测。对比两种检验方法的乙肝两对半指标[乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(HBsAb)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝e抗体(HBeAb)、乙肝核心抗体(HBcAb)]阳性检出率及对乙肝的诊断效果。结果光激化学发光法的HBsAg、HBsAb和HBeAg阳性检出率分别为86.90%、86.90%、85.71%,显著高于酶联免疫吸附法的75.00%、73.81%、72.62%,差异有统计学意义(P<0.05)。光激化学发光法的“小三阳”检出率60.71%显著高于酶联免疫吸附法的45.24%,差异有统计学意义(P<0.05)。实时荧光定量PCR检测乙肝病毒DNA显示:阳性72例、阴性12例。光激化学发光法对乙肝的诊断特异度91.67%高于酶联免疫吸附法的75.00%,但差异无统计学意义(P>0.05);光激化学发光法对乙肝的诊断敏感度98.61%、准确性97.62%显著高于酶联免疫吸附法的87.50%、85.71%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论光激化学发光法用于乙肝病毒血清学检验的敏感度和准确性较高,可作为首选的检验方法,必要时可两者联合,进一步提升诊断准确性。

酶联免疫吸附检验与光激化学发光法检测乙肝病毒的临床对比研究

目的探讨酶联免疫吸附检验与光激化学发光法检测乙肝病毒的临床对比。方法选取该院2018年12月—2019年12月收治的100例乙肝病毒携带者,均经临床确诊,两组乙肝病毒携带者均按照常规方式获取标本,检测患者乙肝病毒标记物(乙肝核心抗体、乙肝e抗原、乙肝e抗体、乙肝表面抗体、乙肝表面抗原),根据不同检测分为两组,对照组(n=50)接受酶联免疫吸附法检测,观察组(n=50)接受光激化学发光法检测,对比两种检测方法的乙肝病毒标记物阳性概率和检测灵敏度。结果观察组乙肝核心抗体、乙肝e抗原、乙肝e抗体、乙肝表面抗体、乙肝表面抗原阳性率分别为70.00%、42.00%、44.00%、24.00%、64.00%,对照组分别为66.00%、42.00%、30.00%、12.00%、50.00%。两组乙肝病毒携带者的乙肝病毒标记物中乙肝核心抗体、乙肝e抗原阳性概率对比差异无统计学意义(χ^(2)=0.368、0.000,P>0.05);观察组乙肝病毒标记物中乙肝e抗体、乙肝表面抗体、乙肝表面抗原阳性概率明显高于对照组,差异有统计学意义(χ^(2)=4.204、4.878、3.998,P<0.05)。光激化学发光法的检测最低浓度为0.05 IU/mL;酶联免疫吸附法的检测最低浓度为0.14 IU/mL;0.05 IU/mL<0.14 IU/mL,说明光激化学发光法的检测灵敏度更高。结论两种检测方法均具有一定价值,但光激化学发光法的检测准确度和灵敏度更高,有利于动态监测乙型肝炎。

光激化学发光免疫分析法测定低浓度HBsAg效果评价

目的比较光激化学发光免疫分析法(LICA)与电化学发光免疫分析法(ECLIA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)及胶体金法测定低浓度HBsAg,并评价LICA测定HBsAg的临床效果。方法以广西壮族自治区临检中心提供的临界值控制品作为质控,经ECLIA筛选的HBsAg标本吸光度与仪器所给临界值(Cut-off)的比值(COI)为1～50(低浓度)的临床标本80例(观察组),HBsAg COI<1的临床标本30例(对照组),分别使用LICA、ECLIA、ELISA及金标法测定。结果 LICA测定HBsAg的灵敏度为0.25ng/mL,平均批内变异系数(CV)为8.6%;ECLIA法测定HBsAg的灵敏度为0.12ng/mL,CV为7.8%;ELISA法测HBsAg灵敏度为0.50ng/mL,CV为11.9%,胶体金法灵敏度1ng/mL。观察组标本中LICA检出阳性为79例,ELISA检出阳性为75例,胶体金法检出阳性为20例。结论 LICA检测HBsAg与ECLIA有很高的符合率,在低浓度的HBsAg检测中,可最大程度地减少假阴性结果,且该法可进行自动化定量检测,适于临床使用。

用于直接检测微量酶联免疫吸附试验反应结果的改装分光光度计

酶联免疫吸附试验是70年代初提出的抗原抗体反应新技术,所得结果特异性高。应用酶的触媒作用,使反应的敏感性超过免疫荧光试验,相当于放射免疫试验。应用范围广泛,操作简便,不需要贵重仪器及特殊设备。二年来国内有部分单位开展这项工作,看来有发展前途。

真核细胞顺乌头酸酶活性检测新技术——胶内酶活性分析法

顺乌头酸酶(aconitase,Aco)是细胞内重要的铁硫蛋白酶,它催化细胞内柠檬酸经中间产物顺乌头酸生成异柠檬酸.真核细胞中顺乌头酸酶有两种,分别定位在细胞质的顺乌头酸酶1(cAco)和定位在线粒体的顺乌头酸酶2(m-Aco).检测它们活性的变化能敏感地反映出细胞中能量代谢、自由基产生、铁硫簇组装及铁代谢水平的改变.顺乌头酸酶活性的传统检测方法通常是测定细胞中总的顺乌头酸酶活性,该方法难以准确区分出c-Aco和m-Aco各自的活性变化.因此我们建立一种胶内酶活性分析法检测顺乌头酸酶活性.该方法利用非变性电泳技术将c-Aco和m-Aco浓缩分离,通过泡染底物显色,条带颜色深浅反映了酶活性的强弱.同时,比较了胶内酶活性分析法和分光光度法检测细胞内c-Aco和m-Aco的活性,并对比检测了过氧化氢处理细胞前后Aco活性的变化.结果显示,这两种方法均可敏感地检测出Aco的活性改变,并有广泛的细胞系实用性,但胶内酶活性分析法可区别测定c-Aco和m-Aco活性,不需繁琐的细胞质和线粒体分离,简便易行.文中介绍的线粒体分离纯化技术也为线粒体功能深入研究提供了一个快速、高效的分离纯化方法.

克伦特罗小分子半抗原偶联比率的测定方法研究

利用重氮化两步法将盐酸克伦特罗(CL)分别偶联到牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)上制得了免疫抗原BSA-CL和包被抗原OVA-CL。建立了用紫外分光光度法测定偶联比率的方法,测得它们的偶联比率分别为39∶1和24∶1。

化学发光成像分析法定量检测人尿液中β-人绒毛膜促性腺激素

采用一种灵敏、简单的方法, 可实现对β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)的高通量检测.本法具有酶联免疫吸附(ELISA)法的特异性、增强化学发光法(ECL)的高灵敏度及化学发光成像分析高样品通量等优点.冷却电感耦合 (CCD)成像系统被用于检测增强化学发光信号.发光强度值与β-HCG在12.5 ～ 400 mIU/mL范围内呈线性关系;检出限为4 mIU/mL.测定了妇女尿液中β-HCG的含量,分析结果与医院的诊断结果一致.

葡萄糖氧化酶-过氧化物酶偶联体系葡萄糖分析

酶催化反应具有高效、快速、高选择性,在定量分析领域应用广泛.本文采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶偶联体系,用动力学方法对样品中葡萄糖含量进行分光光度测定,得到了较为满意的结果.